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Modelagem quimioterapia leucemia resistente In Vitro
Modelagem quimioterapia leucemia resistente In Vitro
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JoVE Journal Medicine
Modeling Chemotherapy Resistant Leukemia In Vitro

Modelagem quimioterapia leucemia resistente In Vitro

Full Text
9,584 Views
08:41 min
February 9, 2016

DOI: 10.3791/53645-v

William L. Slone*1, Blake S. Moses*1, Rebecca Evans1, Debbie Piktel1, Karen H. Martin1,2, William Petros1, Michael Craig1, Laura F. Gibson1,3

1Alexander B. Osborn Hematopoietic Malignancy and Transplantation Program of the Mary Babb Randolph Cancer Center, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine, 2Department of Neurobiology and Anatomy, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine, 3Department of Microbiology, Immunology and Cell Biology, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

O presente relatório resume um protocolo que pode ser utilizado para modelar a influência do nicho do microambiente da medula óssea nas células leucêmicas, com ênfase no enriquecimento da subpopulação mais quimiorresistente.

O objetivo geral deste procedimento é modelar melhor a leucemia linfoblástica aguda resistente, ou LLA, in vitro. Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave no tratamento da LLA refratária sobre como o microambiente da medula óssea influencia a resistência quimioterápica das células da LLA. As principais vantagens dessa técnica são que ela é consideravelmente mais barata e menos demorada do que a utilização de modelos animais tradicionais para examinar a defesa de drogas em células ALL refratárias.

Comece semeando cinco a 20 vezes 10 até a sexta células leucêmicas em 10 mililitros de meio de cultura específico do tumor em uma placa de 100 milímetros de 80 a 90% de células estromais da medula óssea confluentes ou osteoblastos. De quatro em quatro dias, inclinar a placa para o lado e aspirar todos, à excepção de um mililitro, do meio, tendo o cuidado de não perturbar a camada celular aderente. Em seguida, adicione cuidadosamente nove mililitros de meio de cultura de células leucêmicas frescas gota a gota no canto da placa ao longo do lado para garantir uma interrupção mínima das células aderentes.

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