Isolamento e caracterização de células individuais de embriões Zebrafish

O objetivo geral deste experimento é isolar células únicas de embriões de peixe-zebra em estágio inicial para sua captura em um sistema multiplex de célula única baseado em microfluídica para avaliar a expressão gênica de células individuais. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da biologia do desenvolvimento, como quais mudanças transcricionais as células sofrem durante a especificação e diferenciação. A principal vantagem dessa técnica é que ela é uma abordagem imparcial para revelar a heterogeneidade que é mascarada nas técnicas convencionais de base populacional.

Geralmente, indivíduos novos nessa técnica terão dificuldades porque gerar as preparações viáveis de células únicas é tecnicamente desafiador, mas essencial para a análise a jusante. Uma vez dominado, o processamento de todas as amostras de embriões em células lisadas únicas em um chip microfluídico integrado pode ser concluído em seis horas se as etapas forem executadas corretamente. Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de garantir que apenas células individuais sejam capturadas no dispositivo microfluídico.