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A Cell-Free Assay Using Xenopus laevis Embryo Extracts to Study Mechanisms of Nuclear Size Regulation

Um ensaio-Free Cell Usando Xenopus laevis Embryo Extrai para estudar mecanismos de regulação Tamanho Nuclear

Full Text
8,825 Views
14:27 min
August 8, 2016

DOI: 10.3791/54173-v

Lisa J. Edens1, Daniel L. Levy1

1Department of Molecular Biology,University of Wyoming

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Os mecanismos de escalonamento celular e intracelular permanecem indescritíveis. O uso de extratos de embriões de Xenopus tem se tornado cada vez mais comum para elucidar mecanismos de regulação do tamanho das organelas. Este método descreve a preparação do extrato de embrião e um novo ensaio de escala nuclear através do qual os mecanismos de regulação do tamanho nuclear podem ser identificados.

O objetivo geral deste procedimento é usar extratos de ovos e embriões de Xenopus para produzir um ensaio no qual núcleos grandes encolhem menores. Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave sobre a biologia celular nuclear, como quais são os mecanismos que regulam o tamanho nuclear? A principal vantagem desta técnica é que a composição e as atividades do extrato livre de células de Xenopus são facilmente manipuladas para avaliar os fatos sobre o tamanho nuclear.

Depois de preparar extratos de óvulos de Xenopus, espermatozóides desmembrados e núcleos montados de acordo com o protocolo de texto, colete os ovos recém-postos segurando sapos sobre uma placa de Petri reutilizável de vidro. Promova a postura de ovos aplicando uma leve pressão na região lombar perto da cloaca. Apoie o prato a aproximadamente 45 graus para permitir que os ovos se acumulem ao longo da borda do prato.

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Biologia Celular Edição 114 Xenopus laevis Extrato de embrião a regulação tamanho nuclear desenvolvimento ensaio de encolhimento nuclear In vitro Tamanho organelo dimensionamento

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