Uma abordagem simples para manipular oxigênio dissolvido para o comportamento animal Observações

O objetivo geral deste método é manipular de forma eficaz e progressiva as condições de oxigênio dissolvido ou OD em um ambiente de laboratório, permitindo a observação das respostas comportamentais de animais aquáticos. O aspecto interessante deste método é que ele pode ter aplicações em diversos experimentos de comportamento animal.

Para vertebrados e invertebrados. A principal vantagem dessa técnica é que pode ser utilizada tanto no ensino em sala de aula quanto em pesquisas científicas. Em um local de campo selecionado, dentro de uma hora de deslocamento do laboratório, utilize procedimentos padrão de rede de varredura para coletar pelo menos 35 perobas.

Do riacho, colete quatro litros de água por aquário. Além de três litros adicionais por experimento. Assim como várias pedras com diâmetro máximo de dois centímetros.

De volta ao laboratório, distribua as rochas em aquários colocados em uma geladeira, ajustada à temperatura do local do riacho. E adicione quatro litros de água do riacho a cada aquário. Em seguida, adicione de 20 a 30 perlídeos a cada aquário.

E coloque uma pedra borbulhadora ligada a um aerador de aquário em cada tanque para adicionar continuamente ar ambiente à água. Após dois dias, conecte um tubo de vácuo padrão da parede ao braço lateral de um frasco de dois litros com braço lateral. E preencha o frasco com um ponto nove litros de água de riacho a 12 graus Celsius.

Coloque o frasco e a tubulação em uma bandeja grande o suficiente para acomodar um banho de gelo sem obstruir a visão do interior do frasco de braço lateral. Encha a bandeja com gelo. Insira uma sonda de OD em um dos orifícios de três milímetros de uma rolha de borracha preparada especialmente.

E um tubo de cobre com diâmetro de dois milímetros equipado com um acoplador macho para mangueira de três milímetros por meio de outro orifício de três milímetros. Até que o comprimento do tubo a partir da base da rolha esteja a menos de 10 centímetros do fundo do frasco. Conecte um tubo de gás de polietileno com parede fina, de diâmetro de três milímetros e comprimento de zero vírgula sete metro, ao acoplador.

Verifique se há um selo seguro entre a rolha e o frasco, bem como um encaixe firme entre o tubo e o fio da sonda dentro da rolha. É essencial que as rolhas e as tubulações estejam bem vedadas para manter um ambiente de pressão igual no interior do recipiente durante todo o experimento e para evitar vazamentos de nitrogênio para fora do recipiente. Coloque o tubo de polietileno em um frasco de um litro contendo zero vírgula quatro litros de água da torneira e prenda o tubo com fita para manter as extremidades submersas durante todo o experimento.

Em seguida, conecte a linha de gás de três milímetros de diâmetro do frasco de vácuo a um borbulhador de ar para aquário. Ligue o borbulhador para oxigenar a água no frasco de dois litros com o oxigênio ambiente. Use a sonda de OD para monitorar a temperatura da água e a concentração de OD por cerca de cinco minutos.

Até que um equilíbrio do OD seja estabelecido dentro da câmara. Antes de adicionar os plecópteros, coloque três a quatro pedras no frasco de dois litros para que os insetos tenham um substrato adequado para realizar movimentos ascendentes. Em seguida, inicie uma manipulação experimental do OD desconectando o tubo de gás do borbulhador e conectando-o à linha de gás nitrogênio.

Inicie a borbulhamento do nitrogênio a 20 pés cúbicos por hora durante aproximadamente 40 a 60 segundos. Interrompa imediatamente o fluxo de nitrogênio ao atingir a concentração-alvo. Utilize o borbulhador de ar do aquário para retornar à concentração-alvo se o DOD diminuir abaixo do valor desejado.

Se o OD for instável durante o teste, verifique se o volume de água ainda está em um ponto nove litros e se nenhuma água borbulhou para fora. A temperatura da água está estável e as vedações em todos os encaixes estão fechadas firmemente. Após reequilibrar o conjunto, adicione um número igual de plecópteros ao número de observadores ao frasco.

E feche o frasco com uma rolha de borracha. Borbulhe a água conforme acabou de ser demonstrado até atingir uma concentração-alvo de 10 miligramas por litro. Em seguida, registre a temperatura inicial da água.

E permita que os plecópteros se fixem à rocha submersa dentro do frasco. Cada observador contará e registrará o número de movimentos de flexão exibidos por um plecóptero individual ao longo de três minutos. Em seguida, manipule o OD para o próximo nível experimental e repita a observação de três minutos.

Nesta figura, o número médio de flexões realizado dentro de cada nível de OD, e dentro de cada um dos seis ensaios, foi extraído para plotar as flexões em função do nível de OD. Para esses experimentos, apenas a concentração de OD influenciou significativamente o número de flexões realizadas pelos plecópteros. Nenhuma outra variável ou interação demonstrou ser um preditor significativo do número de flexões.

Uma vez dominada, essa técnica pode ser reproduzida para atender aos objetivos específicos estabelecidos pelo pesquisador. Ao tentar este procedimento, é importante evitar mudanças na temperatura, pois isso poderia resultar em alterações no OD. Com este procedimento, outros métodos, como aqueles que alterariam o pH, podem ser usados para responder perguntas adicionais sobre as mudanças de pH e OD em organismos aquáticos. Após assistir a este vídeo, você deverá ser capaz de realizar a manipulação de oxigênio dissolvido em um ambiente de laboratório para diversos experimentos de comportamento animal.