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JoVE Journal Developmental Biology
Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

Usando Ex Vivo Culturas Vertical Gota de toda fetais Órgãos para estudar processos de desenvolvimento durante Rato Organogenesis

Full Text
13,288 Views
09:47 min
October 21, 2015

DOI: 10.3791/53262-v

Sarah J. Potter1, Tony DeFalco1

1Division of Reproductive Sciences,Cincinnati Children's Hospital Medical Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

A cultura de gotículas verticais ex vivo é uma alternativa às técnicas experimentais atuais in vitro e in vivo. Este protocolo é fácil de executar e requer quantidades menores de reagente, ao mesmo tempo em que permite a capacidade de manipular e estudar a vascularização, morfogênese e organogênese fetal.

O objetivo geral deste procedimento é examinar os efeitos de inibidores de pequenas moléculas no desenvolvimento de órgãos fetais usando uma técnica de cultura de gotículas ex vivo. Isso é feito abrindo primeiro o peritônio de uma rata grávida e removendo o embrião contendo o útero. Em seguida, os embriões são removidos do útero e liberados da gema e dos sacos amnióticos.

Em seguida, o complexo de incitação é dissecado e isolado do embrião. Finalmente, o complexo Meris agudo é cultivado em uma gota com ou sem um inibidor de molécula pequena. Em última análise, a microscopia de imunofluorescência é usada para mostrar mudanças na arquitetura do órgão usando anticorpos específicos do tipo de célula.

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Biologia do Desenvolvimento edição 104 ex vivo Cultura gota morfogênese organogênese testículo fetal inibidor de pequena molécula vascularização biologia do desenvolvimento rato

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