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DOI: 10.3791/54173-v
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Os mecanismos de escalonamento celular e intracelular permanecem indescritíveis. O uso de extratos de embriões de Xenopus tem se tornado cada vez mais comum para elucidar mecanismos de regulação do tamanho das organelas. Este método descreve a preparação do extrato de embrião e um novo ensaio de escala nuclear através do qual os mecanismos de regulação do tamanho nuclear podem ser identificados.
O objetivo geral deste procedimento é usar extratos de ovos e embriões de Xenopus para produzir um ensaio no qual núcleos grandes encolhem menores. Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave sobre a biologia celular nuclear, como quais são os mecanismos que regulam o tamanho nuclear? A principal vantagem desta técnica é que a composição e as atividades do extrato livre de células de Xenopus são facilmente manipuladas para avaliar os fatos sobre o tamanho nuclear.
Depois de preparar extratos de óvulos de Xenopus, espermatozóides desmembrados e núcleos montados de acordo com o protocolo de texto, colete os ovos recém-postos segurando sapos sobre uma placa de Petri reutilizável de vidro. Promova a postura de ovos aplicando uma leve pressão na região lombar perto da cloaca. Apoie o prato a aproximadamente 45 graus para permitir que os ovos se acumulem ao longo da borda do prato.
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