Determinação da superfície celular Relativa e Expressão total de canais recombinante de iões utilizando Citometria de Fluxo

O objetivo geral deste método é quantificar a expressão da superfície celular de proteínas de membrana usando um ensaio espaçado fluorescente. A principal vantagem dessa técnica é que os ensaios de citometria de fluxo fornecem pontos finais quantificáveis em grandes volumes de células vivas em um único experimento. As implicações dessa técnica se estendem ao diagnóstico e à terapia das arritmias ventriculares cardíacas, pois essas patologias estão frequentemente associadas a mutações genéticas que causam defeitos no tráfego dos canais iônicos cardíacos.

Geralmente, os indivíduos novos neste método lutam para identificar um local de inserção extrorsal adequado para o epítopo que não prejudique sua função proteica e gere um forte sinal fluorescente na presença do anticorpo conjugado. Demonstrando esse procedimento estará Benoite Bourdin, assistente de pesquisa do meu laboratório. Para começar, marque duplamente as construções de DNA com mCherry no terminal C intracelular.