Identificação de condições críticas para Immunostaining no Pea Aphid Embriões: Aumento Tissue permeabilidade e diminuir a coloração de fundo

O objetivo geral deste protocolo de imunocoloração é detectar a expressão de proteínas nos embriões de pulgões. São identificadas condições críticas que aumentam a permeabilidade do tecido e diminuem a coloração de fundo, ambos problemas de longa data ao tingir tecidos embrionários de pulgões. A principal vantagem dessa técnica é que ela fornece condições específicas para a penetração efetiva de anticorpos e redução da coloração de fundo, que geralmente não são descritas em um protocolo de imunocoloração padrão.

Tivemos essa ideia dessa medida pela primeira vez quando estávamos estudando como as células germinativas são especificadas em um pulgão da ervilha, uma variedade de modelos de insetos, para estudos genômicos e ambientais. A cepa de laboratório do pulgão da ervilha, a. pisum, foi originalmente coletada no centro de Taiwan e foi criada em plantas hospedeiras por mais de 300 gerações.