Name: Abordagens ecocardiograma e protocolos de Comprehensive Caracterização fenotípica de doença cardíaca valvular em ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-02-14T12:30:00.000+00:00
Duration: 12 min 12 s
Description: Aprenda ecocardiografia para caracterização fenotípica completa de doença valvular cardíaca em camundongos. Este protocolo padronizado permite detectar disfunção valvular e compreender a interação entre função cardíaca e valvular.

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Este trabalho foi apoiado por bolsas do NIH HL111121 (JDM) e TR000954 (JDM).

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<li>Fine, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+and+right+ventricular+strain+and+strain+rate+measurement+in+normal+adults+using+velocity+vector+imaging%3A+an+assessment+of+reference+values+and+intersystem+agreement%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Left and right ventricular strain and strain rate measurement in normal adults using velocity vector imaging: an assessment of reference values and intersystem agreement.</a> Int J Cardiovasc Imaging. 29, 571-580 (2013).</li>
<li>Pernot, M., Fujikura, K., Fung-Kee-Fung, S. D., Konofagou, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ECG-gated%2C+mechanical+and+electromechanical+wave+imaging+of+cardiovascular+tissues+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">ECG-gated, mechanical and electromechanical wave imaging of cardiovascular tissues in vivo.</a> Ultrasound Med Biol. 33, 1075-1085 (2007).</li>
<li>Liu, J. H., Jeng, G. S., Wu, T. K., Li, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ECG+triggering+and+gating+for+ultrasonic+small+animal+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans+Ultrason+Ferroelectr+Freq+Control%22%5BJournal%5D)">ECG triggering and gating for ultrasonic small animal imaging.</a> IEEE Trans Ultrason Ferroelectr Freq Control. 53, 1590-1596 (2006).</li>
<li>Monin, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-gradient+aortic+stenosis%3A+operative+risk+stratification+and+predictors+for+long-term+outcome%3A+a+multicenter+study+using+dobutamine+stress+hemodynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Low-gradient aortic stenosis: operative risk stratification and predictors for long-term outcome: a multicenter study using dobutamine stress hemodynamics.</a> Circulation. , 319-324 (2003).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

A indução da anestesia indução e manutenção de anestesia adequada é fundamental para a avaliação precisa das mudanças na válvula cardíaca e função cardíaca em ratos. Dada a rápida indução da anestesia induzida por isoflurano eo tempo de wash-out relativamente longo deste anestésico após anestesia profunda, não usamos uma câmara de anestesia stand-alone para a indução. Em vez disso, tal como referido em pormenor acima, os animais são guiados directamente para o cone de anestesia...

O envelhecimento está associado com aumentos progressivos na calcificação cardiovascular 1. Estenose da valva aórtica hemodinamicamente significativa afeta 3% da população com idade superior a 65 2, e os pacientes com estenose da válvula aórtica, mesmo moderada (velocidade de pico de 3-4 m / s) têm uma sobrevida livre de eventos em 5 ano de menos de 40% 3. Atualmente, não existem tratamentos eficazes para retardar a progressão da calcificação da válvula aórtica e substituição da válvula aórtica cirúrgica é o único tratamento disponível para a estenose da válvula aórtica avançada 4. Estudos destinados a ganhar uma compreensão mais profunda dos mecanismos que contribuem para o início e progressão de calcificação da válvula aórtica é um primeiro passo fundamental no caminho para métodos farmacológicos e não-cirúrgicos para gerenciar estenose da valva aórtica 5, 6. Genéticocamundongos ly-alteradas têm desempenhado um papel importante no desenvolvimento de nossa compreensão dos mecanismos que contribuem para uma variedade de doenças e agora estão vindo à tona de estudos sobre os mecanismos que visam a compreensão da biologia da estenose da válvula aórtica 6, 7, 8. Ao contrário de outras doenças cardiovasculares, tais como aterosclerose e insuficiência cardíaca onde-protocolos padrão para avaliar a função ventricular e vascular são, na maior parte bem estabelecida-existem desafios únicos associados com a fenotipagem in vivo da função de válvula de coração em ratinhos. Enquanto comentários recentes têm proporcionado debates aprofundados sobre as vantagens e desvantagens de inúmeras imagens e modalidades invasivos utilizados para avaliar a função da válvula em roedores 9, 10, 11, até à data, não temos conhecimento de uma publicação que fornece uma comprehensive, passo-a-passo protocolo para a função de válvula cardíaca fenotipagem em camundongos. O objetivo deste artigo é descrever os métodos e protocolos para o fenótipo função de válvula cardíaca em camundongos. Todos os métodos e procedimentos foram aprovados pelo Comitê Animal Care Institucional e Use a Mayo Clinic. Os principais componentes deste protocolo incluem a profundidade da anestesia, a avaliação da função cardíaca, bem como a avaliação da função de válvula cardíaca. Esperamos que este relatório não só servirá para orientar os investigadores interessados ​​em prosseguir a investigação no domínio da doença da válvula do coração, mas também vai iniciar um diálogo nacional e internacional relacionada com a padronização do protocolo para garantir a reprodutibilidade dos dados e validade neste campo de rápido crescimento. Importante, uma imagem com o uso de sistemas de ultra-som de alta resolução exige um conhecimento prático dos princípios da ultra-sonografia (e terminologia comumente utilizados em ultra-sonografia), uma compreensão do princip fundamentaisles da fisiologia cardíaca e experiência significativa com a ultra-sonografia para permitir a avaliação precisa e tempo-eficiente da função cardíaca em roedores.

<table><tbody><tr><td>Máquina de ultrassom de alta resolução</td><td>VisualSonics, Fujifilm</td><td>Vevo 2100&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Difusor de isoflurano (capaz de fornecer 1% a 1,5% de isoflurano misturado com 1 L/min 100% O2</td><td>VisualSonics, Fujifilm</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Transdutores para camundongos pequenos (550D) ou camundongos maiores (400)</td><td>MicroScan, VisualSonics, Fujifilm</td><td>MS 550D, MS 400</td><td></td></tr><tr><td>Animal platform</td><td>VisualSonics, Fujifilm</td><td>11503</td><td></td></tr><tr><td>Unidade</td> <td>avançada de monitoramento fisiológicoVisualSonics, Fujifilm</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Terrell</td><td>NDC 66794-019-10</td><td></td></tr><tr><td>Cone de nariz e tubulação conectados ao difusor de isoflurano e 100% O2</td><td>Custom Engineered in-house</td><td>--</td><td></td></tr><tr><td>Hair razor</td><td>Andis Super AGR+ vet pack clipper</td><td>AD65340</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound gel</td><td>Parker Laboratories</td><td>REF 01-08</td><td></td></tr><tr><td>Gel de eletrodo&nbsp;</td><td>Parker Laboratories</td><td>REF 15-25</td><td></td></tr><tr><td>Fitas adesivas</td><td>Fisher Laboratories</td><td>1590120B</td><td></td></tr><tr><td>Toalhas de</td><td></td><td></td><td></td> papel</tr></tbody></table>

abordagens ecocardiograma e protocolos de comprehensive caracterização fenotípica de doença cardíaca valvular em ratos

Echocardiographic Approaches and Protocols for Comprehensive Phenotypic Characterization of Valvular Heart Disease in Mice

O objetivo deste manuscrito e do vídeo que o acompanha é fornecer uma visão geral dos métodos e abordagens usados para imagens da função valvar cardíaca em roedores, com descrições detalhadas dos métodos apropriados para anestesia, as janelas ecocardiográficas utilizadas, os planos de imagem e orientações de sonda para aquisição de imagens, os métodos para análise de dados e as limitações das tecnologias emergentes para a avaliação da função cardíaca e valvar. É importante ressaltar que também destacamos várias áreas futuras de pesquisa em imagens cardíacas e valvares cardíacas que podem ser aproveitadas para obter informações sobre a patogênese da doença valvar em modelos animais pré-clínicos. Propomos que o uso de uma abordagem sistemática para avaliar a função cardíaca e valvar cardíaca em camundongos pode resultar em dados mais robustos e reprodutíveis, bem como facilitar a descoberta de fenótipos anteriormente subestimados em camundongos geneticamente alterados e / ou fisiologicamente estressados.

Exemplos de imagens que são rotineiramente obtidos a partir de animais imagiologia ultra-sons cardíacos são incluídos neste manuscrito. Uma ilustração do posicionamento do transdutor sobre o peito do animal é fornecida para dar ao leitor uma compreensão clara de que o transdutor está posicionado para obtenção de imagens tal como descrito. Uma fotografia do laboratório de ultra-som set-up também está incluído para enfatizar a importância do equipamento adequado, especialmente o transdutor...

Este protocolo fornece uma descrição detalhada da abordagem ecocardiográfica para fenotipagem abrangente do coração e da função da válvula cardíaca em camundongos.

Abordagens ecocardiograma e protocolos de Comprehensive Caracterização fenotípica de doença cardíaca valvular em ratos

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in ...

O objetivo geral deste protocolo de eco é mostrar métodos e abordagens usados para obter imagens da função da válvula cardíaca em roedores. Os métodos que mostraremos hoje podem responder a perguntas-chave no campo das doenças cardíacas, com ênfase específica na avaliação do coração como unidade integrada em condições de doença valvar cardíaca. As implicações dessa abordagem são silenciosamente profundas para o campo das doenças das válvulas cardíacas, porque a avaliação ecocardiográfica abrangente do coração não apenas permitirá a detecção de disfunção valvar em várias válvulas cardíacas, mas também permitirá que os investigadores entendam a complexa interação entre a função cardíaca e várias medidas da função da válvula cardíaca.Embora esse método possa ser aproveitado para caracterizar modelos animais nos quais a doença da válvula cardíaca é nosso principal defeito, ele também pode ser aplicado a outros sistemas em que a disfunção da válvula cardíaca pode parecer secundária a outros insultos, como insuficiência cardíaca ou aneurisma da aorta torácica. Assim, é nossa recomendação que a fenotipagem cardíaca e valvar cardíaca abrangente seja realizada rotineiramente na maioria dos

echocardiographic-approaches-protocols-for-comprehensive-phenotypic

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Medicina

O ecocardiograma transtorácico oferece um método não invasivo para a avaliação da função cardíaca em camundongos. A combinação de ultra-som Doppler e modalidades podem ser usadas para obter medições dimensionais do coração eo fluxo sangüíneo intracardíaco, que juntos fornecem uma avaliação da pressão arterial sistólica cardíaca diastólica e desempenho.

Ecocardiografia transtorácica em Ratos

Este vídeo demonstra o uso de um trilho montado de alta freqüência da sonda de ultra-som para realizar ecocardiografia de um rato anestesiado. Os métodos de descrever ambas as medições convencionais bidimensional e modo-M da função cardíaca, além de mais novos, ferramentas mais poderosas, como a cor Doppler, análise de tensão, bem como imagens de contraste gerais e específicas.

Ecocardiografia murino e ultra-sonografia

Este vídeo descreve um protocolo para realizar ecocardiografia em um camundongo de laboratório.

Ecocardiografia de camundongos: uma técnica não invasiva para avaliar a morfologia cardíaca

Este artigo fornece um protocolo para a avaliação ecocardiográfica do tamanho do ventrículo direito e hipertensão pulmonar em camundongos. As aplicações incluem a determinação do fenótipo e avaliação de série em modelos de ratos transgênicos e induzida por toxinas de miocardiopatia e doença vascular pulmonar.

Avaliação ecocardiográfica do coração direito em Ratos

O objetivo deste protocolo é avaliar de forma não invasiva alterações cardíacas estruturais e funcionais em um rato modelo da doença de coração criado por constrição aórtica transversal, usando B e M-mode ecocardiografia e cor / impulso de imagem onda Doppler.

Avaliação da morfológicas e funcionais cardíacas Mudanças no Modelo rato de Transverse aórtica constrição por ecocardiográfica de imagem

O protocolo a seguir descreve a metodologia para a aquisição e análise de imagens ecocardiográficas utilizadas para obter o volume atrial esquerdo (LAV) de diâmetro, Aorta (Ao) e diâmetro da artéria pulmonar (PA) em camundongos. Esta técnica é um procedimento não-invasivo, não-terminal que permite a avaliação da função cardiopulmonar.

Murino Ecocardiografia de Esquerda Atrium, Aorta, ea artéria pulmonar

Exame ecocardiográfico é frequentemente usada em ratos. Aparelhos de ultra-som de alta resolução caro foram desenvolvidos para esta finalidade. Este protocolo descreve um procedimento ecocardiográfico acessível, combinado com análises morfométricas histológica para determinar a morfologia cardíaca.

Exame ecocardiográfico e histológico da morfologia cardíaca no Mouse

Aqui nós descrevemos e comparamos duas posições para obter a vista apical da quatro-câmara nos ratos. Essas posições possibilitam a quantificação da função ventricular direita, proporcionam resultados comparáveis e podem ser utilizadas alternadamente.

Mensuração ecocardiográfica dos parâmetros diastólicos do ventrículo direito no mouse

O presente protocolo descreve a avaliação ecocardiográfica da morfologia, função e fluxo sanguíneo coronariano do ventrículo esquerdo em camundongos recém-nascidos de 7 dias de idade.

Caracterização ecocardiográfica da estrutura, função e fluxo coronariano do ventrículo esquerdo em camundongos recém-nascidos

Este artigo detalha os métodos diagnósticos de cardiopatia congênita murina (DCC) usando ecocardiografia fetal, necropsia e captura de imagem de fluorescência episcópica (EFIC) usando microscopia confocal episcópica (ECM) seguida de reconstrução tridimensional (3D).

Um Pipeline para Caracterizar Defeitos Cardíacos Estruturais em Rato Fetal

Aprenda ecocardiografia para caracterização fenotípica completa de doença valvular cardíaca em camundongos. Este protocolo padronizado permite detectar disfunção valvular e compreender a interação entre função cardíaca e valvular.

Abordagens ecocardiograma e protocolos de Comprehensive Caracterização fenotípica de doença cardíaca valvular em ratos

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