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DOI: 10.3791/53792-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines a method to analyze the function of a candidate gene in controlling in vivo cell migration using zebrafish embryos. By combining cell transplantation with live imaging techniques, researchers can investigate the role of specific genes in cell movement.
Combinando transplante de células, marcação do citoesqueleto e abordagens de perda/ganho de função, este protocolo descreve como a placa pré-cordal prospectiva de peixe-zebra migratória pode ser usada para analisar a função de um gene candidato na migração celular in vivo.
O objetivo geral deste procedimento é analisar a função de um gene candidato no controle da migração celular in vivo usando transplante de células combinado com imagens ao vivo no embrião de peixe-zebra. Este método pode ajudar a abordar questões-chave no campo da migração celular, como determinar o papel e a importância de novos genes candidatos na migração celular in vivo. A principal vantagem dessa técnica é que ela cria embriões em mosaico, o que permite uma boa imagem e adenomiose celular.
Para preparar agulhas de transplante de células, use um extrator de micropipeta para puxar um copo capilar. Em seguida, com uma microforja, corte a ponta da agulha no ponto em que o diâmetro interno é de 35 micrômetros. Usando um micromoedor, chanfre a extremidade cortada do capilar em um ângulo de 45 graus.
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