Name: A principal modelo lesões repetitivas Concussive em Ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 42 s
Description: Aprenda a estabelecer um modelo de concussão repetitiva em camundongos usando um sistema de impacto eletromagnético. Este método permite estudos controlados sobre lesão cerebral traumática leve e seus efeitos neurológicos.

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Este trabalho foi apoiado por financiamento de uma bolsa de saúde da Flórida (fundo de pesquisa de lesões cerebrais e medulares) (KKW).

Todos os procedimentos foram realizados sob protocolos # 201207692 aprovado pelo Comitê de Cuidado e Uso Institucional animal da Universidade da Flórida e de acordo com o National Institutes of Health Guide para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório. 1. Animal Care <ol><li> Use 3-4 meses de idade, machos C57BL / 6J. Fornecer roupa de cama, material de nidificação, alimentação e água ad libitum. Mantenha os ratos em ambientes com temperaturas controladas a 20 - 22 ° C com 12 horas de luz / 12 horas ciclos escuros constantes. </li></ol> 2. Pré-impacção Preparação <ol><li> Anexar uma ponta de metal de silicone revestido de borracha feitos sob medida para um dispositivo de impacto estereotáxica eletromagnética. Certifique-se a parte inferior plana da ponta é paralela à superfície da ponta da sonda (Figura 1A). </li><li> Anestesiar o mouse com 4% de isoflurano seguido de anestesia de manutenção de 2,5% de isoflurano. Verifique a anestesia através do medidor de vazão. monitor o nível de anestesia até que o animal atinge um nível cirúrgico de anestesia, mostrando a perda do reflexo interdigital. </li><li> Coloque o mouse em uma posição de bruços em uma almofada de aquecimento. Use um cone de nariz em forma de funil para manter o rato sob anestesia. Completamente raspar a cabeça, usando um aparador. Use vaselina pomada oftálmica nos olhos do rato para evitar a secura e sob anestesia. </li></ol> 3. Parâmetros de Impacto Ambiente NOTA: O sistema de impacto inclui uma caixa de controle para definir os parâmetros de impacto, um actuador para realizar a impactação, e um quadro estereotáxico digital com 3 eixos de movimento. <ol><li> Pré-definir a velocidade do dispositivo de impacto a 4 m / s e o tempo de paragem de 240 ms sobre a caixa de controlo. </li></ol> 4. Posicionamento do Centro de Impacto <ol><li> Coloque uma almofada de aquecimento suave sob o corpo do animal para manter a temperatura corporal próximo de 39 ° C. Montar o mouse em um quadro estereotáxico em um prone posição com as barras de ouvido blunt-end. </li><li> Abaixe a ponta impacto perto da cabeça do rato movendo o Z-motorista. Ajuste a ponta impacto plana (9 mm de diâmetro), movendo o X e Y motoristas meio caminho para as coordenadas do alvo acima da sutura sagital. </li><li> Certifique-se de uma extremidade da ponta de impacto é verticalmente paralelo a uma linha horizontal imaginária desenhada entre as duas orelhas (Figura 1C). O centro de impacto corresponde ao meio do caminho sutura sagital central, entre suturas interfrontal e lambdóide (interaurais 9 mm para interaurais 0 mm, lateral 4,5 mm). </li></ol> 5. Impacto ajuste de profundidade <ol><li> Para configurar correctamente a profundidade do impacto, use ponta da sonda adicional para substituir a ponta impacto revestido de borracha de silicone isolados. </li><li> Para se certificar de que não há deslocamento do centro de impacto após dicas de comutação, definir o X e Y canal no painel de controle estereotáxico digitais para zero antes de mudar as pontas. </li><li> Mova o prove ponta para o centro da área de impacto movendo manualmente os X e Y.-drives. </li><li> sensor de contato clipe para a cauda do rato. </li><li> Mova o pêndulo (unidade Z) para baixo até a ponta da sonda toca a superfície do local do impacto. </li><li> Defina o canal Z no painel de controle estereotáxico para zero. </li><li> Mova a ponta impacto de volta para a área de impacto ajustando manualmente X e Y drivers (não os botões de zero no painel de controle estereotáxico digital) até que X e Y motoristas são zero (onde a ponta impacto foi posicionado anteriormente). </li><li> Retrair o atuador movendo a chave de retração na caixa de controle. mover manualmente o pêndulo para baixo (driver Z) por 4 mm. </li></ol> 6. Impacto <ol><li> Desencadear o impacto clicando no botão impacto sobre a caixa de controle e atingir uma profundidade de deformação de 4 mm. </li></ol> 7. Pós-impactação <ol><li> Medir o tempo do impacto, até a primeira respiração do mouse usando um temporizador. </li><li&gt; Remover o animal do instrumento e colocá-los em uma almofada quente para manter a temperatura corporal. Não deixe o animal sem supervisão até que tenha recuperado a consciência suficiente para manter decúbito esternal. </li><li> Permitir a recuperação antes de retornar o animal de volta em uma gaiola limpa. Não devolva um animal para a companhia de outros animais até que esteja totalmente recuperado. </li><li> Observe e pesar os ratos diariamente. Se os ratos mostram sinais de dor, por via intraperitoneal com meloxicam injecta-a ​​1 - 2 mg / kg a cada 12-24 horas. </li></ol> 8. Impactação repetitivo <ol><li> Dê os ratos lesões adicionais nos dias 4, 7 e 10 após a lesão inicial (intervalo de 72 horas entre os impactos). </li></ol> 9. Imuno-histoquímica (IHC) <ol><li> perfusão transcardial <ol><li> Anestesiar os ratos por meio de injecção intraperitoneal com 200 m / kg de pentobarbital. </li><li> Avaliar e assegurar a anestesia cirúrgica plano por uma pitada dedo do pé. Secure o mouse na posição supina gravando suavemente as patas dianteiras e as patas traseiras para uma superfície de trabalho de isopor dentro de uma Cobertura de vapores químicos. </li><li> Faça uma incisão através da pele ao longo da linha média torácica a partir de apenas abaixo do apêndice xifóide até a clavícula. Faça duas incisões na pele adicionais no processo xifóide e prossiga ao longo da base da caixa torácica ventral lateralmente. </li><li> Abrir a cavidade torácica e expor o coração, cortando através da musculatura torácica e caixa torácica. </li><li> Fixe o coração batendo com uma pinça sem corte e fazer uma 1 - incisão de 2 mm de ventrículo esquerdo. </li><li> Imediatamente insira uma agulha de borboleta para o átrio direito. Comece a infusão de solução salina 20 ml, empurrando a seringa lentamente. </li><li> Mudar de solução salina a 4% paraformaldeído. Continue a perfusão com 20 ml de paraformaldeído. </li><li> Decapitar o mouse e remover a pele com uma tesoura. Isolar o cérebro do crânio utilizando um cortador de osso. </li></ol></li><li> Cryostat seccionamento <ol><li> tecidos cerebrais incorporar em temperatura de corte (OCT) formulação e congelamento ideal a -80 ° C. Colocar o cérebro no criostato com uma orientação sagital. seções do cérebro corte de 5 mm de espessura. </li></ol></li><li> coloração <ol><li> Secam-se as secções congeladas à temperatura ambiente durante 1 h. </li><li> Incubar as lâminas com 100 ul de soro de cabra 2% e 0,1% de Triton X-100 em fosfato salino tamponado (PBS) durante 1 h à TA. </li><li> Lavar as lâminas 3 vezes com 300 ul de PBS. Em seguida, as lâminas incubar com anti-GFAP (1: 200) ou anticorpo anti-ferritina (1: 200) em separado durante a noite a 4 ° C. </li><li> Lavar as lâminas 3 vezes com 300 ul de PBS. Em seguida, as lâminas incubar durante 2 horas à temperatura ambiente com anticorpo secundário conjugado com biotina. </li><li> Lavar as lâminas 3 vezes com 300 ul de PBS. Em seguida, incubar as lâminas com solução de complexo avidina-biotina (ABC) (01:50) à temperatura ambiente durante 30 min. </li><li>Lavar as lâminas 3 vezes com 300 ul de PBS. Em seguida, incuba-se 3,3&#39;-diaminobenzidina solução (DAB) de substrato (50 ml de PBS, 10 ul de H 2 O 2, 10 mg de DAB pílula, filtro antes de usar) para 5-8 min. Observe as lâminas sob o microscópio até as células positivas aparecem. </li><li> Lavar as lâminas em lenta água corrente da torneira durante 5 min. lâminas limpas com um laboratório-wipe. Em seguida, montar as seções com meio de montagem e lamela. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Baugh, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+traumatic+encephalopathy%3A+neurodegeneration+following+repetitive+concussive+and+subconcussive+brain+trauma%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Imaging+Behav%22%5BJournal%5D)">Chronic traumatic encephalopathy: neurodegeneration following repetitive concussive and subconcussive brain trauma.</a> Brain Imaging Behav. 6 (2), 244-254 (2012).</li>
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<li>Luo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+cognitive+impairments+and+pathological+alterations+in+a+mouse+model+of+repetitive+mild+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Long-term cognitive impairments and pathological alterations in a mouse model of repetitive mild traumatic brain injury.</a> Front Neurol. , 5-12 (2014).</li>
<li>Yang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+MRI+characterization%2C+neurobiochemical+and+neurobehavioral+changes+in+a+mouse+repetitive+concussive+head+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Temporal MRI characterization, neurobiochemical and neurobehavioral changes in a mouse repetitive concussive head injury model.</a> Sci Rep. 10 (5), 11178(2015).</li>
<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+monoacylglycerol+lipase+prevents+chronic+traumatic+encephalopathy-like+neuropathology+in+a+mouse+model+of+repetitive+mild+closed+head+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Inhibition of monoacylglycerol lipase prevents chronic traumatic encephalopathy-like neuropathology in a mouse model of repetitive mild closed head injury.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 35 (3), 443-453 (2015).</li>
<li>Petraglia, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+spectrum+of+neurobehavioral+sequelae+after+repetitive+mild+traumatic+brain+injury%3A+a+novel+mouse+model+of+chronic+traumatic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">The spectrum of neurobehavioral sequelae after repetitive mild traumatic brain injury: a novel mouse model of chronic traumatic encephalopathy.</a> J Neurotrauma. 31 (13), 1211-1224 (2014).</li>
<li>Lumpkins, K. M., Bochicchio, G. V., Keledjian, K., Simard, J. M., McCunn, M., Scalea, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glial+fibrillary+acidic+protein+is+highly+correlated+with+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma%22%5BJournal%5D)">Glial fibrillary acidic protein is highly correlated with brain injury.</a> J Trauma. 65 (4), 778-782 (2008).</li>
<li>Yang, Z., Wang, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glial+fibrillary+acidic+protein%3A+from+intermediate+filament+assembly+and+gliosis+to+neurobiomarker%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Glial fibrillary acidic protein: from intermediate filament assembly and gliosis to neurobiomarker.</a> Trends Neurosci. 38 (6), 364-374 (2015).</li>
<li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+expression+of+ferritin+in+cerebral+cortex+after+human+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">Increased expression of ferritin in cerebral cortex after human traumatic brain injury.</a> Neurol Sci. 34 (7), 1173-1180 (2013).</li>
<li>Jordan, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+clinical+spectrum+of+sport-related+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurol%22%5BJournal%5D)">The clinical spectrum of sport-related traumatic brain injury.</a> Nat Rev Neurol. 9 (4), 222-230 (2013).</li>
</ol>

Os autores não têm interesse financeiro a divulgar.

Para imitar lesões cerebrais morfologicamente semelhantes ao quadro clínico, os sintomas pós-concussão são esperadas. sintomas pós-concussão geralmente incluem dores de cabeça, tonturas, vertigens, fadiga, problemas de memória e de sono, dificuldade de concentração, bem como a ansiedade e humor deprimido. Como os sintomas somáticos pode ainda não ser mensurável em modelos animais, as mudanças da função motora e cognitiva e comportamento emocional são usados ​​como critérios para avaliar racionalmente concussão em modelo...

Concussão, também chamado de leve lesão cerebral traumática (mTBI), é a ocorrência mais frequente de lesão cerebral traumática (TBI) e afeta milhões de pessoas em Estados Unidos. Concussões podem ser difíceis de diagnosticar e não há nenhuma cura específica para concussão. Há um crescente reconhecimento e alguma evidência de que trauma mecânico leve resultante de lesões desportivas, combate militar, e outras atividades fisicamente atraentes podem ter consequências neurológicas cumulativos e crônicos 1,2. No entanto, ainda há uma falta de conhecimento sobre concussões e seus efeitos. metodologia atual restringe os estudos de patologia e tratamento em seres humanos uma vez que apenas a avaliação neurológica e avaliação por imagem estão disponíveis para o diagnóstico clínico. Os modelos animais proporcionam um meio para estudar abalos de uma maneira eficiente e rigoroso, controlado e com a esperança de ainda mais o diagnóstico e tratamento de mTBI. Estudos têm adaptado TCE tradicionalmodelos como o impacto cortical controlado (CCI), o impacto por percussão fluida (FPI), lesão queda de peso e lesão física por explosão de realizar mTBI e estimular gravidades baixos de ferimento, alterando os parâmetros de lesão. Estes modelos são benéfico de usar devido à sua capacidade de se replicar trauma cerebral morfologicamente semelhante à condição clínica; no entanto, eles também têm as suas próprias limitações. A gravidade da lesão induzida por uma lesão aceleração (queda de peso) é muitas vezes altamente variável. Os dois resultados do CCI leve - hemorragia subaracnóide e contusão focal - não são comparáveis ​​com os abalos humanas típicas. CCI e FPI exigem uma craniotomia, que não é clinicamente relevante, enquanto a lesão física por explosão é um modelo mais controversa no que diz respeito à posição da exposição e da pressão de pico diferentes medidas, bem como a lesão secundária variável durante a exposição 3-6. Um modelo animal de concussão atualizada que podem traduzir a investigação pré-clínica no setti clínicang é necessário em investigação. A questão-chave na modelagem de TCE leve é ​​definir a gravidade da lesão experimental, que replica mais se aproxima da lesão em um ambiente clínico. Recentemente, diferentes grupos de pesquisa desenvolveu o traumatismo craniano fechado ou ferimento na cabeça de concussão (CHI) modelo 7-10. CHI é uma modificação de ICC sem uma craniotomia, mas ainda utiliza um sistema electrónico de impacto magnética tradicional para gerar um impacto da cabeça. A CHI pode induzir uma concussão variando de leve a moderada, ajustando os parâmetros de impacto. A perda de consciência (LOC) pode ser observado imediatamente após o impacto através da detecção de uma diminuição na taxa de respiração ou a cessação temporária da respiração. O período de LOC é utilizada para determinar a gravidade da lesão. Este trabalho inclui uma versão ligeiramente melhorada e actualizada de um modelo repetitivo CHI (rCHI) em ratos, juntamente com um protocolo detalhado passo-a-passo e resultados representativos. O rCHI estratégias modelo de investigação are benéfica para determinar efeitos mTBI e tratamentos potenciais, especialmente porque não existe um modelo animal individual capaz de imitar todas as alterações patológicas induzidas por concussão.

<table><tbody><tr><td>máquina de anestesia</td><td>Eagle Eye Anesthesia, Inc</td><td>Modelo 150&nbsp;</td><td>anestesia</td></tr><tr><td>Impactor Eletromagnético</td><td>LeicaBiosystems</td><td>Impact One Impactor Estereotáxico</td><td>realizar impactação</td></tr><tr><td>Instrumento estereotáxico digital</td><td>LeicaBiosystems</td><td>39462501</td><td>montar mouse e pontas de posicionamento</td></tr><tr><td>Ponta de metal revestida de borracha Sicilone</td><td>Ferramenta de precisão e Engenharia, Aparador</td> All-in-One <td>feito sob medida</td> WAHL da <td>ponta do impacto da ponta do impacto</td></tr> de Lithium da ponta do impacto <tr><td></td><td>Produtos 9854-600</td><td></td> faz a barba dos grampos de <td>papel do cabelo do rato</td></tr> ponta <tr><td></td><td>de prova feito-à-medida</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Algodão derrubou a cabeça dos aplicadores</td><td>MEDLINE</td><td>MDS202055</td><td>esfrega a cabeça com soro fisiológico</td></tr><tr><td>Tecido Tek O.C.T.</td><td>ASKURA FINETEK USA INC</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>anti-GFAP anti-GFAP</td><td>Dako</td><td>CA93013</td><td>anticorpo para IHC</td></tr><tr><td>anti ferritina</td><td>Sigma</td><td>F6136</td> kit para <td>IHC</td></tr><tr><td>VECTASTAIN Elite ABC&nbsp; kit</td><td>Vector laboratories</td><td>PK-6100</td><td>Sistema de detecção IHC</td></tr><tr><td>Permount Montagem Média</td><td>Fisher Scientific</td><td>SP15-100</td><td></td></tr><tr><td>Aperio XT Scanner ScanScope</td><td>Leica Microsystems Inc,</td><td></td> <td>lâminas de digitalização</td></tr><tr><td>Leica AutoStainer XL</td><td>Leica a patologia Empresa</td><td>ST2010</td><td>H & Coloração E</td></tr><tr><td>DAB&nbsp;</td><td>Sistema de detecção sigma</td><td>D3939</td><td>IHC</td></tr></tbody></table>

a principal modelo lesões repetitivas concussive em ratos

A Repetitive Concussive Head Injury Model in Mice

Apesar da concussão/traumatismo cranioencefálico leve (mTBI) ser a ocorrência mais frequente de traumatismo cranioencefálico, ainda há falta de conhecimento sobre a lesão e seus efeitos. Para desenvolver uma melhor compreensão das concussões, os animais são frequentemente usados porque fornecem um modelo controlado, rigoroso e eficiente. Estudos adaptaram modelos animais tradicionais para realizar mTBI para estimular a gravidade leve da lesão, alterando os parâmetros da lesão. Esses modelos têm sido usados porque podem produzir lesões cerebrais morfologicamente semelhantes à condição clínica e fornecer um espectro de gravidade das lesões. No entanto, eles são limitados em sua capacidade de apresentar as características idênticas de lesões em pacientes. Usando um sistema de impacto tradicional, um modelo de lesão concussiva repetitiva (rCHI) pode induzir concussão humana leve a moderada. O grau de lesão pode ser determinado medindo o período de perda de consciência (LOC) com um sinal de término transitório da respiração. O modelo rCHI é benéfico para uso por sua precisão e simplicidade na determinação dos efeitos do mTBI e possíveis tratamentos.

Neste modelo (Figura 1 AC), houve breves períodos de respiração ofegante e rasas. A perda de consciência (inconsciente) é definida como uma diminuição na taxa de respiração ou cessação temporária da respiração antes de retomar a respiração normal. Um impacto no centro da cabeça provocada inconsciência de curto prazo (7,5 ± 4,7, 7,8 ± 5,5, 10,2 ± 8,8, 9,5 ± 8,0 seg a cada impacto separadamente, Figura 1D). Cérebro do rato apresentaram morfologia normal, H...

A concussão apresenta o tipo mais comum de lesão cerebral traumática. Portanto, um modelo animal de concussão repetitiva, que replica as características importantes de uma lesão em pacientes, pode fornecer um meio de estudar a concussão de maneira rigorosa, controlada e eficiente.

A principal modelo lesões repetitivas Concussive em Ratos

Despite the concussion/ mild traumatic brain injury (mTBI) being the most frequent occurrence of traumatic brain injury, there is still a lack of ...

O objetivo geral deste procedimento é estabelecer um modelo repetitivo de concussão em camundongos utilizando um sistema de impacto tradicional. Esses camundongos podem ajudar a responder perguntas fundamentais na área de modelagem de lesão cerebral traumática leve, ou TBI, sobre o impacto da concussão na função cerebral. A principal vantagem desta técnica é que o sistema de impacto com eletroímã pode ser operado facilmente, e o processo pode ser controlado para a aplicação dos impactos.Primeiro, prenda uma ponteira de metal revestida com borracha de silicone feita sob encomenda a um dispositivo estereotáxico de impacto eletromagnético, tomando cuidado para que a base plana da ponteira revestida esteja paralela à superfície da ponteira do dispositivo de impacto. Em seguida, posicione um camundongo anestesiado em posição prona sobre uma placa aquecida e confirme a ausência de resposta ao aperto nos dedos dos pés. Depois, use uma máquina de cortar pelos para raspar completamente a cabeça e aplique pomada nos olhos do animal.Quando o animal estiver pronto, ajuste previamente a velocidade do dispositivo de impacto para quatro metros por segundo e o tempo de permanência para 240 milissegundos na caixa de controle. Coloque uma almofada térmica macia sob o corpo do animal para manter a temperatura corporal próxima de 39 graus Celsius. Em seguida, utilize as hastes auriculares de ponta romba para fixar o camundongo no estereotáxico na posição prona.Use o driver Z para baixar a ponta de impacto próximo à cabeça do camundongo. Mova os drivers X e Y até o ponto médio das coordenadas-alvo, acima da sutura sagital, para ajustar a ponta de impacto plana com diâmetro de nove milímetros, tomando cuidado para que uma borda da ponta de impacto fique verticalmente paralela a uma linha horizontal imaginária traçada entre as duas orelhas. Para definir corretamente a profundidade do impacto, primeiro configure os canais X e Y no painel digital estereotáxico em zero, para garantir que não haja deslocamento do centro do impacto após a troca das pontas.Em seguida, mova a ponta adicional do eletrodo para o local do impacto no cérebro do camundongo. Ajuste manualmente os controles X e Y para posicionar a ponta do eletrodo no centro da área impactada e prenda um sensor de contato na cauda. Utilize o controle Z para mover o impactador para baixo até que a ponta do eletrodo toque a superfície do local do impacto, e defina o canal Z no painel de controle estereotáxico em zero.Em seguida, utilize os drivers X e Y para mover manualmente a ponta de impacto de volta à área de impacto, até que os drivers X e Y estejam em zero. Em seguida, mova o driver Z para baixo até que o painel de controle indique que o driver Z está em 4,00. E mova a chave de recuo na caixa de controle para recolher o atuador.Agora, clique no interruptor de impacto na caixa de controle para acionar um impacto com uma profundidade de deformação de quatro milímetros e use um cronômetro para medir o tempo entre o impacto e a primeira respiração do camundongo. Em seguida, transfira o animal para uma placa aquecida com monitoramento até que esteja completamente recuperado. Para configurar lesões repetitivas, aplique lesões adicionais aos camundongos nos dias quatro, sete e dez após a lesão inicial.Um impacto no centro da cabeça causa inconsciência de curta duração, definida por uma interrupção transitória da respiração. Os cérebros exibem morfologia normal, sem lesões estruturais evidentes ou danos teciduais observados histologicamente decorrentes do impacto. Em resposta ao TBI, sabe-se que os astrócitos sofrem certas alterações, incluindo ativação, proliferação ou gliose reativa.De fato, no corpo caloso de cérebros de camundongos submetidos a lesões cerebrais concussivas repetitivas, sinais evidentes de ativação de astrócitos ainda podem ser observados sete dias após o último impacto. Além disso, células imunopositivas para ferritina podem ser detectadas na córtex cerebral de camundongos um dia após o último impacto, persistindo por pelo menos sete dias, sugerindo que múltiplos impactos podem resultar em micro-hemorragias corticais. Uma vez dominada, esta técnica pode ser concluída em 15 minutos, se realizada corretamente.Ao realizar este procedimento, é importante lembrar-se de posicionar corretamente o lado do impacto no cérebro do camundongo. Após seu desenvolvimento, esta técnica abriu caminho para pesquisas na área de lesão cerebral traumática (TBI), permitindo explorar os efeitos, o diagnóstico e o tratamento potencial da TBI leve em modelos de atletas. Após assistir a este vídeo, você deverá ter uma boa compreensão de como montar um modelo repetitivo de concussão em camundongos, utilizando um sistema de impacto tradicional.

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JoVE Journal

Medicine

Medicina

Fonte: Yang, Z., et.al. Um modelo repetitivo de traumatismo craniano concussivo em camundongos. J. Vis. Exp. (2016). Este vídeo demonstra a indução de lesões repetitivas e concussivas na cabeça em um mouse usando um dispositivo de impacto eletromagnético. O procedimento envolve posicionar a ponta de impacto entre as suturas interfrontal e lambdoide no crânio de um camundongo anestesiado e usar uma ponta de sonda para definir com precisão a profundidade do impacto. O impacto é aplicado em...

Modelagem de lesões repetitivas e concussivas na cabeça em um modelo de camundongo

Os atletas absorvem várias centenas de lesões cerebrais traumáticas leves (mTBI) / concussões todos os anos; No entanto, a conseqüência disso no cérebro é mal compreendida. Portanto, um modelo animal de mTBI único e repetitivo que replica consistentemente sintomas clinicamente relevantes fornece os meios para avançar o estudo do mTBI e concussão.

Um modelo de mouse de lesões cerebrais traumáticas leves simples e repetitivas

A alteração do neurotransmissor é um mecanismo de disfunção neural que ocorre após concussão e contribui para as conseqüências de longo prazo, às vezes catastróficas. Este modelo de rato combina microdiálise, permitindo a quantificação do neurotransmissor in vivo, com uma técnica de queda de peso que exerce rápida aceleração e desaceleração da cabeça e tronco, um fator importante do trauma craniocerebral humano.

Um romance e modelo de rato translacional de concussão combinando força e rotação com Microdiálise cerebral in vivo

O protocolo descreve traumatismo cranioencefálico leve em modelo de camundongo. Em particular, um protocolo passo-a-passo para induzir um traumatismo cranioencefálico fechado na linha média leve e a caracterização do modelo animal são totalmente explicados.

Modelo de Lesão Cerebral Traumática Leve em Camundongos com Controle Eletromagnético

Este protocolo apresenta um modelo de camundongo modificado de lesão cerebral traumática leve repetitiva (rmTBI) induzida por um método de traumatismo cranioencefálico fechado (CHI). A abordagem apresenta uma janela de crânio afinado e percussão de fluido para reduzir a inflamação comumente causada pela exposição às meninges, juntamente com melhor reprodutibilidade e precisão na modelagem de rmTBI em roedores.

Modelo de camundongo modificado de lesão cerebral traumática leve repetitiva incorporando janela de crânio afinado e percussão fluida

As concussões pediátricas podem resultar em sequelas a longo prazo com perturbações fisiológicas e psicológicas. Este modelo de camundongo com concussão pediátrica resulta em neuroinflamação de longo prazo, alterações na substância branca e modificações neuronais com disfunção comportamental. O modelo pode ser adaptado a locais de impacto diferencial ou concussões repetidas para avaliar mudanças ao longo da vida.

Um modelo de concussão pediátrica em camundongos: traumatismo craniano fechado com distúrbios de longo prazo (CHILD) 

Poupado do Nervo modelo animal de lesão é descrita aqui como um modelo do rato da dor neuropática periférica seguintes denervação parcial do nervo ciático por a lesão do tibial e nervo peroneal comum ramos, deixando o nervo sural restante intacto. Modificação comportamental resultante da alodinia mecânica é quantificada por filamentos de von Frey.

Poupado da lesão do nervo Model (SNI) de alodinia mecânica induzida em camundongos

Controlada por laceração do colo do útero em camundongos

Descrevemos modelos de lesão renal por isquemia e reperfusão induzida moderada e grave em que os ratos submetidos a clampeamento do pedículo renal unilateral seguido de nefrectomia contralateral simultânea ou tardia, respectivamente. Estes modelos consistentemente dar origem a uma disfunção renal e fibrose pós-lesão, mas a gravidade da lesão e sobrevivência dependem de fundo, idade e equipamento cirúrgico mouse.

Isquemia-reperfusão modelo de lesão renal aguda e Pós Lesão fibrose em camundongos

Este método foi desenvolvido com o objectivo de proporcionar uma solução de fármaco estável através da artéria carótida, para avaliar a farmacocinética de drogas novas em modelos de rato.

Infusões artéria carótida para farmacocinéticas e farmacodinâmicas Análise de taxanos em Ratos

Aprenda a estabelecer um modelo de concussão repetitiva em camundongos usando um sistema de impacto eletromagnético. Este método permite estudos controlados sobre lesão cerebral traumática leve e seus efeitos neurológicos.

A principal modelo lesões repetitivas Concussive em Ratos

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