Elaboração e análise de In Vitro Três mama Dimensional Carcinoma Surrogates

O objetivo geral deste conjunto de procedimentos é gerar culturas de células tridimensionais para funcionar como substitutos de câncer de mama in vitro e apresentar um método para medir o crescimento celular em seções histológicas dos substitutos. A cultura de células tridimensional é um método fisiologicamente mais relevante de modelar o comportamento celular in vitro do que a cultura de células bidimensional. Ao alterar a composição celular em condições experimentais, esse conjunto de procedimentos pode ser adaptado para abordar uma variedade de questões biológicas e avaliar a eficácia de terapias candidatas.

Para incorporar as células na ECM, no gelo, adicione as células e os quatro primeiros componentes relacionados listados na tabela um do manuscrito anexo, em um tubo de microcentrífuga de dois milímetros. Em seguida, misture-os delicadamente pipetando e evite formar bolhas. Monitore o nível de pH usando o vermelho de fenol no 10XD MEM para garantir que a mistura mostre uma cor laranja-rosa, indicando um pH de sete.