O isolamento, a diferenciação e a quantificação de anticorpo humano secretoras de células B de sangue: ELISpot como uma leitura funcional de Imunidade Humoral

O objetivo geral desta metodologia ELISpot é permitir a quantificação de células B secretoras de anticorpos humanos do sangue. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo biomédico sobre a imunologia das células B e a pesquisa de vacinas. A principal vantagem dessa técnica é que ela permite a detecção e medição de células B secretoras de anticorpos no nível de uma única célula.

Demonstrando o procedimento estará Tsung-Chih Tseng, um estudante de pós-graduação do meu laboratório. Imediatamente após obter uma amostra de sangue de 10 ml da veia cubital mediana em um tubo de 15 ml contendo EDTA suplementado com potássio, inverta o tubo várias vezes para evitar a formação de coágulos. Em seguida, adicione 35 ml de tampão de lise de glóbulos vermelhos autoclavado às células para uma incubação de cinco minutos à temperatura ambiente.