Symmetric Bihemispheric Postmortem Cérebro de corte para o Estudo de Saúde e Condições Patológicas cerebral em humanos

O objetivo geral deste procedimento é coletar e analisar sistematicamente uma série constante de regiões cerebrais simetricamente dissecadas de ambos os hemisférios do cérebro humano, a fim de avaliar a gravidade, o estadiamento clínico-patológico e a distribuição hemisférica de várias doenças cerebrais. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da neuropatologia, fornecendo uma coleção sistematicamente organizada de dados neuropatológicos qualitativos e quantitativos para correlações patológicas clínicas e de imagem detalhadas. A principal vantagem dessa técnica consiste em fornecer dados relevantes relacionados aos processos patológicos propriamente ditos, bem como ao aspecto histofuncional especializado de cada hemisfério cerebral.

Depois de fixar o tecido cerebral humano post-mortem de acordo com o protocolo de texto, coloque o cérebro em uma superfície plana com os pólos frontais direcionados para o lado oposto ao investigador. Oriente o cérebro para permitir a visualização completa e clara de todos os giros e sulcos corticais de todo o cérebro. Examine o tecido em busca de anomalias meníngeas, assimetrias hemisféricas macroscópicas, fidelidade tecidual macroscópica, malformações congênitas, anormalidades vasculares ou quaisquer outras anormalidades ou apresentações incomuns da superfície cerebral.

Com os pólos frontais orientados para longe do investigador e os aspectos superficiais dos hemisférios voltados para o investigador, tire quantas fotos digitais forem necessárias para documentar possíveis anomalias macro e levar em conta possíveis considerações clínicas, neurais, anatômicas e pós-corte. Tire fotos digitais perpendicularmente ao cérebro para capturar toda a superfície cortical. Em seguida, usando tinta ou agulhas coloridas, marque os giros corticais centrais pré e pós.

Em seguida, com os pólos frontais ainda voltados para o lado, vire o cérebro 180 graus e inspecione cuidadosamente a base do cérebro, prestando atenção especial aos sistemas cerebrovasculares e aos nervos cranianos nos níveis de saída e entrada do tronco cerebral. Gerencie os bulbos e tratos olfatórios com cuidado especial para evitar a laceração dos tecidos devido à sua extrema fragilidade. Tire fotografias digitais perpendicularmente ao cérebro para capturar a totalidade das superfícies corticais e do tronco cerebral.

De frente para a base do cérebro e usando um bisturi, corte o tronco cerebral transversalmente na parte superior da ponte o mais próximo possível da base do cérebro. Inspecione cuidadosamente a substância negra quanto à palidez e inspecione outras estruturas vizinhas. Usando um dispositivo de gravação de áudio, observe qualquer aparência incomum do cérebro em comparação com um cérebro normal.

Aqui, o bulbo olfatório e o trato dos hemisférios esquerdo e direito estão sendo dissecados. Vire o cérebro de volta e, usando uma faca afiada, siga uma direção fronto-occipital para separar os dois hemisférios, cortando o corpo caloso centralmente através da fissura longitudinal medial. Inspecione cada lado de cada hemisfério em busca de possíveis anomalias.

Depois de tirar quantas fotos forem necessárias, inclusive perpendicularmente ao cérebro para capturar toda a superfície cortical, coloque os dois hemisférios deitados em seus aspectos mediais com os lobos frontais voltados para longe do investigador e com seus centros se tocando. Usando uma faca afiada, corte manualmente os dois hemisférios cerebrais começando nos pólos frontais e mova-se em direção aos pólos occipitais por todo o comprimento dos hemisférios para obter duas séries de placas de tecido cerebral de um centímetro de espessura. Posicione as placas cerebrais em uma sequência anatomicamente organizada e simétrica em uma superfície plana branca com uma régua impressa para fotografar.

Certifique-se de que as superfícies coronais da laje estejam visíveis para inspeção ocular direta e fotografia digital. Use superfícies de corte com grades milimétricas impressas em ambos os lados para localizar estruturas cerebrais, tamanhos e possíveis anormalidades de maneira mais precisa. Com as superfícies coronais visíveis, tire fotografias digitais perpendicularmente para capturar toda a superfície cortical.

Faça anotações de qualquer aspecto incomum do cérebro em comparação com um cérebro normal. Em seguida, usando um bisturi afiado, disseque manualmente pequenos blocos retangulares de tecido cerebral para cada região cerebral estabelecida. Siga o esquema de coleta da região cerebral proposto descrito nesta tabela.

Crie os códigos de identificação para rotular os de histo gerando números aleatórios ou semi-aleatórios para cada caso em que AD significa Alzheimer's Disease Study, 16 representa o ano em que a autópsia foi realizada e 0001 é um número de espécime de acesso progressivo. Coloque cada bloco de tecido em histo separados. Tire quantas fotos digitais forem descritas anteriormente de todo o cérebro cortado e dos histo associados.

Depois de tirar um conjunto completo de fotos, perfure pedaços de tecido de dois a cinco milímetros para extração de DNA e análise genética. Finalmente, mergulhe todos os histo contendo blocos de tecido cerebral no mesmo tipo de solução fixadora usada anteriormente e processe o tecido de acordo com o protocolo de texto. Esta tabela descreve alguns dados semiquantitativos preliminares usando um procedimento de corte cerebral bi-hemisférico simétrico realizado em uma série de cérebros humanos coletados no banco de cérebros.

Dados preliminares mostram que a maioria dos cérebros de controle de indivíduos mais velhos foram realmente positivos para placas neuríticas beta-A e emaranhados tau-neurofibrilares e que os níveis de placas neuríticas insolúveis de beta-A foram maiores no córtex entorrinal esquerdo e no hipocampo em comparação com as mesmas regiões cerebrais no lado direito. Uma vez dominada, essa técnica pode ser concluída em uma hora para cérebros fixos e em duas horas para cérebros novos, se for executada corretamente. Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de seguir o esquema de corte proposto, coletar cada região cerebral de ambos os hemisférios com base no conhecimento anatômico humano preciso.

Após este procedimento, outros métodos como extração de DNA, RNA ou proteína podem ser realizados para responder a perguntas adicionais, como quais são os níveis de ativação de um gene específico em uma região específica do cérebro em um hemisfério específico em uma doença cerebral específica. A cada difusão, essa técnica abrirá caminho para pesquisadores no campo da neuropatologia, patologia clínica e correlação de patologia de imagem explorarem os aspectos patológicos relacionados ao hemisfério de várias doenças neuropsiquiátricas. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como coletar regiões anatômicas específicas de ambos os hemisférios do cérebro humano para avaliar a gravidade da doença, o estágio patológico da doença e a distribuição hemisférica de diferentes processos neuropatológicos.

Não se esqueça de que trabalhar com o cérebro humano é trabalhar com a história de uma pessoa com circuitos neuroanatômicos complexos e possivelmente com diferentes doenças e que lâminas, bisturis e formalina devem ser manuseados com extrema precaução.