Name: As investigações sobre o Complexo Ga (III) de EOB-DTPA e sua 68 Ga Radiolabeled Analogue (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-08-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 22 s
Description: Aprenda a sintetizar e avaliar o complexo Ga(III)-EOB-DTPA e seu análogo radiomarcado com gálio-68 para imagem molecular. Este método determina eficiência de marcação, estabilidade in vitro e coeficiente de distribuição octanol/água.

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1. Preparação de EOB-DTPA e Ga [EOB-DTPA] Cuidado: Por favor, consulte todas as folhas de dados de segurança pertinentes (MSDS) dos utilizados solventes orgânicos, ácidos e alcalinos antes do uso. Execute todas as etapas em um exaustor e usar equipamentos de proteção individual (óculos de segurança, luvas, jaleco). <ol><li> Isolamento de EOB-DTPA a partir de ácido gadoxético <ol><li> Coloque 3 ml de solução injectável gadoxético 0,25 M de ácido para um balão. Adicionar 500 mg (5,6 mmol) de ácido oxálico à solução agitada. </li><li> Depois de se agitar durante 1 hora, filtrar a suspensão através de uma frita utilizando pressão reduzida. Lavar o resíduo três vezes com 3 ml de água, respectivamente. </li><li> Combinar os filtrados aquosos e equipar a solução com um eléctrodo de pH. Adiciona-se ácido clorídrico 12 M para o filtrado até que o pH é de cerca de -0,1. </li><li> Remover o solvente in vácuo para se obter um resíduo incolor. Armazenar sob gás inerte. </li><li> Lavar o resíduo cuidadosamente (pelo menos trêsvezes) com acetato de etilo para remover o excesso de ácido oxálico. Secar o resíduo em vácuo. </li><li> Redissolve-se o resíduo em 2 ml de água à temperatura ambiente e depois arrefece-se a solução num banho de gelo. Sem remover o banho de gelo, adicionar 0,5 M de hidróxido de sódio aquoso a solução gota a gota, até que a formação de um sólido incolor é observado pegajosa. </li><li> Remover a água por decantação. Lavar os sólidos mais duas vezes com 1 ml de água fria. Seca-se o sólido in vácuo para se obter a primeira fracção do produto. </li><li> Isolar uma segunda fracção de produto a partir das fracções combinadas de água decantada por meio de cromatografia em coluna (sílica, metanol / água 01/04). 24 Remover o solvente em vácuo. </li><li> Se o sólido assim obtido não é puro branco, dissolvê-la em 1 ml de água, adicionar 10 ml de etanol e subsequentemente 10 ml de éter dietílico para precipitar o produto. Filtra-se através de um filtro poroso utilizando pressão reduzida e seca in vácuo. </li><li> Combinarambas as frações sólidas de EOB-DTPA e realizar espectroscopia de RMN, 25 de espectrometria de massa 26 e elementares 27 análises. </li></ol></li><li> Síntese de Ga [EOB-DTPA] CUIDADO: Loja cloreto de sólido Ga (III) sob uma atmosfera inerte seca, uma vez que ao entrar em contato com o ar, humidade ou a decomposição da graxa ocorre, resultando em vapores corrosivos e formação de impurezas amarelos, castanhos ou pretos. <ol><li> Prepara-se uma solução de estoque de 0,11 M por dissolução de 1,94 g (11,0 mmol) de Ga (III) cloreto em 100 ml de água. Dilui-se 1 ml de solução de amoníaco aquoso a 25% com 4 ml de água. </li><li> Dissolve-se 80 mg (0,15 mmol) de EOB-DTPA num balão de 10 ml de água. Se necessário, aquecer o solvente para se conseguir a dissolução completa. </li><li> Adicionar 1,4 ml (0,15 mmol) da solução de cloreto de Ga (III). Equipar o frasco com um agitador e pH-eletrodo. Adicionar gota a gota uma solução de amoníaco diluído aquoso até que o pH da solução é de aproximadamente 4,1. Agita-se à rotemperatura om durante 30 minutos. </li><li> Remover o solvente em vácuo. Colocar o resíduo num balão, equipado com um stillhead com uma tubuladura lateral central e paralela. Equipar a central do pescoço com um dedo de arrefecimento e do pescoço lado com uma saída da bomba de vácuo </li><li> Aquece-se o resíduo sob pressão reduzida (125 ° C, 0,6 mbar). Periodicamente remover o cloreto de amónio sublimado (visível como revestimento branco da superfície de vidro) a partir do dedo de refrigeração e ainda cabeça, bem como a partir das partes superiores do frasco com um pano ligeiramente molhado. Continuar o processo até que não há formação visível de novo sublimado. </li><li> Para remover os vestígios finais de cloreto de amónio lavar o resíduo três vezes com 0,5 ml de metanol quente, respectivamente. Seca-se o resíduo incolor em vácuo. Execute NMR espectroscópica, 25 de massa por espectrometria de 26 e elementares 27 análises. </li></ol></li></ol> 2. Procedimento Geral Labeling ATENÇÃO: Todos os exexperi- incluindo contato direto ou indireto com substâncias radioactivas devem ser realizadas apenas por pessoal treinado. Por favor, use equipamento de proteção adequado. Recolher quaisquer resíduos radioactivos separadamente e armazenar e descartar de acordo com os regulamentos válidos. <ol><li> A eluição do gerador Nota: A 40 mCi 68 Ge / 68Ga gerador com o nuclido mãe ligado como óxido sobre sílica dodecil-3,4,5-trihydroxybenzoate foi usada. A eluição e a purificação pode ser realizada manualmente ou, como foi o caso no presente processo, tal como um processo automatizado combinada utilizando uma bomba peristáltica e unidade de distribuição. <ol><li> Preparar soluções de 5,5 M, 1,0 M e ácido clorídrico 0,05 M. Prepara-se uma solução de cloreto de sódio 5,0 M contendo 25 uL de ácido clorídrico 5,5 M por ml. Prepara-se uma solução tampão de pH 4,6 através da combinação de 4,1 g de acetato de sódio, 1 mL de HCl (30%) e 2,5 ml de ácido acético glacial e diluindo a mistura com água até 50 ml. </li><li> precondition o PS-H + cartucho enxaguando-o devagar com 1 ml de ácido clorídrico 1,0 M e, subsequentemente, 5 ml de água. </li><li> Elui-se a coluna de sílica do gerador com 4 ml de 0,05 M de HCl. 12 Carregar o 68Ga eluato para o PS-H + cartucho. </li><li> Passar o cartucho com 5 ml de água e subsequentemente secá-lo com 5 ml de ar. Eluir a 68 Ga a partir do cartucho com 1 ml de 5,0 M de solução de cloreto de sódio acidificada. 28 </li></ol></li><li> Etiquetagem de EOB-DTPA com 68Ga <ol><li> Dissolve-se 1 mg (1,9 umol) de EOB-DTPA em 1 ml de água. A partir desta solução ter 100 uL (0,19 nmol) e diluí-los com 9,9 ml de água para preparar um 19 uM (10 ug / ml) da solução de EOB-DTPA. </li><li> Remover 50 pi (equivalentes a 22-29 MBq) da solução contendo 68 Ga e colocado num frasco. Adicionam-se 50 ul (0,5 ug) de uma solução de estoque 19 mM de EOB-DTPA e 300 ul óf tampão para elevar o pH a 4,0. Agitar rapidamente e incubar a solução à temperatura ambiente durante 5 min. Retirar uma alíquota de 1-5 ul e colocar a HPLC ou análise TLC. </li><li> Realizar a análise por HPLC de rádio em um de fase inversa (RP) C18 29 Uso da seguinte fase móvel:. A - água ácido trifluoroacético / (99,9% / 0,1%), B - acetonitrilo / ácido trif luoroacético (99,9% / 0,1%), gradiente : 06 min 80% de A → 0% de A (0,5 ml / min), 610 min 0% de A (0,5 ml / min). </li><li> Determinar as intensidades dos picos dos sinais de rádio HPLC, como área sob a curva. Calcular o rendimento da marcação de pureza radioquímica (RCP) do traçador como se segue: RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A Ga + A Ga-EOB-DTPA) ∙ 100% A Ga-EOB-DTPA: área sob a curva de 68 Ga [EOB-DTPA] A Ga: área sob a curva de livre 68 Ga </li></ol></li></ol> Eficiência 3. Rotulagem <ol><li> Realizar procedimentos de rotulagem como descreverd na seção 2. Use uma gama consistente de iniciar a atividade de 68 Ga fluido, por exemplo, 22-29 MBq (40-140 ul, dependendo da frescura do eluato). </li><li> Adicionar a quantidade necessária de solução tampão para ajustar o pH a 3,8-4,0 (40-190 ul, dependendo do volume de fluido 68 Ga). Adicionar a quantidade necessária de solução de reserva de ligando (10-70 ul de uma solução a 19 mM). </li><li> Adicionar as quantidades necessárias de água para ajustar o volume global de cada sonda rotulagem para 1,75 ml. Misturar completamente e deixar a amostra repousar durante 5 min à temperatura ambiente. Realizar análise HPLC como descrito na seção 2 para determinar o rendimento de marcação. </li><li> Realizar procedimentos de rotulagem com quantidades de ligante entre 0,1 mg e 0,7 mg em intervalos de 0,1 g. Realizar experiências em triplicado para cada concentração de ligando. Calcule o rendimento de média e desvio padrão. </li></ol> 4. Vitro estabilidade na <ol><li> p geralROCEDIMENTO e preparações <ol><li> Dissolve-se um comprimido de tampão fosfato salino (PBS) em 200 ml de água desionizada para se preparar uma solução stock de PBS com uma concentração de fosfato de 10 mM. </li><li> Realizar etiquetagem de 22-29 MBq 68Ga com 0,5 ml de solução de estoque EOB-DTPA, como descrito na secção 2. Dependendo do volume do eluato 68Ga, ajustar a quantidade de tampão, como descrito na secção 3. Retirar amostras de solução de rotulagem contendo 6-12 MBq de traçador para realizar medições de estabilidade. </li><li> Realizar a análise TLC rádio sobre gel de sílica placas de alumínio revestidas de 80 mm utilizando citrato de sódio 0,1 M aquoso como eluente e analisar as placas com um leitor de radioactividade TLC. 30 Determinar as intensidades dos sinais de TLC como a área sob a curva. Calcula-se a RCP do traçador como se segue: RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A Ga-livre + A Ga-EOB-DTPA + A Ga-coloidal) ∙ 100% A Ga-EOB-DTPA: área sob a curva de 68 Ga [EOB-DTPA] A Ga-livre: área sob a curva de livre 68 Ga A Ga-coloidal: área sob a curva de coloidal 68 Ga </li><li> Calcule RCP t / RCP 0 para cada ponto de tempo. Traçar a RCP assim padronizado vs. diferença de tempo desde o ponto de partida t = 0 min. RCP t = RCP de 68 Ga [EOB-DTPA] no ponto de tempo t. RCP 0 = RCP de 68 Ga [EOB-DTPA] em t = 0 min. </li></ol></li><li> Estabilidade em tampão fosfato salino (A) <ol><li> A 65 ul de solução de etiquetagem adicionar 150 ul de solução de reserva de PBS e 60 ul de solução de hidróxido de sódio (0,1 M) para elevar o pH para 7,4. Homogeneizar. </li><li> Retirar uma alíquota de 1-5 ul para realizar a análise TLC ( &#39;ponto de partida&#39;). armazenar imediatamente a solução numa incubadora a 37 ° C e remover aliquotas para realizar a análise de cromatografia em camada fina representamAtivE pontos de tempo ao longo de 3 h. </li></ol></li><li> Estabilidade no sentido excesso de apo -transferrin em PBS (B) <ol><li> A 120 ul de solução de etiquetagem adicionar 50 ul de solução de reserva de PBS e 430 ul de uma solução de hidróxido de sódio (0,1 M) para elevar o pH para 7,4. Adicionar 40 ul de uma solução de Apo -transferrin (25 mg / ml). Homogeneizar. </li><li> Retirar uma alíquota de 1-5 ul para realizar a análise TLC ( &#39;ponto de partida&#39;). armazenar imediatamente a solução numa incubadora a 37 ° C e remover aliquotas para realizar a análise de TLC em pontos temporais representativos ao longo de 3 h. </li></ol></li><li> Estabilidade no soro humano (C) <ol><li> A 500 ul de soro humano adicionar 25 ul de solução de etiquetagem e 45 ul de solução de hidróxido de sódio (0,1 M) para elevar o pH para 7,4. Homogeneizar. </li><li> Retirar uma alíquota de 1-5 ul para realizar a análise TLC ( &#39;ponto de partida&#39;). armazenar imediatamente a solução em uma incuBator a 37 ° C e remover aliquotas para realizar a análise de TLC em pontos temporais representativos ao longo de 3 h. </li></ol></li></ol> 5. Determinação do coeficiente de distribuição LoGD <ol><li> Executar procedimentos de marcação, tal como descrito na secção 2. 50 ul de solução de etiquetagem adicionar 20 ul de solução de reserva de PBS e 170 ul de uma solução de hidróxido de sódio (0,1 M) para elevar o pH para 7,4. </li><li> Retirar 200 ul a partir dessa solução e colocá-la em um plástico V-frasco. Adicionar 200 ul de n-octanol. Fechar o frasco e agitar com vortex durante 2 min. Em seguida centrifugar a amostra a 1600 xg durante 5 min. </li><li> Remover triplicatas de 40 ul da fase n -octanol e a fase aquosa cada um e colocá-los em V-frascos separados. Tenha cuidado para não misturar as camadas. </li><li> Medir a actividade de cada uma das amostras num contador gama bem durante 30 segundos. Para cada amostra imediatamente repetir a medição e duas vezes da mesma calcular a actividade Ᾱ t significativo </sub&gt; em contagens por minuto (cpm). Listar o, assim, ganhou Ᾱ t, W1, Ᾱ t, W2 e Ᾱ t, W3 (atividades em amostras aquosas) e Ᾱ t, O1, Ᾱ t, O2, Ᾱ t, O3 (atividades em n- octanol), juntamente com o respectivo ponto de tempo t de sua determinação. </li><li> Definir o ponto de tempo da medição da última amostra, tal como t 0. Determinar e listar Dt em min calculando Dt = tt 0. Realizar correcção de decaimento Ᾱ t, usando a seguinte fórmula: Ᾱ 0 = Ᾱ T · 2 (Dt / 68 min). </li><li> Calcular Ᾱ 0, W como a média de Ᾱ 0, W1, Ᾱ 0, W2 e Ᾱ 0, W3, bem como Ᾱ 0, O como a média de Ᾱ 0, O1, Ᾱ 0, O2 e Ᾱ 0, O3. Calcular logD usando a seguinte fórmula: logD = log [(Ᾱ <sub&gt; 0, S · 40 ug) / (Ᾱ 0, W · 33 ug)]. </li><li> Executar toda a experiência em triplicado e calcular a média de logD, juntamente com o seu desvio padrão. </li></ol>

<ol><li>Weinmann, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+lipophilic+gadolinium+chelate+as+a+tissue-specific+contrast+medium+for+MRI%5BTitle%5D)+AND+%22Magn.+Reson.+Med%22%5BJournal%5D)">A new lipophilic gadolinium chelate as a tissue-specific contrast medium for MRI.</a> Magn. Reson. Med. 22, 233-237 (1991).</li>
<li>Stroszczynski, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aktueller+Stand+der+MRT-Diagnostik+mit+leberspezifischen+Kontrastmitteln%5BTitle%5D)+AND+%22Radiologe%22%5BJournal%5D)">Aktueller Stand der MRT-Diagnostik mit leberspezifischen Kontrastmitteln.</a> Radiologe. 44, 1185(2004).</li>
<li>Van Beers, B. E., Pastor, C. M., Hussain, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primovist%2C+Eovist+-+what+to+expect%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Primovist, Eovist - what to expect.</a> J. Hepatol. 57, 421-429 (2012).</li>
<li>Zech, C. J., Herrmann, K. A., Reiser, M. F., Schoenberg, S. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MR+Imaging+in+Patients+with+Suspected+Liver+Metastases%3A+Value+of+Liver-specific+Contrast+Agent+Gd-EOB-DTPA%5BTitle%5D)+AND+%22Magn.+Reson.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">MR Imaging in Patients with Suspected Liver Metastases: Value of Liver-specific Contrast Agent Gd-EOB-DTPA.</a> Magn. Reson. Med. Sci. 6, 43-52 (2007).</li>
<li>Leonhardt, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatic+Uptake+of+the+Magnetic+Resonance+Imaging+Contrast+Agent+Gd-EOB-DTPA%3A+Role+of+Human+Organic+Anion+Transporters%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Metab.+Dispos%22%5BJournal%5D)">Hepatic Uptake of the Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA: Role of Human Organic Anion Transporters.</a> Drug Metab. Dispos. 38, 1024-1028 (2010).</li>
<li>Wadas, T. J., Wong, E. H., Weisman, G. R., Anderson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordinating+Radiometals+of+Copper%2C+Gallium%2C+Indium%2C+Yttrium%2C+and+Zirconium+for+PET+and+SPECT+Imaging+of+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Rev%22%5BJournal%5D)">Coordinating Radiometals of Copper, Gallium, Indium, Yttrium, and Zirconium for PET and SPECT Imaging of Disease.</a> J. Chem. Rev. 110, 2858-2902 (2010).</li>
<li>Ametamey, S. M., Honer, M., Schubiger, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+Imaging+with+PET%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Rev%22%5BJournal%5D)">Molecular Imaging with PET.</a> Chem. Rev. 108, 1501-1516 (2008).</li>
<li>Cutler, C. S., Hennkens, H. M., Sisay, N., Huclier-Markai, S., Jurisson, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiometals+for+Combined+Imaging+and+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Rev%22%5BJournal%5D)">Radiometals for Combined Imaging and Therapy.</a> Chem. Rev. 113, 858-883 (2013).</li>
<li>Henze, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+Imaging+of+Somatostatin+Receptors+Using+%5B68GA%5DDOTA-D-Phe1-Tyr3-Octreotide%3A+First+Results+in+Patients+with+Meningiomas%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Nucl.+Med%22%5BJournal%5D)">PET Imaging of Somatostatin Receptors Using [68GA]DOTA-D-Phe1-Tyr3-Octreotide: First Results in Patients with Meningiomas.</a> J. Nucl. Med. 42, 1053-1056 (2001).</li>
<li>Hofmann, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biokinetics+and+imaging+with+the+somatostatin+receptor+PET+radioligand+68Ga-DOTATOC%3A+preliminary+data%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Nucl.+Med%22%5BJournal%5D)">Biokinetics and imaging with the somatostatin receptor PET radioligand 68Ga-DOTATOC: preliminary data.</a> Eur. J. Nucl. Med. 28, 1751-1757 (2001).</li>
<li>Blau, M., Nagler, W., Bender, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorine-18%3A+a+new+isotope+for+bone+scanning%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Nucl.+Med%22%5BJournal%5D)">Fluorine-18: a new isotope for bone scanning.</a> J. Nucl. Med. 3, 332-334 (1962).</li>
<li>Green, M. A., Welch, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gallium+Radiopharmaceutical+Chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Radiat.+Appl.+Instrum.+B%22%5BJournal%5D)">Gallium Radiopharmaceutical Chemistry.</a> Int. J. Radiat. Appl. Instrum. B. 16, 435-448 (1989).</li>
<li>Rösch, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Past%2C+present+and+future+of+68Ge%2F68Ga+generators%5BTitle%5D)+AND+%22Appl.+Radiat.+Isot%22%5BJournal%5D)">Past, present and future of 68Ge/68Ga generators.</a> Appl. Radiat. Isot. 76, 24-30 (2013).</li>
<li>Liu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+coordination+chemistry+in+the+development+of+target-specific+radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Soc.+Rev%22%5BJournal%5D)">The role of coordination chemistry in the development of target-specific radiopharmaceuticals.</a> Chem. Soc. Rev. 33, 445-461 (2004).</li>
<li>Haubner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+%2868%29Ga-labelled+DTPA+galactosyl+human+serum+albumin+for+liver+function+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Nucl.+Med.+Mol.+Imaging%22%5BJournal%5D)">Development of (68)Ga-labelled DTPA galactosyl human serum albumin for liver function imaging.</a> Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 40 (68), 1245-1255 (2013).</li>
<li>Yang, W., Zhang, X., Liu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asialoglycoprotein+Receptor-Targeted+Radiopharmaceuticals+for+Measurement+of+Liver+Function%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Med.+Chem%22%5BJournal%5D)">Asialoglycoprotein Receptor-Targeted Radiopharmaceuticals for Measurement of Liver Function.</a> Curr. Med. Chem. 21, 4-23 (2014).</li>
<li>Chauhan, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68Ga+based+probe+for+Alzheimer%27s+disease%3A+synthesis+and+preclinical+evaluation+of+homodimeric+chalcone+in+%CE%B2-amyloid+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Org.+Biomol.+Chem%22%5BJournal%5D)">68Ga based probe for Alzheimer's disease: synthesis and preclinical evaluation of homodimeric chalcone in β-amyloid imaging.</a> Org. Biomol. Chem. 12, 7328-7337 (2014).</li>
<li>Chakravarty, R., Chakraborty, S., Dash, A., Pillai, M. R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detailed+evaluation+on+the+effect+of+metal+ion+impurities+on+complexation+of+generator+eluted+68Ga+with+different+bifunctional+chelators%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Detailed evaluation on the effect of metal ion impurities on complexation of generator eluted 68Ga with different bifunctional chelators.</a> Nucl. Med. Biol. 40, 197-205 (2013).</li>
<li>Clevette, D. J., Orvig, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+ligands+of+differing+denticity+and+basicity+for+the+in+vivo+chelation+of+aluminum+and+gallium%5BTitle%5D)+AND+%22Polyhedron%22%5BJournal%5D)">Comparison of ligands of differing denticity and basicity for the in vivo chelation of aluminum and gallium.</a> Polyhedron. 9, 151-161 (1990).</li>
<li>Prinsen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+evaluation+of+a+68Ga+labeled+pamoic+acid+derivative+for+in+vivo+visualization+of+necrosis+using+positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Bioorg.+Med.+Chem%22%5BJournal%5D)">Development and evaluation of a 68Ga labeled pamoic acid derivative for in vivo visualization of necrosis using positron emission tomography.</a> Bioorg. Med. Chem. 18, 5274-5281 (2010).</li>
<li>Vogl, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+tumors%3A+comparison+of+MR+imaging+with+Gd-EOB-DTPA+and+Gd-DTPA%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Liver tumors: comparison of MR imaging with Gd-EOB-DTPA and Gd-DTPA.</a> Radiology. 200, 59-67 (1996).</li>
<li>Reimer, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phase+II+clinical+evaluation+of+Gd-EOB-DTPA%3A+dose%2C+safety+aspects%2C+and+pulse+sequence%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Phase II clinical evaluation of Gd-EOB-DTPA: dose, safety aspects, and pulse sequence.</a> Radiology. , 177-183 (1996).</li>
<li>Ba-Ssalamah, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRT+der+Leber%5BTitle%5D)+AND+%22Radiologe%22%5BJournal%5D)">MRT der Leber.</a> Radiologe. 44, 1170-1184 (2004).</li>
<li>Scott, R. P. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aScott%2C+RPW+%22Journal+of+Chromatography+Library%22">Journal of Chromatography Library</a>. 22A, Elsevier Scientific Publishing Co. A137-A160 (1983).</li>
<li>Reichenbaecher, M., Popp, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aReichenbaecher%2C+M+%22Strukturanalytik+organischer+und+anorganischer+Verbindungen%22">Strukturanalytik organischer und anorganischer Verbindungen</a>. , 1st, B. G. Teubner Verlag. Wiesbaden. (2007).</li>
<li>Gross, J. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGross%2C+JH+%22Mass+Spectrometry%3A+A+Textbook%22">Mass Spectrometry: A Textbook</a>. , Springer. (2004).</li>
<li>Ma, T. S., Rittner, R. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMa%2C+TS+%22Modern+Organic+Elemental+Analysis%22">Modern Organic Elemental Analysis</a>. , Marcel Dekker, Inc. (1979).</li>
<li>Mueller, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+NaCl+Based+68Ga+Concentration+and+Labeling+Procedure+for+Rapid+Synthesis+of+68Ga+Radiopharmaceuticals+in+High+Radiochemical+Purity%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chem%22%5BJournal%5D)">Simplified NaCl Based 68Ga Concentration and Labeling Procedure for Rapid Synthesis of 68Ga Radiopharmaceuticals in High Radiochemical Purity.</a> Bioconjugate Chem. 23, 1712-1717 (2012).</li>
<li>Roberts, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radio-column+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+Library%22%5BJournal%5D)">Radio-column chromatography.</a> Journal of Chromatography Library. 14, 103-132 (1978).</li>
<li>Roberts, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radio-thin-layer+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+Library%22%5BJournal%5D)">Radio-thin-layer chromatography.</a> Journal of Chromatography Library. 14, 45-83 (1978).</li>
<li>Green, M. A., Welch, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gallium+radiopharmaceutical+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Gallium radiopharmaceutical chemistry.</a> Nucl. Med. Biol. 16, 435-448 (1989).</li>
<li>Notni, J., Plutnar, J., Wester, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone-seeking+TRAP+conjugates%3A+surprising+observations+and+their+implications+on+the+development+of+gallium-68-labeled+bisphosphonates%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Res%22%5BJournal%5D)">Bone-seeking TRAP conjugates: surprising observations and their implications on the development of gallium-68-labeled bisphosphonates.</a> EJNMMI Res. 2, 13(2012).</li>
<li>Schmitt-Willich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+and+Physicochemical+Characterization+of+a+New+Gadolinium+Chelate%3A+The+Liver-Specific+Magnetic+Resonance+Imaging+Contrast+Agent+Gd-EOB-DTPA%5BTitle%5D)+AND+%22Inorg.+Chem%22%5BJournal%5D)">Synthesis and Physicochemical Characterization of a New Gadolinium Chelate: The Liver-Specific Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA.</a> Inorg. Chem. 38, 1134-1144 (1999).</li>
<li>68Ga generator for positron emission tomography. , DE102010037964B3 (2012).</li>
<li>Simecek, J., Hermann, P., Wester, H. J., Notni, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+is+68Ga+Labeling+of+Macrocyclic+Chelators+Influenced+by+Metal+Ion+Contaminants+in+68Ge%2F68Ga+Generator+Eluates%3F%5BTitle%5D)+AND+%22ChemMedChem%22%5BJournal%5D)">How is 68Ga Labeling of Macrocyclic Chelators Influenced by Metal Ion Contaminants in 68Ge/68Ga Generator Eluates?</a> ChemMedChem. 8, 95-103 (2013).</li>
<li>Baur, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis%2C+Radiolabelling+and+In+Vitro+Characterization+of+the+Gallium-68-%2C+Yttrium-90-+and+Lutetium-177-Labelled+PSMA+Ligand%2C+CHX-A%27%27-DTPA-DUPA-Pep%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceuticals+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Synthesis, Radiolabelling and In Vitro Characterization of the Gallium-68-, Yttrium-90- and Lutetium-177-Labelled PSMA Ligand, CHX-A''-DTPA-DUPA-Pep.</a> Pharmaceuticals (Basel). 7, 517-529 (2014).</li>
<li>Boros, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RGD+conjugates+of+the+H2dedpa+scaffold%3A+synthesis%2C+labeling+and+imaging+with+68Ga%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">RGD conjugates of the H2dedpa scaffold: synthesis, labeling and imaging with 68Ga.</a> Nucl. Med. Biol. 39, 785-794 (2012).</li>
<li>Beck, W. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBeck%2C+WS+%22Hematology%22">Hematology</a>. , 5th, MIT press. Cambridge, Massachusetts. (1998).</li>
<li>Patel, V., Morrissey, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPatel%2C+V+%22Practical+and+Professional+Clinical+Skills%22">Practical and Professional Clinical Skills</a>. , 1, Oxford University Press Inc. New York. (2001).</li>
<li>Bartke, A., Constanti, A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBartke%2C+A+%22Basic+Endocrinology%22">Basic Endocrinology</a>. , 1, CRC Press. (1998).</li>
<li>Bernstein, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+Therapeutic+Activity+for+Gallium%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of Therapeutic Activity for Gallium.</a> Pharmacol. Rev. 50, 665-682 (1998).</li>
<li>Clausen, J., Edeling, C. J., Fogh, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((67Ga+Binding+to+Human+Serum+Proteins+and+Tumor+Components%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">67Ga Binding to Human Serum Proteins and Tumor Components.</a> Cancer Res. 34, 1931-1937 (1974).</li>
<li>Dumont, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+64Cu-+and+68Ga-Labeled+RGD+conjugates+show+improved+PET+imaging+of+%CE%B1v%CE%B23+integrin+expression+and+facile+radiosynthesis+%5BErratum+to+document+cited+in+CA156%3A116856%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Nucl.+Med%22%5BJournal%5D)">Novel 64Cu- and 68Ga-Labeled RGD conjugates show improved PET imaging of αvβ3 integrin expression and facile radiosynthesis [Erratum to document cited in CA156:116856.</a> J. Nucl. Med. 52, 1498(2011).</li>
<li>Pohle, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((68Ga-NODAGA-RGD+is+a+suitable+substitute+for+18F-Galacto-RGD+and+can+be+produced+with+high+specific+activity+in+a+cGMP%2FGRP+compliant+automated+process%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">68Ga-NODAGA-RGD is a suitable substitute for 18F-Galacto-RGD and can be produced with high specific activity in a cGMP/GRP compliant automated process.</a> Nucl. Med. Biol. 39, 777-784 (2012).</li>
<li>Notni, J., Pohle, K., Wester, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Be+spoilt+for+choice+with+radiolabelled+RGD+peptides%3A+Preclinical+evaluation+of+68+Ga-TRAP%28RGD%293%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl.+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Be spoilt for choice with radiolabelled RGD peptides: Preclinical evaluation of 68 Ga-TRAP(RGD)3.</a> Nucl. Med. Biol. 40, 33-41 (2013).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

EOB-DTPA é acessível através de uma síntese de múltiplos passos 33, mas pode muito bem ser isolado a partir de agentes de contraste que contêm ácido disponíveis gadoxético. Para este propósito, o ião central, Gd (III) pode ser precipitado com um excesso de ácido oxálico. Depois de remover o oxalato Gd (III) e ácido oxálico o ligando pode ser isolado por precipitação em água fria a um pH de 1,5. No entanto, a fim de aumentar os rendimentos de cromatografia em coluna do filtrado pode ser realizada em vez disso,...

Ácido gadoxético, um nome comum para o complexo de Gd (III) do ligando EOB-DTPA 1, é um agente de contraste utilizado em imagiologia hepatobiliar frequência de ressonância magnética (MRI). 2,3 Devido à sua absorção específica do fígado por hepatócitos e elevada percentagem de excreção hepatobiliar que permite a localização das lesões focais e tumores hepáticos. 2-5 no entanto, certas limitações da técnica de ressonância magnética (por exemplo, a toxicidade dos agentes de contraste, aplicabilidade limitada em pacientes com implantes claustrophobia ou de metal) para chamar uma ferramenta de diagnóstico alternativa . A tomografia de emissão de positrões (PET) é um método de imagiologia molecular, em que uma pequena quantidade de uma substância radioactiva (traçador) é administrado, em que a sua distribuição no corpo é registado por um aparelho de PET. 6 O PET é um método dinâmico que permite alta a resolução espacial e temporal das imagens, bem como a quantificação dos resultados, sem ter delidar com os efeitos colaterais dos agentes de contraste de MRI. O valor informativo das informações metabólica obtida pode ser ainda aumentada pela combinação com dados anatômicos recebidos dos métodos de imagem adicionais, como mais comumente atingida por imagem híbrido com tomografia computadorizada (TC) em scanners de PET / CT. A estrutura química de um marcador adequado para o PET deve incluir um isótopo radioactivo serve como emissor de positrões. Pósitrons têm um curto período de vida, uma vez que aniquilar quase imediatamente com os elétrons das conchas átomo de tecido circundante. Por aniquilação dois fotões gama 511 keV com direcção oposta de movimento são emitidos, que são registados pelo aparelho de PET 7,8. Para formar um traçador, nuclidos animal de estimação pode ser ligado covalentemente a uma molécula, como é o caso em 2-desoxi- 2- [18F] fluoroglucose (FDG), o marcador PET mais amplamente utilizado. 7 no entanto, um nuclídeo também podem formar ligações coordenativas a um ou vários ligantes (por exemplo,, [68 Ga] -DOTATOC 9,10) ou ser aplicado na forma de sais inorgânicos dissolvidos (por exemplo, [18F] fluoreto de sódio 11). No seu conjunto, a estrutura do marcador é crucial, uma vez que determina o seu comportamento biodistribuição, metabolismo e excreção. Um nuclido PET adequado deve combinar as características favoráveis ​​de energia de positrões como conveniente e disponibilidade, bem como uma meia-vida adequadas para a investigação pretendida. O 68Ga nuclídeo tornou-se uma força essencial no domínio do PET ao longo das últimas duas décadas. 12,13 Isto é principalmente devido à sua disponibilidade através de um sistema de gerador, que permite rotulagem no local, independentemente, a partir da vizinhança de um ciclotrão. Em um gerador, o nuclido mãe 68 Ge é absorvido numa coluna de onde o nuclídeo filha 68Ga é eluída e, subsequentemente, rotulados com um agente quelante adequado. 6,14 Uma vez que o 68Ga nuclídeo existe como um TrivalPendientesent catião tal como Gd (III) 10,13, quelantes EOB-DTPA com 68Ga vez iria produzir um complexo com a mesma carga global negativa como ácido gadoxético. Assim, que 68 Ga traçador pode combinar uma especificidade hepática característica semelhante com a aptidão para a imagem PET. Embora o ácido gadoxético é comprado e administrado como sal de sódio, no seguinte contexto vamos nos referir a ele como Gd [EOB-DTPA] e para o complexo não-radioativo Ga (III) como Ga [EOB-DTPA], ou 68 Ga [ EOB-DTPA] no caso de o componente marcado radioactivamente por uma questão de conveniência. Para avaliar a sua aplicabilidade como marcadores para PET, complexos de metais radioactivos têm de ser examinadas extensivamente in vitro, in vivo ou ex experiências in vivo em primeiro lugar. Para determinar a aptidão para o respectivo problema médico, várias características tracer como comportamento biodistribuição e perfil de apuramento, a estabilidade, a especificidade do órgão e célula ou tissue captação precisam ser investigadas. Devido ao seu caráter não-invasivo, in vitro determinações são muitas vezes realizados antes de experimentos in vivo. É geralmente reconhecido que o DTPA e os seus derivados são de aptidão limitada como quelantes para 68Ga, devido a estes complexos de falta inércia cinética, resultando em decomposição comparativamente rápido, quando administrado in vivo. 14-20 Isto é causado principalmente pela apo- transferrina actua como um concorrente por 68 Ga no plasma. No entanto, nós investigamos este novo marcador relativa à sua eventual aplicação em imagiologia hepatobiliar, em que as informações de diagnóstico podem ser fornecidas dentro de minutos após a injecção 3,4,21-23, assim, que não implica necessariamente a estabilidade traçador de longo prazo. Para este efeito foram isoladas EOB-DTPA a partir de ácido gadoxético e inicialmente realizado a complexação com Ga naturais (III), que existe como uma mistura de dois isótopos estáveis, 69 Ga e 71 </sup&gt; Ga. O complexo assim obtido serviu como padrão não radioactivo para o seguinte quelação de 68 Ga. Usamos métodos estabelecidos e, simultaneamente, avaliada sua adequação para determinar a eficiência 68 Galabeling de EOB-DTPA e investigar a lipofilicidade do novo 68 Ga traçador e sua estabilidade em diferentes mídias.

<table><tbody><tr><td>primovista</td><td></td> <td>Bayer-0,25 M</td><td></td></tr> <tr><td>cloreto de gálio (III)</td><td>Sigma-Aldrich Co.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>450898 água (desionizada)</td> <td>-</td> equipamento <td>de</td> <td>deionização de água da torneira da Auma-Tec GmbH</td></tr><tr><td>ácido clorídrico 12 M</td><td>VWR</td><td>20252.29</td><td></td></tr><tr><td>hidróxido de sódio</td><td>Polskie Odczynniki Chemiczne S.A.</td><td></td><td></td>810925429</tr><tr><td>ácido oxálico</td><td>Sigma-Aldrich Co.</td><td>75688</td><td></td></tr><tr><td>acetato de etila</td><td>Brenntag GmbH</td><td>10010447</td><td></td></tr><tr><td>gel de sílica</td><td>Merck KGaA</td><td>1.10832.9025</td><td>Geduran Si 60 0.063-0.2&nbsp; mm</td></tr><tr><td>TLC gel de sílica 60 F254</td><td>Merck KGaA</td><td>1.16834.0001</td><td></td></tr><tr><td>metanol</td><td>VWR</td><td>20903.55</td><td></td></tr><tr><td>etanol</td><td>Brenntag GmbH</td><td>10018366</td><td></td></tr><tr><td>éter eietil</td><td>VWR</td><td>23807.468</td><td>armazenado sobre placas KOH</td></tr><tr><td>solução de amoníaco (25%)</td><td>VWR</td><td>1133.1</td><td></td></tr><tr><td>eléctrodo de pH</td><td>VWR</td><td>662-1657</td><td></td></tr><tr><td>unidade de agitação e aquecimento</td><td>Heidolph</td><td>505-20000-00</td><td></td></tr><tr><td>bomba</td><td>Ilmvac GmbH</td><td>322002</td><td></td></tr><tr><td>espectrômetro de RMN</td><td></td><td></td> de design <td></td>personalizado Bruker Coorporation-Ultra Shield 400</tr><tr><td></td><td></td><td></td> espectrômetro de massa Thermo Fisher Scientific Inc.<td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>analisador elementar</td><td>Hekatech GmbH Analysentechnik-EuroVector</td><td></td> <td>EA 3000 CHNS</td></tr><tr><td>água deuterada D2O</td><td>euriso-top</td><td>D214</td><td>99,90% D</td></tr><tr><td colspan="4">Material/Equipamento necessário para os procedimentos de rotulagem</td></tr><tr><td>68Ge/68Ga gerador</td><td>ITG Isotope Technologies Garching GmbH</td><td>A150</td><td></td></tr><tr><td>sistema de bomba e dispensador</td><td>Scintomics</td><td></td> <td>GmbH-Variosystem</td></tr><tr><td>ácido clorídrico 30% (suprapur)</td><td>Merck KGaA</td><td>1.00318.1000</td><td></td></tr><tr><td>água (ultrapur)</td><td>Merck KGaA</td><td>1.01262.1000</td><td></td></tr><tr><td>cloreto de sódio (suprapur)</td><td>Merck KGaA</td><td>1.06406.0500</td><td></td></tr><tr><td>acetato de sódio (suprapur)</td><td>Merck KGaA</td><td>1.06264.0050</td><td></td></tr><tr><td>ácido acético glacial (suprapur)</td><td>Merck KGaA</td><td>1.00066.0250</td><td></td></tr><tr><td>citrato de sódio di-hidratado</td><td>VEB Laborchemie Apolda</td><td>10782</td><td>>98.5%</td></tr><tr><td>PS-H+ Cartucho (S)</td><td>Macherey-Nagel</td><td>731867</td><td>Chromafix</td></tr><tr><td>apo-Transferrin</td><td>Sigma-Aldrich Co.</td><td>T2036</td><td></td></tr><tr><td>PBS buffer (comprimidos)</td><td>Sigma-Aldrich Co.</td><td>79382</td><td></td></tr><tr><td>soro humano</td><td>Sigma-Aldrich Co.</td><td>H4522</td> de frascos <td>de plasma AB macho humano</td></tr><tr><td>, colunas, etc.</td><td></td><td>eletrodo de pH de design</td><td></td>personalizado</tr><tr><td></td><td>Knick Elektronische Messger&auml; te GmbH & Co. KG</td><td>765-Set</td><td></td></tr><tr><td>bomba binária (HPLC)</td><td>Hewlett-Packard</td><td>G1312A (HP 1100)</td><td></td></tr><tr><td>Detector UV Vis (HPLC)</td><td>Hewlett-Packard</td><td>G1315A (HP 1100)</td><td></td></tr><tr><td>detector radioativo (HPLC)</td><td>EGRC Berthold</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HPLC C-18-PFP coluna</td><td>Advanced Chromatography Technologies Ltd.</td><td>ACE-1110-1503/A100528</td><td></td></tr><tr><td>Frascos de vidro HPLC</td><td>GTG Glastechnik Graefenroda GmbH</td><td>8004-HP-H/i3&micro;</td><td></td></tr><tr><td>pipeta</td><td>Eppendorf-frascos</td> <td>de</td><td></td></tr> <tr><td>plástico</td><td>Sarstedt AG & Co.</td><td>6542.007</td><td></td></tr><tr><td>frascos de plástico</td><td>Greiner Bio-One International GmbH</td><td>717201</td><td></td></tr><tr><td>activímetro</td><td>MED Nuklear-Medizintechnik Dresden</td> <td>GmbH-Isomed</td> <td>2010</td></tr><tr><td>pinças</td><td></td> de <td>design</td><td></td>personalizado</tr><tr><td>incubadora</td><td>Heraeus Instruments GmbH</td><td>misturador de vórtice 51008815</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Fisons-Whirlimixer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>centrífuga</td><td>Heraeus Instruments GmbH</td><td>75003360</td><td></td></tr><tr><td>contador de poços gama</td><td>MED Nuklear-Medizintechnik Dresden</td> <td>GmbH-Isomed</td> <td>2100</td></tr><tr><td>água para cromatografia</td><td>Merck KGaA</td><td>1.15333.2500</td><td></td></tr><tr><td>acetonitrila para cromatografia</td><td>Merck KGaA</td><td>1.00030.2500</td><td></td></tr><tr><td>ácido trifluoroacético</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>91707</td><td></td></tr><tr><td>Scanner de radioatividade TLC</td><td>raytest Isotopenmessger&auml; te GmbH</td><td>B00003875</td><td>equipada com detector de plástico beta</td></tr></tbody></table>

as investigações sobre o complexo ga (iii) de eob-dtpa e sua<sup&gt; 68</sup&gt; ga radiolabeled analogue

Investigations on the Ga(III) Complex of EOB-DTPA and Its 68Ga Radiolabeled Analogue

Nós demonstramos um método para o isolamento de EOB-DTPA (3,6,9-triaza-f 3,6,9-tris (carboximetil) -4- (etoxibenzil) ácido -undecanedioic) a partir da sua Gd (III) e os protocolos para a preparação do seu novo não-radioactivos, isto é, singular Ga (III), bem como radioactivos 68Ga complexo. O ligando, bem como o Ga (III) foram caracterizados por espectroscopia de ressonância magnética nuclear (RMN), espectrometria de massa e análise elementar. 68Ga foi obtido por um método de eluição a partir de um padrão / 68Ga gerador 68 Ge. Experimentos para avaliar a eficiência de 68 Ga-rotulagem de EOB-DTPA em pH 3,8-4,0 foram realizadas. técnicas de análise de rádio estabelecida TLC (cromatografia de camada fina) e HPLC de rádio (cromatografia líquida de alta eficiência) foram usadas para determinar a pureza radioquímica do traçador. Como uma primeira investigação de lipofilicidade dos 68 Ga traçadores o n- octanol / água DISTRIBUTION coeficiente de Ga 68 espécies presentes em uma solução de pH 7,4 foi determinada por um método de extracção. medições in vitro de estabilidade do marcador em vários meios a pH fisiológico foram realizadas, revelando diferentes taxas de decomposição.

O ligando EOB-DTPA e o Ga não radioactivo (III) foram analisados ​​por meio de 1 H e 13 C {1 H} espectroscopia de RMN, espectrometria de massa e análise elementar. Os resultados listados na Tabela 1 e ilustrados nas Figuras 1-6 verificar a pureza das substâncias. A eluição da Ga gerador de 68 Ge / 68 produziu soluções de 400-600 M...

Um procedimento para o isolamento de EOB-DTPA e complexação subsequente com Ga naturais (III) e 68 Ga é aqui apresentado, bem como uma análise aprofundada de todos os compostos e investigações sobre a eficiência rotulagem, a estabilidade in vitro e o octanol / água coeficiente de distribuição do complexo marcado radioactivamente.

As investigações sobre o Complexo Ga (III) de EOB-DTPA e sua<sup&gt; 68</sup&gt; Ga Radiolabeled Analogue

We demonstrate a method for the isolation of EOB-DTPA (3,6,9-triaza-3,6,9-tris(carboxymethyl)-4-(ethoxybenzyl)-undecanedioic acid) from its Gd(III) ...

O objetivo geral deste procedimento é avaliar um novo complexo radioativo de gálio-68 para imagem molecular. Este método pode ajudar a responder perguntas fundamentais na área da química de traçadores de gálio-68, como condições de marcação, estabilidade do traçador e lipofilicidade. A técnica de marcação radioativa é simples e permite a rápida determinação dos resultados, exigindo apenas quantidades mínimas de material.Para iniciar este procedimento, adicione três mililitros de solução injetável de ácido gadoxético 0,25 molar a um frasco. Em seguida, adicione 500 miligramas de ácido oxálico à solução de ácido gadoxético em agitação. Após agitar durante uma hora, filtre a suspensão através de um funil de vidro sinterizado utilizando pressão reduzida.Lave o resíduo três vezes com três mililitros de água. Em seguida, reúna os filtrados aquosos em um béquer e coloque um eletrodo de pH na solução. Adicione ácido clorídrico 12 molar ao filtrado até que o pH seja cerca de 0,1.Após remover o solvente sob vácuo, lave o resíduo abundantemente com acetato de etila quente para remover o ácido oxálico em excesso. Em seguida, seque o resíduo sob vácuo. Uma vez que o resíduo esteja seco, redissolva-o em dois mililitros de água desionizada e então resfrie a solução em banho de gelo.Sem remover o banho de gelo, adicione hidróxido de sódio 0,5 molar gota a gota até que um sólido incolor e viscoso seja observado. Em seguida, remova a água com uma pipeta. Para preparar uma solução estoque 0,11 molar de cloreto de gálio, dissolva 1,94 gramas do sólido em 100 mililitros de água.Em seguida, dissolva 80 miligramas de EOB-DTPA em 10 mililitros de água. Se necessário, aqueça a solução para obter dissolução completa. Adicione 1,4 mililitro da solução estoque de cloreto de gálio à solução de EOB-DTPA e coloque um eletrodo de pH no béquer.Em seguida, adicione solução aquosa de amônia diluída gota a gota até que o pH da solução seja aproximadamente 4,1. Após a remoção do solvente a vácuo, coloque o resíduo em um frasco equipado com uma cabeça de aço com um pescoço central e um pescoço lateral paralelo. Equipe o pescoço central com um condensador refrigerante e o pescoço lateral com uma saída para bomba de vácuo.Aqueça o resíduo sob pressão reduzida. Remova periodicamente o cloreto de amônio sublimado do frasco com um pano ligeiramente úmido. Condicione um cartucho PSH plus lavando-o lentamente com 1 mililitro de ácido clorídrico 1 molar e, posteriormente, com 5 mililitros de água.A seguir, elua a coluna de sílica do gerador com quatro mililitros de ácido clorídrico 0,05 molar e carregue o eluato de gálio-68 na cartela PSH plus. Lave a cartela com cinco mililitros de água. Após secagem com ar, elua o gálio-68 da cartela com um mililitro de cloreto de sódio ácido 5 molar.Agora, adicione 50 microlitros do eluato de gálio-68 e 50 microlitros de uma solução estoque de EOB-DTPA 19 micromolar previamente preparada a um vial. Adicione 300 microlitros de tampão para elevar o pH a 4,0. Agite brevemente e incube a solução à temperatura ambiente por cinco minutos.Transfira uma alíquota de cinco a 20 microlitros da solução para um frasco de HPLC. Em seguida, realize a análise radio-HPLC em uma coluna de fase reversa C18. Para realizar as medições de estabilidade in vitro, retire amostras da solução de marcação contendo de seis a 12 megabecquerel de traçador.Realize uma análise de CCF com radioatividade em placas de alumínio revestidas com gel de sílica de 80 milímetros, utilizando citrato de sódio aquoso 0,1 molar como eluente. Analise as placas com um scanner de radioatividade para CCF. Para determinar a estabilidade em solução salina tamponada com fosfato, adicione 150 microlitros de solução estoque de PBS 10 milimolar e 60 microlitros de hidróxido de sódio 0,1 molar a 65 microlitros da solução de marcação.Agite bem a solução. Em seguida, transfira uma alíquota de um a cinco microlitros da solução para uma placa de sílica para análise por TLC. Armazene imediatamente a solução em uma incubadora a 37 graus Celsius.Retire alíquotas para realizar análise por TLC em pontos de tempo representativos ao longo de três horas. Para determinar a estabilidade frente a um excesso de apotransferrina, adicione 50 microlitros de uma solução estoque de PBS 10 milimolar e 430 microlitros de hidróxido de sódio 0,1 molar a 120 microlitros da solução de marcação. Adicione 40 microlitros de uma solução de apotransferrina a 25 miligramas por mililitro e misture bem a solução.Em seguida, transfira uma alíquota de um a cinco microlitros da solução para uma placa de sílica para análise por TLC. Armazene imediatamente a solução em um incubador a 37 graus Celsius. Retire alíquotas para realizar a análise por TLC em pontos de tempo representativos ao longo de três horas.Para determinar a estabilidade em soro humano, adicione 45 microlitros de hidróxido de sódio 0,1 molar e 500 microlitros de soro humano a 25 microlitros da solução de marcação. Após misturar completamente a solução, transfira uma alíquota de um a cinco microlitros para uma placa de sílica para análise por TLC. Armazene imediatamente a solução em um incubador a 37 graus Celsius.Retire alíquotas para realizar a análise por TLC em pontos de tempo representativos ao longo de três horas. Para determinação do coeficiente de distribuição, adicione 20 microlitros de solução estoque de PBS 10 milimolar e 170 microlitros de hidróxido de sódio 0,1 molar a 50 microlitros da solução de marcação. Transfira 200 microlitros da solução para um vial plástico em formato V e adicione 200 microlitros de n-octanol.Feche o vial e vortexe por dois minutos, em seguida, centrifugue a amostra a 1600 vezes g por cinco minutos. Após a centrifugação, retire triplicatas de 40 microlitros da fase n-octanol e da fase aquosa e coloque-as em vials plásticos em formato V separados. Por fim, meça a atividade de cada amostra em um contador gama de poço por 30 segundos.O EOB-DTPA ligado e o complexo de gálio não radioativo três foram analisados por espectroscopia de RMN de prótons e carbono, espectrometria de massas e análise elementar. O procedimento de marcação resulta na formação do traçador desejado, gálio-68 EOB-DTPA, indicado por um pico de radio-HPLC com tempo de retenção de 2,8 minutos. A comparação com o tempo de retenção do padrão frio a 220 nanômetros confirma a marcação bem-sucedida.A eficiência de marcação com gálio-68 do EOB-DTPA foi investigada mediante a determinação do rendimento de marcação em função da concentração do ligante por meio de CLAE. Um cromatograma representativo de uma placa de TLC analisada com um scanner de radioatividade de TLC é mostrado aqui. Para investigar a estabilidade do traçador, a pureza radioquímica ao longo do tempo foi determinada por meio de TLC.A porcentagem padronizada de traçador intacto é representada como uma função do tempo aqui. Os valores de atividade e o cálculo subsequente do coeficiente de distribuição são listados aqui. Após este procedimento, outros métodos, como experimentos in vitro, podem ser realizados com o objetivo de responder perguntas adicionais, como biodistribuição e dinâmica de captação.Após assistir a este vídeo, você deverá ter uma boa compreensão das técnicas utilizadas para avaliar e analisar traçadores de gálio-68 para imagem molecular. Não se esqueça de que trabalhar com substâncias radioativas pode ser prejudicial. Isso só pode ser realizado por pessoal treinado.Precauções de segurança, como o uso de escudos de chumbo e pinças, devem sempre ser tomadas ao realizar este procedimento.

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Research

JoVE Journal

Chemistry

Química

Demonstramos a metalation, purificação e caracterização de complexos de lantanídeos. Os complexos descrito aqui pode ser conjugado com macromoléculas para habilitar o rastreamento destas moléculas usando ressonância magnética.

Purificação de preparação, e Caracterização de Complexos de lantanídeos para uso como agentes de contraste para Imagem por Ressonância Magnética

A cicloadição de Diels-Alder de demanda inversa de elétrons bioortogonal foi aproveitada para criar uma estratégia de imagem PET pré-direcionada eficaz e modular para o câncer. Neste protocolo, as etapas desta metodologia são descritas no contexto de um sistema modelo que emprega o anticorpo direcionado ao câncer colorretal huA33 e um radioligante marcado com 64.

Aproveitando a demanda Bioorthogonal Inverse Electron Diels-Alder para Pretargeted PET Imagem

Este protocolo descreve a preparação e caracterização de um agente de contraste dendrimérico ressonância magnética (MRI), que transporta os quelatos macrocíclicos baseados-ciclen coordenação iões paramagnéticos gadolínio. Numa série de experiências de ressonância magnética in vitro, este agente produzido um sinal de ressonância magnética amplificado quando em comparação com o análogo monomérico comercialmente disponível.

preparação e<em&gt; In Vitro</em&gt; Caracterização de agentes de contraste à base de dendrímeros para Ressonância Magnética

Aqui, apresentamos um protocolo para obter68Ga núcleo dopado com óxido de ferro nanopartículas através de rápido orientado para o microondas síntese. A metodologia processa PET/nanopartículas de MRI (T1) com eficiência superior a 90% e a pureza radioquímica de 99% em uma síntese de 20 min de radioativos.

Síntese de nanopartículas de núcleo dopado com óxido de ferro Ga 68para tomografia por emissão de pósitrons Dual/imagem latente de ressonância magnética de (T1)

Tumores neuroendócrinos bem diferenciados overexpress receptores de somatostatina, que podem ser utilizados para diagnósticos por imagem com a somatostatina radiolabeled analógico 68Ga-DOTATATE. Este protocolo detalha os radioativos de 68Ga-DOTATATE, controle de qualidade, preparação do paciente e imagens de PET/CT subsequentes. Segurança da radiação e constrições de tempo devido a meia-vida curta de 68Ga são tidos em conta.

Um guia prático para a produção e a imagem latente de PET/CT de 68Ga-DOTATATE para tumores neuroendócrinos na prática clínica diária

Este estudo desenvolveu um método não invasivo e em tempo real para avaliar a distribuição do ligante morte programada 1 em todo o corpo, baseado em imagens tomográficas por emissão de pósitrons do antagonista D-dodecapeptídeo [68Ga]. Essa técnica apresenta vantagens sobre a imunohistoquímica convencional e melhora a eficiência na identificação de pacientes apropriados que se beneficiarão da terapia de bloqueio do ponto de verificação imune.

Desenvolvimento de um traçador PET com 68peptídeos D marcados com gálio para a expressão do ligante morte programada 1 por imagem

O presente protocolo descreve como realizar imagens de PET/CT e PET/RM de 64em humanos para estudar distúrbios relacionados ao cobre, como a doença de Wilson, e o efeito do tratamento no metabolismo do cobre.

Tomografia por Emissão de Pósitrons Usando 64-Cobre como Traçador para o Estudo de Doenças Relacionadas ao Cobre

Medidas quantitativas do metabolismo de oxigênio e glicose por PET são tecnologias estabelecidas, mas detalhes de protocolos práticos são escassamente descritos na literatura. Este artigo apresenta um protocolo prático implementado com sucesso em um scanner de tomografia computadorizada por emissão de pósitrons de última geração.

Estudos multi-traçadores do metabolismo cerebral de oxigênio e glicose usando um scanner de tomografia computadorizada por emissão de pósitrons por tempo de voo

Este trabalho descreve a produção automatizada de até 1,7 GBq de [68Ga]Ga-FAPI-46 no sintetizador iPHASE MultiSyn para imagens PET da proteína de ativação de fibroblastos.

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Este artigo descreve a radiossíntese, formulação, controle de qualidade de uma nova sonda radiomarcada (ou seja, nanocorpo NM-02 marcado com 68Ga) e seu uso para imagens de PET/CT de pequenos animais em um modelo de xenoenxerto.

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Esta pesquisa descreve o processo automatizado para produção de [68Ga]Ga-3BP-3940 com o sintetizador GAIA V2, para imagens PET da proteína de ativação de fibroblastos. Os resultados dos testes de controle de qualidade realizados em três lotes de teste também são apresentados.

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Aprenda a sintetizar e avaliar o complexo Ga(III)-EOB-DTPA e seu análogo radiomarcado com gálio-68 para imagem molecular. Este método determina eficiência de marcação, estabilidade in vitro e coeficiente de distribuição octanol/água.

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