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DOI: 10.3791/53414-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
A capacidade de migrar é uma função chave de muitos tipos diferentes de células, incluindo células estromais mesenquimais (MSCs). No entanto, quantificar as alterações na capacidade migratória após os danos é um desafio. Este protocolo descreve um ensaio de migração facilmente adaptável que usa estatísticas rigorosas para quantificar as mudanças na capacidade migratória do MSC após danos.
O objetivo geral deste ensaio é detectar alterações na capacidade migratória das células estromais mesenquimais pulmonares após danos com extrato solúvel de fumaça de cigarro. Este método pode ser usado para responder a questões-chave no campo da biologia regenerativa pulmonar, incluindo como a capacidade migratória das células progenitoras pulmonares pode ser melhorada para ajudar no reparo pulmonar. A principal vantagem dessa técnica é que ela foi otimizada para fornecer melhores medições quantitativas para a migração celular, mantendo-se econômica de executar e fácil de personalizar.
Nesta demonstração, o ensaio de arranhões será usado para quantificar a capacidade migratória das células estromais mesenquimais do pulmão murino, ou MSCs. Após a exposição ao extrato solúvel de fumaça de cigarro, as MSCs são cultivadas em meio completo em placas de 60 milímetros e danificadas conforme descrito no texto do protocolo. Uma confluência apropriada é importante para o ensaio de arranhão porque garante que o software de imagem possa identificar corretamente os limites do arranhão.
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