26 de julho de 2016
Aqui apresentamos um protocolo para estimar materiais e superfície propriedades ópticas que utilizam o efeito fotoacústico combinado com reflexão interna total. Esta técnica evanescentes photoacoustics baseados em campo pode ser usado para criar um sistema de metrologia fotoacústica para estimar índices de espessuras, a granel e de refração película fina 'materiais, e explorar suas propriedades ópticas.
O objetivo geral deste conjunto de técnicas fotoacústicas é caracterizar as propriedades ópticas de líquidos, sólidos e filmes finos transparentes em um único dispositivo integrado. Este método pode ajudar a responder perguntas fundamentais na área de caracterização de materiais, como espessura estimada e índice de refração. A principal vantagem desta técnica é que o índice de refração do volume, o índice de refração do filme fino, a espessura e a absorção óptica podem ser medidos em um único dispositivo.
Alguns equipamentos devem ser preparados para iniciar o experimento. Primeiro, o experimento requer dois transdutores ultrassônicos, como esses modelos de 10 megahertz utilizados neste protocolo. Cada um possui um cilindro dianteiro de borracha de látex vermelha com nove milímetros de diâmetro e um milímetro de espessura, fixado com epóxi.
O transdutor de referência também é fixado com epóxi a um bloco de acrílico, que atua como espaçador acústico. Outro equipamento que deve ser preparado é o suporte do prisma para fotoacústica baseada em campo evanescente, ou EFPA. O suporte do prisma EFPA é composto por um suporte para prisma e um suporte para transdutor.
Um prisma é acomodado no suporte do prisma. O suporte do transdutor segura um dos transdutores ultrassônicos preparados de modo que o látex fique exposto. Com o prisma e o transdutor no lugar, una as duas partes do suporte do prisma, de forma que o látex fique voltado para o prisma através de um espaço que acomodará uma amostra.
Fixe as peças umas às outras com parafusos. O restante do aparato para este experimento já está posicionado sobre uma bancada óptica. O feixe é produzido por um laser de neodímio em cubo de alumínio e granada com comutação por impulso.
Sua saída vai para um expansor de feixe. Em seguida, há uma abertura ajustável manualmente. O próximo elemento é um cubo divisor de feixe polarizador.
O feixe então entra em um divisor de feixe não polarizador. Uma saída vai para um transdutor ultrassônico montado, que servirá como referência. A outra saída do divisor de feixe vai para o suporte montado do prisma EFPA e seu transdutor.
O feixe que sai do suporte do prisma entra em um bloqueador de feixe. O suporte do prisma EFPA é montado em uma plataforma de translação XY theta para permitir seu posicionamento adequado. Seu ângulo pode ser alterado por um motor de passo controlado por computador.
Para se preparar para o experimento, retorne ao laser e ao expansor de feixe. Utilize lentes para criar uma expansão do feixe de pelo menos um fator três. O feixe deve ser maior do que o absorvedor de látex nos transdutores.
Após trabalhar com o expansor, utilize um nível digital para alinhar o feixe e o suporte do prisma. O lado plano do suporte do prisma deve estar a zero grau em relação ao feixe. Conecte e ligue os transdutores, osciloscópios e monitores controlados por computador.
Use cabos BNC de 50 ohms para conectar o transdutor de referência ao canal zero do osciloscópio. Conecte o transdutor no suporte do prisma EFPA ao canal um. Para as etapas de alinhamento, certifique-se de usar óculos de proteção apropriados contra laser.
No diafragma ajustável, reduza o feixe para um diâmetro de um milímetro. No computador, inicie o software que controlará a execução dos experimentos. Use o software para girar o suporte do prisma até 70 graus.
Olhe para dentro do prisma perpendicularmente ao feixe do laser, a partir do lado, e observe se o ponto do laser é visível no látex. Ajuste manualmente o estágio de translação XY theta até que o ponto do laser esteja corretamente posicionado sobre o transdutor. O objetivo é que o ponto esteja no centro do látex.
Retorne à abertura e expanda-a até sua abertura máxima. No computador, revise as medições de energia provenientes dos transdutores. Neste caso, a linha vermelha é proveniente da medição direta da energia do laser, a referência.
A linha azul é proveniente do transdutor no suporte do prisma EFPA. Verifique se as duas medições têm aproximadamente a mesma magnitude. Quando tudo estiver em ordem, pare a medição, o que automaticamente redefinirá o prisma para zero graus antes de continuar.
A técnica de espectroscopia fotoacústica por reflexão interna total será utilizada para analisar a amostra líquida. A amostra é o corante vermelho direto 81 em água. Além disso, a técnica requer óleo de imersão com índice de refração casado com o prisma, bem como uma lâmina de microscópio como substrato para cobrir a superfície do prisma.
Tenha o suporte de prisma EFPA fora da montagem e aberto para posicionar a amostra. Comece com um prisma e coloque 2,5 microlitros do óleo de imersão em seu centro. Em seguida, posicione o substrato sobre a camada de óleo espalhada.
Em seguida, passe a trabalhar com o látex no transdutor ultrassônico EFPA. Coloque 25 microlitros da amostra líquida sem produzir bolhas. Agora, remonte o suporte EFPA colocando a combinação substrato com óleo de prisma sobre o látex coberto pela amostra.
Comprima o suporte do prisma e aperte a montagem com parafusos de fixação. Quando o suporte EFPA estiver pronto, devolva-o à configuração dos experimentos. Reintroduza o suporte EFPA à sua posição entre os elementos ópticos.
Certifique-se de que todos os componentes estão prontos antes de iniciar a coleta de dados. Utilize um software de laboratório para medir e exibir o sinal acústico gerado pela amostra. Os dados mostram a tensão de pico a pico como função do tempo.
Para se preparar para a refratometria POSS TUR POSS, trabalhe novamente com o suporte de prisma EFPA do conjunto experimental. Separe o suporte para expor o prisma e a borracha do transdutor. Tenha prontos a amostra, o óleo de imersão com índice de refração ajustado ao do prisma e um substrato para cobrir a superfície do prisma.
Coloque 2,5 microlitros de óleo de imersão no centro do prisma. Envolva o óleo colocando um substrato sobre a camada de óleo. Prossiga para o transdutor em seu suporte e adicione 25 microlitros de corante da amostra sobre seu disco de látex.
Uma vez feito isso, coloque o suporte do prisma com seu óleo e substrato sobre o látex ou o transdutor. Comprima os dois suportes juntos e fixe-os com parafusos de montagem. Com o suporte do prisma EFPA no lugar na configuração, vá para o software controlado por computador.
Insira a faixa de ângulos de incidência ao longo da qual o espectro deve ser medido e o tamanho do passo. Execute o programa para medir o espectro e representá-lo como a tensão de pico a pico em função do ângulo. A partir do espectro medido, utilize um software para encontrar e traçar a derivada numérica em relação ao ângulo.
Utilize dados suavizados da derivada numérica para identificar manualmente os mínimos locais e seus respectivos ângulos de incidência. Os mínimos indicam uma transição dos regimes POSS para TUR POSS. Trabalhe com o suporte de prisma EFPA para prepará-lo para espectroscopia fotoacústica por tunelamento óptico.
Tenha os suportes do prisma e do transdutor separados e com óleo de imersão casado em índice com o prisma à mão. A amostra é um filme fino de fluoreto de magnésio depositado sobre uma lâmina de vidro. No centro do prisma, coloque 2,5 microlitros de óleo de imersão.
Após colocar o óleo no lugar, oriente a amostra de modo que a película fina fique voltada para longe do prisma e coloque a amostra sobre o óleo. No suporte do transdutor, coloque 25 microlitros de óleo de imersão sobre a almofada de látex, de forma que cubra toda a superfície sem formar bolhas. Coloque o látex em contato com a amostra e aperte os parafusos de fixação para comprimir o conjunto.
Retorne o suporte de EFPA ao conjunto óptico e prepare-se para executar o experimento. No computador, insira os parâmetros para aquisição de um espectro angular e inicie a medição. Esses dados da espectroscopia fotoacústica por reflexão total interna são representativos da onda acústica gerada a partir de uma amostra absorvedora.
Neste caso, corante vermelho 81 em água. A natureza bipolar da onda ocorre devido à reflexão acústica na interface entre a amostra e o substrato de vidro, onde existe uma grande diferença na impedância acústica. A técnica POSS TUR POSS gera um espectro angular.
Quando a derivada numérica é calculada de forma suavizada, o mínimo local corresponde ao ângulo crítico medido. Conhecendo esse ângulo, é possível calcular o índice de refração do meio no comprimento de onda do laser utilizado no experimento. Este é o espectro angular do sinal normalizado da energia do laser para um filme de magnésio sobre um substrato de vidro óptico NBK-7.
O percentual de tunelamento óptico em função do ângulo de incidência pode ser determinado a partir desses valores. Essas informações permitem a estimativa do índice de refração e da espessura. Ao realizar este procedimento, é importante lembrar-se de evitar a formação de bolhas no óleo ou na amostra.
Depois de assistir a este vídeo, você agora deverá ter uma boa compreensão de como utilizar métodos EFPA para estimar as propriedades ópticas de materiais.
Este artigo apresenta um protocolo para estimar propriedades ópticas de materiais e superfícies utilizando o efeito fotoacústico combinado com reflexão interna total. A técnica permite a caracterização de líquidos, sólidos e filmes finos transparentes em um único dispositivo.
A fotoacústica baseada em campo evanescente (EFPA) permite a avaliação das propriedades ópticas em escala nanométrica de materiais em um único dispositivo integrado, reduzindo a necessidade de múltiplos instrumentos de caracterização. Essa capacidade apóia a descoberta em estágios iniciais ao fornecer medições quantitativas e sensíveis à superfície do índice de refração, espessura e absorção — parâmetros essenciais para prever o comportamento dos materiais em contextos biológicos e farmacêuticos. Ao fornecer dados ópticos reprodutíveis e livres de marcadores em escalas biologicamente relevantes, a EFPA aprimora os fluxos de trabalho de validação de alvos e desenvolvimento de ensaios nos quais as propriedades ópticas influenciam a função, como em sistemas de liberação de fármacos ou interfaces de biossensores.
A EFPA insere-se no continuum de descoberta, desde a validação inicial do alvo até o desenvolvimento pré-clínico, especialmente nos casos em que as propriedades ópticas de materiais, revestimentos ou formulações influenciam o desempenho biológico.