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Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

analisando In Vivo Migração celular usando transplantes de células e de imagem Time-lapse em embriões Zebrafish

Full Text
8,320 Views
11:39 min
April 29, 2016

DOI: 10.3791/53792-v

Florence A. Giger1, Julien G. Dumortier2, Nicolas B. David1

1CNRS UMR8197 – INSERM U1024,IBENS, Institut de Biologie de l'École Normale Supérieure, 2Department of Physiology Development and Neuroscience,University of Cambridge

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol outlines a method to analyze the function of a candidate gene in controlling in vivo cell migration using zebrafish embryos. By combining cell transplantation with live imaging techniques, researchers can investigate the role of specific genes in cell movement.

Key Study Components

Area of Science

  • Cell migration
  • Gene function analysis
  • Zebrafish model systems

Background

  • Cell migration is crucial for various biological processes.
  • Understanding gene roles in migration can provide insights into developmental biology.
  • Zebrafish are a valuable model for studying in vivo processes.
  • This method allows for the creation of mosaic embryos for better imaging.

Purpose of Study

  • To analyze the function of candidate genes in cell migration.
  • To address key questions in the field of cell migration.
  • To enhance understanding of gene roles in developmental processes.

Methods Used

  • Cell transplantation in zebrafish embryos.
  • Live imaging techniques to observe cell behavior.
  • Preparation of specialized transplantation needles using micro pipette pullers.
  • Creation of mosaic embryos for improved imaging quality.

Main Results

  • Successful analysis of gene function in cell migration.
  • Demonstrated the advantages of using zebrafish for in vivo studies.
  • Provided insights into the role of candidate genes in migration.
  • Established a reliable method for future research in this area.

Conclusions

  • The protocol effectively combines multiple techniques for studying cell migration.
  • Findings contribute to the understanding of gene functions in developmental biology.
  • This approach can be applied to investigate other candidate genes in future studies.

Frequently Asked Questions

What is the main goal of this protocol?
The main goal is to analyze the function of a candidate gene in controlling in vivo cell migration using zebrafish embryos.
Why are zebrafish used in this study?
Zebrafish are used due to their transparency and the ability to observe live cell migration in vivo.
What techniques are combined in this protocol?
The protocol combines cell transplantation, live imaging, and cytoskeletal labeling techniques.
What is the advantage of creating mosaic embryos?
Mosaic embryos allow for better imaging and analysis of cell behavior during migration.
How are the transplantation needles prepared?
Needles are prepared using a micro pipette puller and microforge to achieve the desired diameter and bevel.
What insights can this method provide?
This method can help determine the role and importance of new candidate genes in cell migration.

Combinando transplante de células, marcação do citoesqueleto e abordagens de perda/ganho de função, este protocolo descreve como a placa pré-cordal prospectiva de peixe-zebra migratória pode ser usada para analisar a função de um gene candidato na migração celular in vivo.

O objetivo geral deste procedimento é analisar a função de um gene candidato no controle da migração celular in vivo usando transplante de células combinado com imagens ao vivo no embrião de peixe-zebra. Este método pode ajudar a abordar questões-chave no campo da migração celular, como determinar o papel e a importância de novos genes candidatos na migração celular in vivo. A principal vantagem dessa técnica é que ela cria embriões em mosaico, o que permite uma boa imagem e adenomiose celular.

Para preparar agulhas de transplante de células, use um extrator de micropipeta para puxar um copo capilar. Em seguida, com uma microforja, corte a ponta da agulha no ponto em que o diâmetro interno é de 35 micrômetros. Usando um micromoedor, chanfre a extremidade cortada do capilar em um ângulo de 45 graus.

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