Name: Ensaio de Preferência gosto para Adulto Drosophila (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-08T12:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 31 s
Description: Aprenda a realizar ensaios de preferência gustativa em Drosophila adultos usando algodão saturado e câmaras de ensaio. Este método acessível permite investigar a base genética do paladar em moscas-da-fruta.

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Gostaríamos de agradecer aos membros do laboratório Tessier pela leitura crítica deste manuscrito e sugestões úteis durante a preparação deste protocolo.

1. A fome <ol><li> Prepare mosca frascos de fome saturando uma bola de algodão com 18,2 mohms de água no fundo de um frasco de mosca padrão. Alternativamente, semelhante saturar uma pequena tira de papel de filtro com 18,2 mohms água e coloque em um ângulo dentro do frasco. </li><li> Recolha moscas em conjuntos de ~ 100 animais em uma almofada de CO 2 e em seguida, adicione as moscas para um frasco preparado. Nota: Os melhores resultados são obtidos com os animais que são menos do que 5 dias de idade. No entanto, a idade exacta dos animais pode ser controlada como uma variável de experimental para determinar mudanças na preferência do gosto ao longo do tempo. </li><li> Use uma rolha bola de algodão ou espuma para proteger os frascos fechados. Coloque os frascos em seu lado em uma incubadora de ambiente controlado. Manter a temperatura a 25 ° C, e a humidade superior a 70%. Deixar frascos intocadas durante 24 h. </li></ol> 2. Taste Ensaio Preferências <ol><li> Preparar todas as saborizantes para o ensaio no mesmo dia ums testes. Nota: Os tastants exatos a serem usados ​​irão variar dependendo da pergunta experimental ser perguntado. Os seguintes são exemplos de saborizantes utilizados neste protocolo. Ver secção 4 para otimizações. <ol><li> Prepare o controle saborizante (sacarose 1 mM) através da combinação de 10 ml de solução de sacarose 100 mM, 13 ul de corante vermelho, e 977 ul de 18,2 mohms água. </li><li> Prepare saborizante experimental (sacarose a 5 mM) ao combinar 50 ul de solução de sacarose 100 mM, 10 ul de corante azul de alimentos, e 940 ul de água 18,2 mohms. </li></ol></li><li> Adicione câmaras de ensaio com 100 mm x 15 milímetros prato de petri de plástico padrão preparado da seguinte forma: <ol><li> Coloque três gotas de 10 ul de saborizante de controle mais próximo da borda da placa às 12 horas e mais 3 gotas às 6 horas. Assegure-se que o espaçamento entre as quedas é semelhante. </li><li> Coloque três gotas de 10 ul de saborizante experimental mais próximo do bordo da placa de 03:00 e umoutros 3 gotas às 9 horas. Assegure-se que o espaçamento entre as quedas é semelhante. </li><li> Repita os passos 2.2.1 e 2.2.2 para tantas repetições como desejado. </li></ol></li><li> Vazio 1 frasco de ~ 100 moscas famintas em uma almofada de CO 2 apenas o tempo suficiente para anestesiar todos os animais (aproximadamente 10 segundos). Escovar os animais no meio de uma câmara de ensaio preparada e cobrir com a tampa prato. Nota: longos períodos de exposição ao CO 2 deve ser evitada para melhorar o tempo de recuperação e interferência limite com o comportamento alimentar. A exposição ao gelo (~ 5 min) pode ser usado para anestesiar para evitar CO 2 efeitos comportamentais que podem surgir de uma exposição limitada. </li><li> Coloque a câmara de ensaio em uma caixa de papelão opaco. Certifique-se de rotular o exterior da caixa com a condição e genótipo que está sendo testado. </li><li> Coloque a configuração inteira (câmara de ensaio contido dentro da caixa de cartão a partir do passo 2.4) em uma incubadora a 25 ° C com, pelo menos, 70% de humidade durante 2 h. </li&gt; <li> Repita os passos 2.3 através de 2.5 para todas as repetições. </li><li> Após 2 horas, colocar as câmaras de ensaio, ainda contidos dentro de caixas de cartão, directamente num congelador a -20 ° C até estar pronto para a quantificação. </li></ol> 3. Taste Quantificação Preferência Assay <ol><li> Permitir que uma única câmara de ensaio a aquecer até à temperatura ambiente (aproximadamente 5 min). </li><li> Sob um microscópio de dissecação, usando um pincel ou um par de fórceps, animais do grupo com base na cor de seu abdômen: vermelho, azul, roxo ou clara (Figura 1). </li><li> Grave o número de animais de cada grupo. Considere animais claras para não participaram no ensaio e, portanto, não incluí-los em todos os cálculos. </li><li> Calcular o índice de preferência de acordo com uma das equações seguintes: <ol><li> Se o saborizante experimental de interesse é adicionado ao corante vermelho, em seguida, usar (N vermelho + 0,5 N roxo) / (N vermelho + N azul + N purple). </li><li> Se o saborizante experimental é adicionado ao corante azul, em seguida, ajuste a equação (N azul + 0,5 N roxo) / (N azul + N vermelho + N roxo). </li></ol></li><li> Repita os cálculos para todas as condições experimentais e repetições. </li></ol> 4. Optimization of Taste Preferências Assay <ol><li> Empiricamente determinar a concentração de indicadores de coloração de alimentos para ser usado de modo corante alimentar não afecta o resultado do ensaio de gosto, como se segue: <ol><li> Prepare saborizantes 4 utilizando o mesmo composto de base (por exemplo, sacarose a 5 mM), conforme indicado na etapa 2.1, mas omitindo o corante alimentar. </li><li> Adicionar 1,3% corante vermelho para um dos saborizantes. Adicione os restantes 3 ​​saborizantes com corante alimentar azul de várias concentrações em cada um dos tubos (por exemplo, 0,6%, 1% e 1,3%). </li><li> protocolo completo as etapas de 2.2 a 3.4 para cada par saborizante: 1,3% vs. 0,6% vermelho azul; 1,3% vs. vermelho 1% de azul e1,3% vs. 1,3% vermelho azul. </li><li> Repita o passo 4.1.1-4.1.3 com diferentes porcentagens de coloração de alimento azul até as médias preferência índice Um valor de 0 (Figura 2). Nota: Como ponto de partida, de 1,3% corante vermelho juntamente com 1% de azul corante alimentar normalmente produz bons resultados. Se há concentração satisfatória de coloração de alimento azul pode ser correspondido a 1,3% de corante, então passo 4.1.1 através 4.1.3 pode ser repetido com concentrações variadas de coloração vermelha e uma concentração constante de coloração de alimento azul. </li><li> Analisar todas as condições a serem testadas com as mesmas concentrações de corante alimentar otimizados. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Herrero, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fruit+fly+behavior+in+response+to+chemosensory+signals%5BTitle%5D)+AND+%22Peptides%22%5BJournal%5D)">Fruit fly behavior in response to chemosensory signals.</a> Peptides. 38 (2), 228-237 (2012).</li>
<li>Vosshall, L. B., Stocker, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+architecture+of+smell+and+taste+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Molecular architecture of smell and taste in Drosophila.</a> Annu Rev Neurosci. 30, 505-533 (2007).</li>
<li>Harris, D. T., Kallman, B. R., Mullaney, B. C., Scott, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Representations+of+Taste+Modality+in+the+Drosophila+Brain%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Representations of Taste Modality in the Drosophila Brain.</a> Neuron. 86 (6), 1449-1460 (2015).</li>
<li>Hong, E. J., Wilson, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+encoding+of+odors+by+channels+with+diverse+sensitivity+to+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Simultaneous encoding of odors by channels with diverse sensitivity to inhibition.</a> Neuron. 85 (3), 573-589 (2015).</li>
<li>Kain, P., Dahanukar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secondary+taste+neurons+that+convey+sweet+taste+and+starvation+in+the+Drosophila+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Secondary taste neurons that convey sweet taste and starvation in the Drosophila brain.</a> Neuron. 85 (4), 819-832 (2015).</li>
<li>Masek, P., Worden, K., Aso, Y., Rubin, G. M., Keene, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dopamine-modulated+neural+circuit+regulating+aversive+taste+memory+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">A dopamine-modulated neural circuit regulating aversive taste memory in Drosophila.</a> Curr Biol. 25 (11), 1535-1541 (2015).</li>
<li>Charlu, S., Wisotsky, Z., Medina, A., Dahanukar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acid+sensing+by+sweet+and+bitter+taste+neurons+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Acid sensing by sweet and bitter taste neurons in Drosophila melanogaster.</a> Nat Commun. 4, 2042(2013).</li>
<li>Clyne, P. J., Warr, C. G., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Candidate+taste+receptors+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Candidate taste receptors in Drosophila.</a> Science. 287 (5459), 1830-1834 (2000).</li>
<li>Scott, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+chemosensory+gene+family+encoding+candidate+gustatory+and+olfactory+receptors+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A chemosensory gene family encoding candidate gustatory and olfactory receptors in Drosophila.</a> Cell. 104 (5), 661-673 (2001).</li>
<li>Kim, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+TRPA1+channel+mediates+chemical+avoidance+in+gustatory+receptor+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Drosophila TRPA1 channel mediates chemical avoidance in gustatory receptor neurons.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (18), 8440-8445 (2010).</li>
<li>Koh, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+IR20a+clade+of+ionotropic+receptors+are+candidate+taste+and+pheromone+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The Drosophila IR20a clade of ionotropic receptors are candidate taste and pheromone receptors.</a> Neuron. 83 (4), 850-865 (2014).</li>
<li>Zhang, Y. V., Ni, J., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+for+attractive+salt-taste+coding+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The molecular basis for attractive salt-taste coding in Drosophila.</a> Science. 340 (6138), 1334-1338 (2013).</li>
<li>Zhang, Y. V., Raghuwanshi, R. P., Shen, W. L., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Food+experience-induced+taste+desensitization+modulated+by+the+Drosophila+TRPL+channel%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Food experience-induced taste desensitization modulated by the Drosophila TRPL channel.</a> Nat Neurosci. 16 (10), 1468-1476 (2013).</li>
<li>Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+coding+of+taste%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Peripheral coding of taste.</a> Neuron. 81 (5), 984-1000 (2014).</li>
<li>Rodrigues, V., Cheah, P. Y., Ray, K., Chia, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((malvolio%2C+the+Drosophila+homologue+of+mouse+NRAMP-1+%28Bcg%29%2C+is+expressed+in+macrophages+and+in+the+nervous+system+and+is+required+for+normal+taste+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">malvolio, the Drosophila homologue of mouse NRAMP-1 (Bcg), is expressed in macrophages and in the nervous system and is required for normal taste behaviour.</a> EMBO J. 14 (13), 3007-3020 (1995).</li>
<li>Tanimura, T., Isono, K., Yamamoto, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taste+sensitivity+to+trehalose+and+its+alteration+by+gene+dosage+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Taste sensitivity to trehalose and its alteration by gene dosage in Drosophila melanogaster.</a> Genetics. 119 (2), 399-406 (1988).</li>
<li>Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+and+cellular+basis+of+bitter+taste+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila.</a> Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).</li>
<li>French, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+mechanism+for+bitter+avoidance+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Dual mechanism for bitter avoidance in Drosophila.</a> J Neurosci. 35 (9), 3990-4004 (2015).</li>
<li>Deshpande, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+Drosophila+food+intake%3A+comparative+analysis+of+current+methodology%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Quantifying Drosophila food intake: comparative analysis of current methodology.</a> Nat Methods. 11 (5), 535-540 (2014).</li>
</ol>

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

Nós descrevemos um protocolo simples, mas eficaz para determinar a preferência gosto em Drosophila. Versões deste ensaio são rotineiramente usados ​​em experimentos para determinar as contribuições dos receptores gustativos (GRS) para perceber as diferentes qualidades (amargo, doce, azedo, salgado e umami) de compostos de gosto. O genoma de Drosophila contém cerca de 60 genes que codificam receptores gustativos 68 identificados por splicing alternativo 8,9. No entanto, outras proteínas, tais...

Animais usar chemosensation distinguir condições vantajosas para além de condições desvantajosas. Esta percepção pode ser crítico para coisas como determinar a melhor fonte de alimento, evitando substâncias tóxicas ou determinar o melhor parceiro de acasalamento 1. Chemosensation é frequentemente dividida em dois componentes sensoriais: olfato e sentidos gustativos. A principal característica distintiva desses sentidos é que o olfato (cheiro) é usado para provar o ambiente químico gasoso circundante, enquanto gustação (gosto) requer contato físico com um substrato não-volátil. Ambas as modalidades sensoriais estimular respostas neurológicas que são tratados e descodificados no cérebro para produzir o comportamento atração ou repulsão adequada 2. Estes sentidos são, portanto, fundamental para a sobrevivência animal. A mosca da fruta Drosophila melanogaster é um organismo modelo que continua a crescer em popularidade para o uso em compreendering como insetos perceber cheiro e sabor. As moscas de fruta oferecem enormes vantagens sobre outros sistemas modelo devido à riqueza de ferramentas genéticas disponíveis para a dissecção das vias moleculares, celulares e comportamentais. Trabalho ao longo dos últimos 15 anos tem sido particularmente instrumental na caracterização das identidades celulares específicos, receptores neuronais e mecanismos envolvidos, tanto cheiro e sabor sinalização. Agora, o poder da genética de Drosophila está sendo usado para elucidar como esses processos são codificados no neurônio único e circuito único nível 3-6. Assim, ensaios que fornecem assim marcou leituras de alterações de vias sensoriais são vitais para o avanço contínuo destes campos. Embora uma grande parte se sabe sobre como os sinais olfativos são codificados e processados ​​no cérebro, e muito menos se sabe sobre mecanismos semelhantes na via gustativa. Descrevemos aqui um protocolo que pode ser usado para determinar preferen gustativasce em Drosophila. Drosophila, como mamíferos, geralmente preferem compostos sabor doce ao invés de compostos sabor amargo. Qualquer combinação destas fontes de alimentos podem ser utilizados na presente concepção experimental para determinar como alterações genéticas conhecidas afectar a escolha gosto. Além disso, as estratégias de intervenção farmacológica semelhante pode ser avaliada pelos seus efeitos sobre a preferência de paladar dos animais. A facilidade e flexibilidade deste ensaio torna um paradigma útil para a compreensão da natureza da percepção gustativa em Drosophila.

<table><tbody><tr><td>Corante Alimentar Azul (Água, Propilenoglicol, FD& C Azul 1 e Vermelho 40, Propilparabeno)</td><td>McCormick</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Caixas Cryo/Freezer sem Divisórias</td><td>Fisher</td><td>03-395-455</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Fórceps</td><td>Ferramentas de Ciência Fina</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Ácido Acético Glacial</td><td>Fisher</td><td>BP2401-500</td><td></td></tr><tr><td>Leica S6 E Microscópio Stereozoom 0.63X-4.0X</td><td>W. Nuhsbaum, Inc.</td><td></td><td></td>10446294</tr><tr><td>Placa de Petri (100 mm x 15 mm)</td><td>BD Falcon</td><td>351029</td><td>Reutilizável se bem lavado e seco</td></tr><tr><td>Microtubos Quick-Snap</td><td>Alkali Scientific Inc.</td><td>C3017</td><td></td></tr><tr><td>Corante Alimentar Vermelho (Água, Propilenoglicol, FD & C Reds 40 e 3, Propilparabeno)</td><td>McCormick</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Sacarose</td><td>IBI Scientific</td><td>IB37160</td><td></td></tr></tbody></table>

ensaio de preferência gosto para adulto<em&gt; drosophila</em

Taste Preference Assay for Adult Drosophila

A percepção olfativa e gustativa do ambiente é vital para a sobrevivência animal. A aplicação mais óbvia desses quimiosentidos é ser capaz de distinguir boas fontes de alimentos de fontes de alimentos potencialmente perigosas. A guestação requer contato físico com um composto químico que é capaz de sinalizar através de receptores gustativos que são expressos na superfície dos neurônios. Nos insetos, esses neurônios gustativos podem estar localizados em todo o corpo do animal, permitindo que o paladar desempenhe um papel importante em muitos comportamentos diferentes. Os insetos normalmente preferem compostos que contenham açúcares, enquanto compostos considerados de sabor amargo são evitados. Dada a importância biológica básica do paladar, há um intenso interesse em entender os mecanismos moleculares subjacentes a essa modalidade sensorial. Descrevemos um ensaio de sabor de Drosophila adulta que reflete a preferência dos animais por um determinado composto gustativo. Este ensaio pode ser aplicado a animais de qualquer origem genética para examinar a preferência de sabor por um composto solúvel desejado.

Alguns resultados típicos de ensaios de preferência do gosto são mostrados abaixo. Na maioria das experiências alguma variação na intensidade de coloração abdominal será visto (Figura 1). Qualquer coloração no abdómen se intensa ou fraca é considerada uma ingestão positivo. Portanto, é aconselhável para os investigadores para marcar animais, enquanto cegos à condição experimental, de modo a limitar os potenciais vieses. <p class="jove_content" fo:keep-together.within...

O paladar é um processo sensorial importante que facilita a atração por substâncias benéficas e evita substâncias tóxicas. Este protocolo descreve um ensaio de ingestão simples para determinar a preferência gustativa de Drosophila por um determinado composto químico.

Ensaio de Preferência gosto para Adulto<em&gt; Drosophila</em

Olfactory and gustatory perception of the environment is vital for animal survival.  The most obvious application of these chemosenses is to be able to ...

O objetivo geral deste procedimento é determinar a preferência relativa de Drosophila adultas por um tastante químico em detrimento de outro. Este método pode ajudar a responder perguntas fundamentais na área do paladar em Drosophila, como quais genes são necessários para a seleção entre compostos doces ou compostos amargos potencialmente tóxicos.A principal vantagem desta técnica é que ela é simples e não requer nenhum instrumento especializado. O procedimento será demonstrado por Andrew Bantel, um técnico do meu laboratório. Para iniciar o experimento, umedeça completamente uma bola de algodão com água na base de um frasco padrão para moscas.Em seguida, colete moscas em grupos de 100 animais sobre uma placa de CO2 e adicione-as a um frasco preparado. Use uma bola de algodão para fechar os frascos. Depois, coloque os frascos de lado em um incubador com controle ambiental.Prepare o tastante controle de sacarose de um milimolar, combinando 10 microlitros de solução de sacarose de 100 milimolar, 13 microlitros de corante alimentício vermelho e 977 microlitros de água. Em seguida, prepare o tastante experimental de sacarose de cinco milimolar. Depois, crie as câmaras de ensaio, obtendo uma placa de Petri plástica de 100 milímetros por 15 milímetros e colocando gotas de três microlitros do tastante controle o mais próximo possível da borda da placa na posição das 12 horas.Na posição das três horas, coloque três gotas de 10 microlitros do tastante experimental o mais próximo possível da borda da placa. Coloque outras três gotas do tastante controle na posição das seis horas. Em seguida, coloque outras três gotas do tastante experimental na posição das nove horas.Em seguida, despeje um frasco contendo 100 moscas em jejum sobre uma placa de CO2, apenas pelo tempo necessário para anestesiar todos os animais. Escove os animais para o centro de uma câmara de ensaio preparada e cubra-a com a tampa do recipiente. Coloque a câmara de ensaio dentro de uma caixa de papelão opaca.Em seguida, rotule a parte externa da caixa com a condição e o genótipo que estão sendo testados. Transfira todo o conjunto para uma incubadora. Após duas horas, coloque as câmaras de ensaio ainda contidas nas caixas de papelão diretamente em um congelador a menos 20 graus Celsius até que estejam prontas para quantificação.Deixe uma única câmara de ensaio aquecer até a temperatura ambiente. Sob um microscópio estereoscópico, use um pincel para agrupar os animais com base na cor de seu abdômen. Vermelho, azul ou roxo.Registre o número de animais em cada grupo. Este gráfico mostra os efeitos de concentrações variáveis de corante azul, mantendo-se constante a concentração de corante vermelho, revelando uma combinação ideal de 1,3% vermelho para 1,0% azul. Drosophila é naturalmente atraída por concentrações elevadas de sacarose, como indicado por um valor de índice de preferência próximo a um, quando oferecida a escolha entre sacarose de cinco milimolar e sacarose de um milimolar.Essa preferência foi revertida com ácido, que reduziu o índice de preferência a valores próximos de zero. Ao realizar este procedimento, é importante lembrar-se de testar os corantes alimentares: houve efeitos no ensaio de preferência? As concentrações de cada corante não devem ter impacto no índice de desempenho.

taste-preference-assay-for-adult-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Larvas de Drosophila são capazes de associar estímulos odor com recompensa gustativa. Aqui nós descrevemos um paradigma comportamental simples que permite a análise da aprendizagem associativa apetitiva olfativo.

Aprendizagem associativa apetitiva olfativa em<em&gt; Drosophila</em&gt; As larvas

Este vídeo descreve um ensaio de alimentação para moscas-das-frutas no qual alimentos coloridos são usados para monitorar a alimentação e o efeito que os compostos adicionados podem ter na atividade alimentar. O protocolo de exemplo testa os efeitos de vários produtos químicos desreguladores endócrinos (EDC).

Teste de alimentação: avaliação das preferências alimentares em Drosophila melanogaster

Este vídeo descreve o ensaio de preferência de sabor, um método comportamental usado para medir a atração ou evitação por soluções coloridas com sabor diferente, avaliando a coloração abdominal da mosca após a ingestão da substância preferida. O protocolo apresentado demonstra o procedimento usado para medir a preferência das moscas por soluções de concentrações variadas de sacarose.

Ensaio de Preferência de Sabor: Um Método para Medir o Comportamento Alimentar em Drosophila

Este vídeo descreve o ensaio CApillary FEeder, ou CAFE, um método comportamental que mede a ingestão de alimentos e a preferência de moscas-das-frutas desenfreadas. O protocolo apresentado mostra como realizar o ensaio com evaporação mínima dos capilares cheios de líquido usados para fornecer o alimento e rastrear sua ingestão.

O ensaio CApillary FEeder (CAFE): um método para rastrear o consumo e a preferência alimentar em Drosophila

As fêmeas de Drosophila escolhem entre substratos e selecionam locais atraentes para a postura de ovos. Este vídeo descreve um ensaio comportamental que testa sua tomada de decisão, chamado de ensaio de preferência de postura de ovos. O clipe em destaque demonstra o procedimento com uma configuração personalizada, que permite aos pesquisadores não apenas testar o comportamento de muitas fêmeas ao mesmo tempo, mas também é compatível com gravação de vídeo e configurações optogenéticas.

drosófila Ensaio de preferência de postura de ovos: um método para testar a tomada de decisão em moscas

Neste artigo de vídeo, descrevemos um método automatizado para medir o efeito de fome ou saciedade em olfativo comportamento de busca de alimentos dependente na fruta Drosophila melanogaster mosca adulta.

A Single-fly Ensaio para comportamento de forrageamento em Drosophila

Apresenta-se um teste de escolha para revelar a influência de odorantes sobre o comportamento de Drosophila, utilizando um ensaio de Y-labirinto.

Prova<em&gt; Drosophila</em&gt; Olfaction com um Ensaio Y-maze

Este protocolo descreve um ensaio de alto rendimento para testar as preferências de postura de ovos de Drosophila melanogaster em resolução de um único animal.  Este ensaio fornece uma plataforma simples, eficiente e escalável para identificar genes e componentes de circuitos que controlam um processo simples de tomada de decisão.

High Throughput Ensaio para examinar Preferências de postura de Pessoa<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Nós descrevemos um protocolo para induzir gratificante e nonrewarding experiências em moscas da fruta (Drosophila melanogaster), utilizando o consumo de etanol voluntária como uma medida de mudanças nos estados de recompensa.

Uma maneira simples para medir alterações na Recompensa comportamento de busca Usando<em&gt; Drosophila melanogaster</em

O ensaio CApillary FEeder (CAFE) é um método simples, econômico e altamente confiável para investigar os mecanismos subjacentes à ingestão de alimentos. Usado com o organismo modelo genético altamente versátil Drosophila melanogaster, ele fornece um meio poderoso de obter novos insights sobre os mecanismos regulatórios da ingestão de alimentos.

O capilar alimentador ensaio mede ingestão alimentar em<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Apresentamos um protocolo para um ensaio de alimentação de duas opções para moscas. Este ensaio de alimentação é rápido e fácil de executar e é adequado não apenas para pesquisas de laboratório de pequena escala, mas também para telas comportamentais de alto rendimento em moscas.

Um ensaio rápido de preferência alimentar em Drosophila

Aprenda a realizar ensaios de preferência gustativa em Drosophila adultos usando algodão saturado e câmaras de ensaio. Este método acessível permite investigar a base genética do paladar em moscas-da-fruta.

Ensaio de Preferência gosto para Adulto

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