Migração fagossomo e velocidade medida no Live primárias macrófagos humanos infectados com o HIV-1

O objetivo geral desta análise é quantificar a velocidade do fagossomo em macrófagos infectados pelo HIV-1 usando um método simples de rastreamento manual. A vantagem deste protocolo é fornecer um método fácil para calcular os movimentos relativos de grupos de objetos dentro de uma célula que podem estar em movimento ou deformados. Este método fornece informações sobre o movimento de fagossomos em macrófagos infectados com GFP-positivo, mas pode ser usado para outros compartimentos intercelulares em células marcadas com fluorescência.

Depois de infectar macrófagos derivados de monócitos humanos e opsonizar células sanguíneas criadas em ovelhas, de acordo com o protocolo de texto, montar um ensaio de fagocitose usando um sistema de imagem confocal, como um microscópio de disco giratório, equipado com uma câmara de aquecimento a 37 graus Celsius, com dióxido de carbono. Antes do experimento, ligue a câmara de aquecimento para aquecer o microscópio stage a 37 graus Celsius. Em seguida, ligue o microscópio e o computador e carregue o software de imagem.