Name: Método alternativo de remoção de otólitos de Sturgeon (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 7 s
Description: Aprenda uma técnica alternativa para extrair otólitos intactos de esturjões ameaçados, como o Lake Sturgeon. Este método preserva estruturas anatômicas críticas e facilita estudos de idade e crescimento em peixes raros.

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Agradecimentos especiais para o St. Regis Divisão Mohawk Ambiental, Welaka National Fish Hatchery, US Fish and Wildlife Service Research Unit, Southern Illinois University, US Fish and Wildlife Service Nordeste Fisheries Center, Sterling Caviar, Universidade da Califórnia-Davis, Garrison Dam National Fish incubatório, Bears Bluff National Fish Hatchery, e US Fish and Wildlife Service Panamá Office Resource Cidade das Pescas sua ajuda fornecimento de esturjão para este projeto. este artigo é Contribuição 2013 do USGS Great Lakes Science Center.

NOTA IMPORTANTE: Devido ao estado de protecção de todas as espécies de esturjão nos Estados Unidos, permite adquirir e processar peixes foram obtidas antes do procedimento laboratorial. Todos os espécimes foram adquiridos a partir de fontes de incubação post mortem devido a causas naturais e eliminados após um procedimento padrão. 1. Preparação de Amostras <ol><li> Antes de quaisquer incisões estabelecer carcaça esturjão no seu lado e usando uma fita de medição para medir o comprimento total da cabeça até à ponta da cauda para o mais próximo de 1 mm. (Figura 1A) </li><li> Pesar esturjão de carcaça em uma escala tarado a 1 g mais próximo. Avaliar carcaça para quaisquer marcas externas ou marcas e registro. </li></ol> 2. Otolith Extração <ol><li> Adicione uma incisão vertical com uma grande faca da faixa entre a base do crânio e a primeira scute dorsal através do corpo para separar a cabeça do corpo (Figura 1B). Depois de retirar a cabeça, turn a cabeça para que a boca está voltada para cima (Figura 1C). </li><li> Remover tecidos moles da boca e brânquias usando a faca da faixa para cortar ao longo do lado ventral do crânio (Figura 1D). Faça uma incisão com uma serra óssea elétrica a partir da ponta do focinho até a base do crânio até bissetriz completamente a cabeça (Figura 1E). Separaram-se as duas metades com a mão para expor a cavidade do cérebro (Figura 2A). </li><li> Retire e matéria cerebral (Caixa vermelha à esquerda) com uma pinça para ver canais semicirculares (Caixa vermelha à direita) dentro da cavidade cerebral (Figura 2B) descartar. </li><li> Remover cartilagem do canal semicircular da cavidade cérebro com uma pinça (Figura 2C). Cuidadosamente perfurar cartilagem canal semicircular com a ponta do fórceps e remover otolítica (Figura 2D). Remova o otolith (estrutura óssea duro dentro da cartilagem) com uma pinça de cartilagem canal semicircular (Figura 2E) </strong&gt;. </li><li> Repita os passos de 2,3-2,4 para remover otolítica a partir da outra metade do crânio. </li><li> Mergulhe os otólitos em 92% de etanol durante 5 segundos para remover qualquer cartilagem. Coloque otólitos em um 25 ml frasco de cintilação aberta para secar por 24 horas. </li></ol>

<ol><li>Auer, N. A. Conservation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAuer%2C+NA+%22Sturgeons+and+Paddlefish+of+North+America%22">Sturgeons and Paddlefish of North America</a>. LeBreton, G. T. O., Beamish, F. W. H., McKinley, R. S. 27, Kluwer Academic Publishers. 252-276 (2004).</li>
<li>Sturgeon Specialists Group, sturgeon conservation. IUCN (International Union for the Conservation of Nature). , Source: 
 <a target="_blank" href="www.iucn.org">www.iucn.org</a> (2008).</li>
<li>Campana, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy%2C+precision+and+quality+control+in+age+determination%2C+including+a+review+of+the+use+and+abuse+of+age+validation+methods%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Fish+Biology%22%5BJournal%5D)">Accuracy, precision and quality control in age determination, including a review of the use and abuse of age validation methods).</a> Journal of Fish Biology. 59, 197-242 (2001).</li>
<li>Bruch, R. M., Campana, S. E., Davis-Foust, S. L., Hansen, M. J., Janssen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lake+Sturgeon+age+validation+using+bomb+radiocarbon+and+known-age+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Lake Sturgeon age validation using bomb radiocarbon and known-age fish.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 138, 361-372 (2009).</li>
<li>Baremore, I. E., Rosati, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+validated%2C+minimally+deleterious+method+for+ageing+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">A validated, minimally deleterious method for ageing sturgeon.</a> Fishery Bulletin. 112, 274-282 (2014).</li>
<li>Stevensen, J. T., Secor, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age+determination+and+growth+of+Hudson+River+Atlantic+sturgeon%2C+Acipenser+oxyrhynchus%5BTitle%5D)+AND+%22Fishery+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Age determination and growth of Hudson River Atlantic sturgeon, Acipenser oxyrhynchus.</a> Fishery Bulletin. 97, 153-166 (1999).</li>
<li>Brennan, J. S., Cailliet, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+age-determination+techniques+for+white+sturgeon+in+California%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fishery+Society%22%5BJournal%5D)">Comparative age-determination techniques for white sturgeon in California.</a> Transactions of the American Fishery Society. 118, 296-310 (1989).</li>
<li>Rossiter, A., Noakes, D. L. G., Beamish, F. W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+age+estimation+for+the+lake+sturgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Transactions+of+the+American+Fisheries+Society%22%5BJournal%5D)">Validation of age estimation for the lake sturgeon.</a> Transactions of the American Fisheries Society. 124, 777-781 (1995).</li>
<li>Chalupnicki, M. A., Dittman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((North+American+Sturgeon+Otolith+Morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Copeia%22%5BJournal%5D)">North American Sturgeon Otolith Morphology.</a> Copeia. , 260-266 (2016).</li>
<li>Secor, D. H., Dean, J. M., Laban, E. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSecor%2C+DH+%22Manual+for+otolith+removal+and+preparation+for+microstructural+examination%22">Manual for otolith removal and preparation for microstructural examination</a>. , Barach Press. Columbia, South Carolina. (1991).</li>
</ol>

Qualquer uso de nomes comerciais, de produtos ou de empresas é apenas para fins descritivos e não implica endosso do governo dos EUA.

A visão geral de um método alternativo de extrair otólitos de carcaças de esturjão foi detalhado. É importante notar que a atenção especial é necessário para a colocação de incisão lateral na linha média do crânio, de modo a bissectar o crânio de maneira uniforme para garantir que não haja danos para os otolitos durante a dissecção. Se a incisão não é suficientemente profundo para bissectar completamente o crânio que vai ser muito difícil para expor a cavidade do cérebro, onde a localização dos otolitos é claramente vis...

Sturgeon (Acipenseridae) populações em todo o mundo têm vindo a diminuir para mais de um século devido aos impactos, incluindo a perda de habitat, fragmentação populacional e pesca excessiva de tal forma que muitas populações estão protegidos por leis estaduais e federais 1,2. Agências de gestão de todo o EUA e o mundo têm identificado esturjão como espécie-alvo para a restauração e recuperação 1. Características da população (crescimento, o recrutamento, a dieta) da maioria das populações de esturjão foram estudados para compreender melhor as características básicas de biologia e história de vida 1. Devido ao status de proteção da maioria das populações de esturjão, avaliação de idade é difícil em pequenas populações ameaçadas, onde nenhum sacrifício ou o dano aos indivíduos seja justificada. A extracção de estruturas ósseas para efeitos de estimativa da idade e análise de crescimento tem sido uma técnica comum 3 .A utilização de secções de raios aleta para determinar a idade de Sturgeno tornou-se um método não-letal prático, mas a verificação da técnica tem sido limitada e idade podem ser muito difíceis de decifrar em indivíduos mais velhos (&gt; 15 anos) 4. Os pesquisadores avaliaram o uso de múltiplas estruturas ósseas em Sturgeon para a sua utilização na validação da idade do Golfo do esturjão (Acipenser oxyrinchus desoti) 5, Atlantic Sturgeon (A. o. Oxyrinchus) 6, esturjão branco (A. transmontanus) 7, e Lake Sturgeon (A. fluvescens) 8 concluiu que o primeiro peitoral marginal ray fin desde a idade mais preciso, mas concluiu este procedimento invasivo para ser prejudicial a indivíduos maiores. Atualmente, não há o desenvolvimento da utilização de métricas de forma otolíticos distinguir entre espécies de esturjão norte-americano com uma taxa muito elevada de sucesso 9. Os detalhes sobre o processo de remoção do otolítica com uma incisão dorsal transversal na base do crânio é um otolítica comum adicionalMétodo ction encontrados em toda a literatura e claramente detalhado por Secor et al. (1991) 10. No entanto, este método é difícil de implementar em esturjão que têm crânios muito grossas com otolitos que são pequenas e delicadas e tenderiam a quebrar. A nova revisão da literatura mostra nenhuma outra metodologia detalhada do processo de remoção otolith de esturjão. O objetivo deste trabalho foi detalhar um método alternativo de extrair otólitos do esturjão por entrar na cavidade cerebral do lado ventral.

<table><tbody><tr><td>Placa</td><td></td><td></td> de medição <td>A vara métrica do medidor é preferida</td></tr><tr><td>Balança</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Faca de filetagem Bisturi</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fórceps</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>de amostra Frascos de</td><td></td><td></td><td>cintilação de 25 ml funcionam bem</td></tr></tbody></table>

método alternativo de remoção de otólitos de sturgeon

Alternative Method of Removing Otoliths from Sturgeon

Extraindo os otólitos (ossos do ouvido) de peixes que têm os crânios muito grossas pode ser tempo difícil e muito demorado. A prática comum de fazer uma incisão vertical transversal no topo do crânio com uma mão ou uma serra elétrica pode danificar o otolith se não for realizado corretamente. Esturjões (Acipenseridae) são uma família em particular, que têm um crânio muito grande e grosso. Um novo método de laboratório de entrar na cavidade do cérebro do lado ventral do peixe para expor as otolitos era mais fácil do que os outros métodos de extracção otolíticos encontrados na literatura. Métodos de avaliação na literatura são projetados para o campo e são mais eficientes no processamento de grandes quantidades de peixe rapidamente. No entanto, esta nova técnica foi concebida para ser mais adequado para um ambiente de laboratório em que o tempo não é prensagem e extracção bem sucedida a partir de cada amostra é crítica. O sucesso de encontrar e remover otolitos usando esta técnica é muito alta e não compromete as sstrutura de qualquer maneira. Esta técnica alternativa é aplicável a outras espécies de peixes semelhantes para extrair os otolitos.

O tamanho adulto de esturjão em todo o mundo varia muito, mas a localização das otolitos é consistente. O uso de uma faca afiada filete foi encontrado para remover o tecido mole da boca facilmente mostrado na Figura 1D. Uma serra óssea elétrica é a ferramenta preferida para a incisão lateral para expor a cavidade cerebral na Figura 1E. No entanto, a atenção para que atravessa a linha média do crânio é normalmente necessário otólitos pode ser esmagado dur...

O objetivo do protocolo é mostrar um método eficaz para extrair os otólitos de carcaças de esturjão.

Método alternativo de remoção de otólitos de Sturgeon

Extracting the otoliths (ear bones) from fish that have very thick skulls can be difficult and very time consuming. The common practice of making a ...

O objetivo geral deste método é fornecer uma técnica alternativa eficaz para extrair otólitos intactos de peixes ameaçados, como o esturjão-do-lago. Este método de extração de otólitos pode ajudar a responder perguntas fundamentais sobre a idade e o crescimento dos peixes, a posição dos ossos do ouvido em relação à morfologia cerebral e a microquímica correlacionada ao habitat. A vantagem desta técnica é que, em peixes com crânios espessos e otólitos frágeis, a abertura da cavidade cerebral não danifica os otólitos nem perturba outras estruturas críticas.A ideia para este método foi desenvolvida durante pesquisas sobre a ecologia da restauração de Esturjões ameaçados. Em populações remanescentes, raramente são obtidos espécimes para necropsia e análise laboratorial. Portanto, coletar com sucesso dados de idade e outras informações a partir de animais individuais é essencial para preencher as lacunas de dados da espécie.Mark realizará o procedimento de remoção dos otólitos do Esturjão-do-lago. Para extrair os otólitos, primeiro posicione o Esturjão com o ventre para baixo e use uma fita métrica para determinar o comprimento total, da ponta do focinho até a extremidade da cauda, com

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Research

JoVE Journal

Environment

Ambiente

O objectivo deste vídeo é demonstrar os procedimentos para a obtenção de células ciliadas saudáveis, intactas a partir dos órgãos do ouvido interno de peixes-zebra adultos e, em seguida, utilizando-os para os estudos de patch clamp para caracterização das propriedades biofísicas dos seus canais dependentes da voltagem.

Gravações patch clamp em células ciliadas da orelha interna Isolado de Zebrafish

Este manuscrito descreve um protocolo para rastrear a redistribuição de ionócitos branquiais e sua inervação usando uma técnica de coloração diferencial de tempo acoplada à desnervação branquial bilateral completa.

A técnica de coloração diferencial Tempo Juntamente com completa Bilateral Gill denervação para Estudar Ionocytes no Peixe

Medindo os impactos de contaminantes ambientais sobre o comportamento dos peixes é muitas vezes subjetiva e desafiando particularmente quando se trata de endpoints subletais. Descrevemos métodos, incluindo a tecnologia de vídeo para quantificar o comportamento de natação do início da vida estágio esturjão branco (Acipenser transmontanus) durante e após 96 horas exposições agudas a várias concentrações de cobre.

Quantificar Peixe Natação comportamento em resposta à exposição aguda de Aqueous Copper Usando Computer Assisted Vídeo e Análise de Imagem Digital

O esqueleto branquial, incluindo rastros branquiais, dentes faríngeos e ossos branquiais, serve como o principal local de processamento de alimentos na maioria dos peixes. Aqui descrevemos um protocolo para dissecar e montar esse esqueleto interno em esgana-gata de três espinhas. Este método também é aplicável a uma variedade de outras espécies de peixes.

Dissecção e pay-per-montagem do Threespine Stickleback branquial Skeleton

(Rana catesbeiana) sacculus da rã-touro americana permite o exame direto da fisiologia das células do cabelo. Aqui a dissecação e preparação de sacculus da rã-touro para estudos biofísicos é descrito. Mostramos experimentos representativos dessas células ciliadas, incluindo o cálculo da relação força-deslocamento de um bundle e medição do seu movimento não forçada.

Preparação fisiológica das células ciliadas do sáculo da Bullfrog americano (<em&gt; Catesbeiana de Rana</em&gt;)

A saúde dos peixes selvagens pode ser usada como um indicador da saúde do ecossistema aquático. Avaliações de saúde baseados em necropsia peixe fornecem documentação de lesões ou anormalidades, dados utilizados para calcular os índices de condição, bem como a oportunidade de recolher os tecidos para avaliação microscópica, expressão gênica e outros mais aprofundada análises.

Avaliação de saúde de peixes selvagens baseada em necropsia

Este é um protocolo para modelar o espectro de tamanho (relação de dimensionamento entre massa individual e densidade populacional) para os dados combinados de peixes e invertebrados de córregos e rios wadable. Os métodos incluem: técnicas de campo para coletar amostras quantitativas de peixes e invertebrados; métodos de laboratório para padronizar os dados de campo; e análise estatística dos dados.

Modelagem do espectro de tamanho para macroinvertebrados e peixes em ecossistemas de fluxo

Neste estudo, apresentamos um protocolo de extração de cortisol da barbatana e mandíbula de espécies de esturjão. Os níveis do cortisol da aleta e do Jawbone foram examinados mais adicional comparando dois solventes de lavagem seguidos por ensaios de ELISA. Este estudo pilotou a viabilidade do cortisol do Jawbone como um indicador novo do esforço.

Extração de cortisol de matrizes de Sturgeon Fin e Jawbone

O objetivo do protocolo é fornecer uma técnica de fermentação de peixes industrializada com base na inoculação de Saccharomyces cerevisiae.

Preparação de produtos de peixe fermentado de alta qualidade

O registro multi-unitular extracelular do nervo olfativo é um método sensível, robusto e reprodutível para avaliar a sensibilidade olfativa em peixes marinhos. Registra entrada sensorial primária e é independente da salinidade externa.

Gravação multi-unitular extracelular do nervo olfativo dos teleóstos

O artigo descreve um protocolo rápido para gonadectomizar e provar sangue do pequeno peixe teleost, usando medaka japonês (Oryzias latipes) como modelo, para investigar o papel dos esteroides sexuais na fisiologia animal.

Procedimentos de Gonadectomia e Amostragem de Sangue no Modelo teleost de pequeno tamanho Japonês Medaka (Oryzias latipes)

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