Name: Procedimentos Operacionais da Eletroquimioterapia para tratamento do tumor em cães e gatos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-24T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 32 s
Description: Aprenda a eletroquimioterapia para tratamento de tumores sólidos em cães e gatos usando bleomicina e cisplatina com eletroporação. Este método aumenta a acumulação intracelular de fármacos com mínimos efeitos colaterais sistêmicos.

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Os autores reconhecem o apoio financeiro recebido do orçamento do Estado pela Agência de Pesquisa da Eslovênia (programa nº P3-0003, projeto nº J3-6796). A pesquisa foi conduzida no âmbito do Laboratório Associado Europeu (LEA) da EBAM. Este manuscrito é o resultado dos esforços de ligação em rede da Acção COST TD1104. Gostaríamos de agradecer a Alenka Seliskar, Mojca Juvan (Faculdade de Veterinária, Clínica de Cirurgia e Pequenos Animais) e Jakob Konda (Instituto de Oncologia, Ljubljana, Ljubljana, Eslovênia) por toda a sua valiosa ajuda.

Este protocolo foi aprovado pela Comissão de Ética do Ministério da Agricultura, Florestas e Alimentação e segue suas orientações. O protocolo foi validado em mais de 80 cães e 20 gatos. NOTA: tratamento de TEC consiste na administração de cisplatina ou bleomicina e exposição de nódulos tumorais a impulsos eléctricos. 1. Selecção do Paciente Nota: A selecção dos pacientes permite ao praticante determinar se o paciente é adequado ou não para beneficiar deste tratamento. <ol><li> Avaliar a história do paciente (dados gerais sobre a idade, raça, sexo e presença de quaisquer doenças concomitantes, tipo de tumor, a evolução do tumor com o tempo, tratamentos anteriores e seus resultados, a recorrência ea velocidade de reincidência, as expectativas do proprietário sobre o êxito da a terapia). </li><li> Realizar um exame físico do paciente <ol><li> Avaliar o tumor em pormenor, a fim de make um possível diagnóstico e diferenciado clínica realizar um aspirado de agulha fina para avaliação citologia e possível biópsia de tecido para avaliação histológica a fim de determinar a área de tratamento: se um tumor potencialmente invasoras é apresentado tratar as margens amplas (tomar a decisão sobre o tamanho da margens tratadas de acordo com as recomendações para qualquer outro tratamento para o mesmo tipo de tumor, por exemplo, tumor de células mastro 2R ≤ 1 cm, 1 cm de margem devem ser tratados; r - raio). </li><li> Avaliar o número e o tamanho dos nódulos, a fim de preparar uma abordagem de tratamento. </li></ol></li><li> exame geral <ol><li> Implementar um exame geral completo, a fim de fazer o estadiamento da doença e verificar: <ol><li> Se não houver nenhuma outra doença concomitante que poderia opõe-se o tratamento, se o paciente tem uma história de qualquer infecção crónica (de acordo com a epidemiologia de uma certa área) ou doença que possa alterar hematológica ou coagulat imunomediadamudanças iões (realizar os testes específicos), Se o animal é capaz de suportar uma série de sedations profundas e / ou anestesia geral, se o paciente tem sensibilidade a cisplatina (dose padrão é de 60-70 mg / m 2 de superfície corporal / 21 d) ou bleomicina ou já recebeu uma dose cumulativa de bleomicina superior a 400.000 UI / m 2. </li></ol></li><li> Use técnicas de diagnóstico por imagem (radiografia do tórax e ultra-som exame do abdome), a fim de verificar quaisquer metástases possíveis de acordo com o tipo de tumor. </li></ol></li></ol> 2. Laboratório de Análise <ol><li> Trabalho sangrento <ol><li> Realizar hematologia completa analisa com um painel de bioquímica de azoto da ureia no sangue (BUN), creatinina, alanina-aminotransferase (ALT), fosfatase alcalina (FA) e cálcio para excluir doenças renais ou hepáticas crónicas avançadas e possíveis síndromes paraneoplásicos mais frequentes, a fim de determinar a fase clínica, que possa ter um effect no prognóstico. </li><li> Fazer uma análise de sangue específico adicional: <ol><li> Se o paciente é dado qualquer medicamento que poderia potencialmente alterar mudanças na capacidade de coagulação, verifique o perfil de coagulação. </li><li> Se estiver usando tratamento invasivo (eletrodos de agulha), verifique o número de plaquetas; o número de plaquetas deve ser&gt; 100 ou no caso, é &lt;100, o perfil de coagulação (PT, APTT, fibrinogénio, dímero-D) deve ser normal. </li><li> Em casos específicos, de acordo com a doença neoplásica e o estado clínico do paciente verificar as proteínas totais, albumina, fosforescentes, sódio (Na), potássio (K), cloro (Cl) e concentração da lipase. </li></ol></li></ol></li><li> Tumor (s) de análise histológica <ol><li> Histologia análise não é necessário se o diagnóstico citológico foi realizada anteriormente. No caso de certos tipos de tumores em que o grau histológico é um factor importante de prognóstico (por exemplo, mastócitos tumores) executar hematoxilina e eosina STAining 16. NOTA: A biópsia (incisional ou &quot;punch&quot;) pode ser feita antes ECT durante a mesma visita. Em qualquer caso, é uma boa prática clínica para diagnosticar o tipo de tumor. NOTA: Depois que o caso é completamente avaliada uma discussão aprofundada e clarificação com o dono do animal é necessário. Explicar ao proprietário que a ECT é eo que poderia ser esperado de ECT em termos de resultados clínicos. Discutir com o proprietário o curso do tratamento: o número de sessões de ECT sob anestesia geral ou sedação profunda, a duração total do tratamento, custo do tratamento, as possibilidades de recorrência. Obter o consentimento por escrito do proprietário, no caso da inclusão do paciente dentro de um ensaio clínico de ECT, se o paciente é realmente elegíveis. </li></ol></li></ol> 3. Escolha da modalidade de tratamento NOTA: Para ECT em cães usar cisplatina e bleomicina. Para ECT em gatos usar bleomicina apenas, como a cisplatina é contra-indicado em gatos. <ol><li&gt; Trate cada tumor separadamente. Determinar a localização eo tamanho de cada nódulo e o número de nódulos de delinear o protocolo de tratamento. </li><li> Calcular o volume de nódulos de tumor utilizando a fórmula V = ab²π / 6 ( &quot;a&quot; é o maior diâmetro do nódulo de tumor e &quot;b&quot; o diâmetro do nódulo tumoral perpendicular ao &quot;A&quot;) ou V = abcπ / 6 ( &quot; um &quot;,&quot; b &quot;e&quot; c &quot;são de três diâmetros perpendiculares do nódulo de tumor). </li></ol> 4. escolha da modalidade de operação <ol><li> Selecção dos eléctrodos NOTA: É importante escolher o tipo de eletrodo ideal como a configuração do eletrodo afeta a distribuição do campo eléctrico no tecido. Dois tipos de eléctrodo são utilizados: eléctrodos de placa e agulha. eléctrodos de placa têm placas de aço inoxidável paralelos: a distância entre os eléctrodos interior depende do tamanho do tumor e a capacidade do gerador de impulsos eléctricos. Geralmente, a distância sejatre os eletrodos é de 6-8 mm. eléctrodos de agulha podem ser dispostos em linhas (matriz paralela) ou no geometria hexagonal. O eléctrodo sextavado tem uma agulha central e 6 agulhas em disposição circular. Os pulsos são aplicados entre os eletrodos na matriz circular e entre estes e o central. Os impulsos são aplicados em ambos os sentidos, entre cada par de eléctrodos. Escolha do tipo de eléctrodo de acordo com a profundidade do nódulo de tumor e fornecem electroporação apropriada no conjunto desejado área tratada. Escolha os eléctrodos de acordo com o tecido alvo particular. Em geral, ambos os tipos de eléctrodos podem ser utilizados para o tratamento. </li><li> Selecção e preparação de cisplatina ou bleomicina NOTA: ECT consiste na administração intratumoral de cisplatina ou bleomicina ou a administração intravenosa de bleomicina e exposição de nódulos tumorais a impulsos eléctricos. <ol><li> Seleccione um citostático apropriado e a rota de sua administração. </li><li> dissolver cisplatin (cis-diaminodicloroplatina II), se a forma de um pó, em água destilada a uma concentração de 1 mg / ml (de outra forma farmaceuticamente poderiam ser utilizadas soluções preparadas). Dê cisplatina intratumoral. </li><li> Dissolver bleomicina numa solução salina fisiológica a uma concentração de 3 mg / ml, e dar por via intravenosa, intratumoral ou. </li></ol></li><li> Anestesia NOTA: Dependendo modalidade de funcionamento (Tabela 1) sedação profunda ou anestesia geral pode ser usado. <ol><li> Avaliar o paciente de acordo com a Sociedade Americana de Anestesiologia &#39;(ASA) de classificação de estado físico e de acordo com o tipo de tumor devido a possíveis síndromes paraneoplásicas. </li></ol></li><li> sedação profunda <ol><li> Use medetomidina (0,08 mg / kg) ou medetomidina combinação dupla (0,025 mg / kg) com tartarato de butorfanol (0,1 mg / kg) em cães ou siga os procedimentos padrão para a sedação profunda no hospital específico. </li></ol></li><li> Anestesia geral <ol> &lt;li&gt; Premedicate com acepromazina (0,02 mg / kg) e metadona (2 mg / kg). </li><li> Trinta minutos mais tarde induzir anestesia geral com tiopental (5 mg / kg) ou de propofol (1 mg / kg). </li><li> Coloque tubo endotraqueal e manter a anestesia com isoflurano em oxigênio fornecido através de um circuito anestésico T-peça. </li><li> Durante a anestesia usar o tratamento suporte fluido com solução de Hartmann, a uma taxa de 10 ml / kg / h e a analgesia com uma única dose de um fármaco analgésico não esteróide (por exemplo, carprofeno 2-4 mg / kg). </li><li> Use pomada para evitar a secura e sob anestesia. Após o tratamento, supervisionar o paciente até que ele recupera a consciência suficiente para decúbito esternal. Manter o paciente na clínica para cerca de 2 a 4 horas. NOTA: Os procedimentos padrão para anestesia geral no Hospital específica também pode ser seguido. </li></ol></li><li> Ambiente operacional NOTA: O pessoal que opera são treinados operadores ECT (DVM), anestesistas e assistentes. <ol><li&gt; Use qualquer sala de ambulância quando ECT sob sedação profunda é executado ou qualquer sala de cirurgia, onde a anestesia geral é permitido. </li><li> Para sedação e / ou o uso de anestesia geral todos os equipamentos necessários de acordo com os procedimentos de anestesia. </li><li> Para o procedimento ECT ver todos os materiais necessários na Lista de Materiais. </li></ol></li><li> Operador e pessoal em torno protecção NOTA: A exposição Gota da pele aos fármacos antineoplásicos raramente causa problemas agudos. Cisplatina e bleomicina não são absorvidos através da pele intacta. Cisplatina pode causar irritação única. Cisplatina e bleomicina vazamento pode ocorrer quando se injecta nódulos ou tumores firmes. Em caso de ferimento por agulha, lavar com abundância de água e cuidar da ferida de acordo com a prática médica padrão. <ol><li> Proteger o operador e assistentes circundantes com máscaras e luvas. Em caso de exposição da pele à cisplatina ou solução de bleomicina, lavar imediatamente e abundantemente com água. </li&gt; <li> Estabelecer medidas de biossegurança de acordo com um programa de seguro de qualidade que cumpra com os regulamentos locais sobre o uso de drogas anticâncer, se houver. </li></ol></li><li> Geradores de pulsos eléctricos NOTA: Aplicações de pulsos eléctricos pode ser levada a cabo com o gerador de impulsos eléctricos. Comumente, o aparelho é um gerador de pulso de onda quadrada com software integrado e uma interface touch-screen para selecionar pulsos elétricos pré-concebidos. É equipado com um suporte de eletrodo de mão com um botão de ativação de pulso ligado ao gerador por um cordão. A entrega de impulsos eléctricos pode ser controlada por um interruptor de pé. O gerador de pulsos elétricos devem cumprir as normas da União Europeia: 2006/95 / CE a partir de 12/12/2006 relativa a material eletrônico usado dentro de limites específicos de voltagem, 2004/108 / CE a partir de 2004/12/15 tocante à compatibilidade electromagnética e deve ser compatível com os regulamentos da FDA. </li><li> Procedimento de aplicação de pulsos eléctricos NOTA: The aplicação de pulsos eléctricos segue a administração intratumoral de cisplatina ou bleomicina, ou administração intravenosa de bleomicina. Quando a administração intratumoral citostático deve ser aplicada lentamente para evitar fugas. Para administração por via intravenosa citostáticos deve ser aplicada na forma de bolus duração de aproximadamente 30 seg. Um gel à base de água é usado para obter um bom contacto entre a pele e os eléctrodos, qualquer placa ou agulha, e para alcançar uma distribuição de campo eléctrico menos heterogénea. A condutividade dos geles deverá estar compreendida entre 0,5 e 1 m / S 17,18. A condutividade elétrica do gel utilizado foi de 0,5 S / m. Os eléctrodos de placa deve ser colocada de tal forma que o tumor é englobado entre eles. Além disso, para conseguir uma melhor distribuição do campo eléctrico a aplicação de pulsos eléctricos devem ser realizadas duas vezes numa direcção perpendicular. Se o tumor é maior do que a distância entre os eléctrodos, a aplicação de eléctrodos devem estrelaT a partir das margens do tumor (incluindo a margem de segurança) e progresso para o centro do tumor. No caso de eléctrodos de agulha, deve ser tomado cuidado para que todas as agulhas são inseridas no tecido para atingir a distribuição apropriada do campo eléctrico. Não é necessária a aplicação de um gel. De outro modo, o procedimento é o mesmo como no caso de eléctrodos de placa. <ol><li> Depilar a pele na zona de aplicação de pulsos eléctricos </li><li> Administrar cisplatina ou bleomicina. Se citostático é administrado por via intravenosa esperar durante 8 min e o intervalo de tempo para entrega impulsos eléctricos é de 20 min. Se citostático é administrado intratumoralmente começar com a aplicação de pulsos eléctricos imediatamente (dentro de 1 min após a injecção). </li><li> Antes da aplicação de pulsos eléctricos aplicar um gel à base de água sobre a pele depilada. </li><li> Para eléctrodos placa usar esses parâmetros de pulso: duração do pulso de 100 ms, amplitude ao eléctrodo relação de distância de 1.300 V /cm, frequência de 1 Hz e 5 kHz. Entregar cada execução de 8 pulsos elétricos unipolares em dois trens de quatro pulsos, com um intervalo de segundos, em duas direcções perpendiculares. </li><li> Para eletrodos de agulha com linhas usar parâmetros de pulso: duração do pulso de 100 ms, amplitude ao eléctrodo relação de distância de 1.000 V / cm, frequência 1 ou 5 kHz. Cada execução de pulsos elétricos unipolares consiste em oito pulsos. </li><li> Para eletrodos de agulha, organizar em uma parâmetros de configuração e de pulso uso hexagonais: duração do pulso de 100 ms; o eléctrodo sextavado tem uma voltagem fixa de 730 V (se a distância entre os eléctrodos é de 7 mm, 1040 V / cm), com uma frequência de 5 kHz e o número de pulsos depende do número de agulhas. No caso de 7 agulhas 24 são aplicados pulsos </li></ol></li><li> Descarte de material contaminado. <ol><li> Elimine todos os materiais contaminados (seringas, agulhas, frascos, gazes, luvas) em um recipiente destinado à incineração. </li></ol></li></ol> NOTA: Em cada visita, nódulos tumorais são medidos de uma craveira e fotografada. Estas visitas também servem para avaliar os possíveis efeitos colaterais locais e sistêmicos. A resposta ao tratamento é pontuada após 4 semanas com base nos critérios de &quot;critérios de avaliação da resposta em tumores sólidos&quot; (RECIST) 19 como uma resposta completa (RC) - desaparecimento do nódulo, resposta parcial (PR), - pelo menos um 30% diminuir na soma dos diâmetros da lesão alvo, tomando como referência os diâmetros de base soma, doença progressiva (PD) - pelo menos um aumento de 20% na soma dos diâmetros das lesões alvo, tomando como referência o menor soma a ser estudada, doença estável (SD) - nem um encolhimento suficiente para se qualificar para o PR, nem um aumento suficiente para se qualificar para PD, tomado como referência os menores diâmetros de soma. Para todas as definições de resposta é exigida uma duração mínima de 4 semanas para qualifying cada tipo de resposta. tempo de observação é calculado como o intervalo entre a data do primeiro tratamento e a data da última análise do paciente. Os possíveis efeitos secundários são determinados de acordo com a escala de toxicidade Cooperative Oncology Group Veterinária (VCOG - CTCAE) 20 em cada exame de acompanhamento. <ol><li> Programar um compromisso 1 semana após a terapia. Programar um compromisso 2 semanas após a terapia. Agende uma consulta 4 semanas após a terapia. Após 4 semanas agendar uma consulta uma vez por mês. </li></ol>

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<li>Soden, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+application+of+targeted+electrochemotherapy+using+novel+flexible+electrodes+and+low+dose+bleomycin+to+solid+tumours%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Successful application of targeted electrochemotherapy using novel flexible electrodes and low dose bleomycin to solid tumours.</a> Cancer Lett. 232 (2), 300-310 (2006).</li>
<li>Cemazar, M., Avgustin Ambrozic, J., Pavlin, D., Sersa, G., Poli, A., Krhac Levacic, A., Tesic, N., Lampreht Tratar, U., Rak, M., Tozon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+and+safety+of+electrochemotherapy+combined+with+peritumoral+IL-12+gene+electrotransfer+of+canine+mast+cell+tumours%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Comp+Oncol%22%5BJournal%5D)">Efficacy and safety of electrochemotherapy combined with peritumoral IL-12 gene electrotransfer of canine mast cell tumours.</a> Vet Comp Oncol. , (2016).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

Eletroquimioterapia provou ser altamente eficaz contra tumores ou metástases primários diferentes em cães e gatos. Eletroquimioterapia pode ser usado com finalidade curativa de nódulos de tumor cutâneo ou subcutâneo solitárias ou múltiplas, ou como um tratamento adjuvante para a cirurgia. O tratamento padrão para a escolha de vários tumores em cães, incluindo os tumores de células mastro, é a excisão cirúrgica do tumor. Um estudo que comparou a cirurgia como um tratamento padrão para a ECT no tratamento de tumores de células mastro em cães demonstraram que o tratamento com a ECT resultou em 70% de respostas completas durante a cirurgia resultou em 50% de respostas completas 11 demonstra que a ECT é um tratamento equivalente a cirurgia. Para a eficácia antitumor acentuada da ECT duas condições têm de ser cumpridas, que são passos críticos no âmbito do protocolo. O primeiro é a administração de citostáticos. A presença da droga nos tecidos alvo determina a eficiência ECTcomo o fármaco deve estar presente no interior das células a fim de matá-los. Ao injetar a droga intratumoral, o sinal de boa retenção de tecido é de branqueamento de tecidos. Além disso, algum vazamento de solução após a administração pode ocorrer através dos orifícios produzidos pela agulha no tumor ou no necrosante tecidos durante mais sessões de ECT. Assim, atingindo 1 mg / cm 3 (cisplatina) ou 3000 IU / cm3 (bleomicina), as concentrações, em seguida, poderia ser puramente teórico nesses casos, no entanto, o objectivo é o de tentar manter o máximo possível solução nos tecidos alvo. Além disso, os impulsos eléctricos, deve ser aplicado o mais rapidamente possível, a fim de obter um efeito vasoconstritor que contribui para a retenção de solução. Duas vias diferentes de administração pode ser usado com a ECT: intratumoral e intravenosa. A eficácia antitumoral da cisplatina ECT com bleomicina intratumoral ou bleomicina ou com intravenosa ao passo que 21 é comparável ELEctrochemotherapy com a aplicação intravenosa de cisplatina é menos eficaz 22, portanto, a cisplatina só é usado na administração intratumoral. Outra característica importante da droga cisplatina é que a sua utilização em gatos é contra-indicada como a cisplatina tem sido mostrado para ser altamente tóxico em gatos 23. Se o paciente tiver um ou apenas alguns nódulos, em seguida, uma via intratumoral é recomendado. Se o número de nódulos excede ~ 5 nódulos, em seguida, uma via intravenosa é recomendada. injecção intratumoral de cisplatina tem alguma eficácia anti-tumoral, mesmo sem a aplicação de pulsos eléctricos, enquanto bleomicina, devido ao seu alto carácter hidrófilo, não o faz. Portanto, a cisplatina é a primeira droga de escolha se a aplicação intratumoral é possível em cães. Isto é importante porque a segunda condição de que devem ser cumpridos para a acção anti-tumoral eficaz de ECT e que é a cobertura de todo o tumor com um campo eléctrico suficientemente elevado. Para obter o aumento em célulaspermeabilização da membrana, o campo eléctrico induzido no interior do tecido deve ser superior a um certo limiar. A distribuição do campo eléctrico no tecido depende dos eléctrodos, por conseguinte, é importante que tipo de eléctrodos são utilizados. Placa ou eletrodos matriz paralela pode ser usado com segurança para pequenos tumores superficiais 24. Se os tumores são mais espessas e maiores, eletrodos hexagonais são mais adequados. Um facto importante é que a aplicação dos impulsos eléctricos pode ser repetido, de modo que a área do tumor conjunto é coberto, incluindo as margens de segurança. Desde impulsos eléctricos causar bloqueio vascular, a sua aplicação deve começar a partir da borda do tumor, para o seu centro. Actualmente, a limitação da técnica é a disponibilidade dos eléctrodos o que impede o tratamento de tumores profundos. No entanto, a configuração dos eléctrodos é uma característica tecnológica que é rápido desenvolvimento e agora diferentes conjuntos de eléctrodos são utilizados fou administrações específicas longo agulha eletrodos individuais para metástases de tumores colorretais no fígado 25, metástases ósseas 7, sarcoma de tecido mole 26, eletrodos endoluminais para colorectal, gástrico e tumores de esôfago 27 e expansíveis &#39;&#39; guarda-chuva &#39;&#39; eletrodos tipo de tumores cerebrais 8 . ECT pode ser eficaz uma vez que apenas um tratamento de uma só vez, mas, no caso de falha ou resposta parcial do tumor pode ser repetido várias vezes, com eficácia melhorada. ECT é um tratamento ablativo local. A sua eficácia local é até 80% do controle local do tumor, mas sem um efeito perceptível sobre metástases à distância 7, que é outra limitação da terapia. Portanto, para obter uma resposta sistémica, a ECT poderia ser combinada com outras terapias. Recentemente, propusemos combinando ECT com outra aplicação biomédica de eletroporação, ou seja, electrotransfer gene da Molec imunomoduladorule interleucina-12 (IL-12), que é conhecido pela sua actividade anti-tumoral. Combinação de ECT e electrotransferência gene com IL-12 já foi mostrado ser uma terapia combinada seguro, sem efeitos secundários e bom local do tumor com alta taxa de resposta completa 28, que também impediu a recorrência de metástases distantes. Em conclusão, as vantagens de electroquimioterapia são a sua simplicidade, a curta duração de sessões de tratamento, doses baixas citostáticos e efeitos secundários insignificantes. Além disso, é realizada em ambulatório, portanto, os pacientes não têm que ficar no hospital. Hoje em dia, a disponibilidade de diferentes geradores de impulsos elétricos no mercado está a aumentar, levando também para a redução do preço dos geradores, sem perda de confiabilidade e tornando Eletroquimioterapia ainda mais acessível. Estes devem todos conduzir a uma maior utilização desta terapia em medicina veterinária.

ECT é uma técnica ablativa local para o tratamento de tumores de diferentes histologias. resultados de ablação entre a morte celular induzida por um fármaco, o que é um resultado do aumento da acumulação do fármaco nas células devido à permeabilidade da membrana celular alterada induzida por entrega directa de impulsos eléctricos sobre a pele em torno do tumor depois da injecção intratumoral ou intravenosa da droga. O principal mecanismo de ECT é aumentar a eficácia dos fármacos citostáticos pelo aumento da acumulação do fármaco intracelular, por electropermeabilização membrana celular (eletroporação) 1,2. A electroporação provoca um aumento da absorção de drogas de dois citostáticos: bleomicina e cisplatina, que são drogas hidrofílicas, com permeabilidade de membrana pobre. Devido ao aumento da citotoxicidade de bleomicina e cisplatina no local da aplicação do impulso eléctrico, doses baixas de drogas são necessários para uma boa eficácia antitumoral e, consequentemente, nenhuma ou mínima de efeitos secundários sistémicos das drogas são observed 3. Outra característica da ECT é um efeito antivascular tumor que resulta, em primeiro lugar no bloqueio vascular, isto é., Diminuição do fluxo de sangue no interior do tumor e, consequentemente, a retenção de citostáticos no seu interior e em segundo lugar num vascular perturbar acção, isto é., Morte directa de células endoteliais de pequenos vasos sanguíneos que conduz à morte das células tumorais secundárias 4-6. O terceiro mecanismo da eficácia antitumoral ECT é a activação do sistema imunitário como ECT induz uma resposta imunitária pelo antigénio tumoral derramamento no ambiente do tumor. O envolvimento do sistema imunológico é crucial para a erradicação completa do tumor 7. ECT tem demonstrado um grande potencial em oncologia humana, onde TCE já é utilizado como um tratamento padrão para tumores cutâneos e subcutâneos, uma vez que apresenta até 80% de respostas objectivas 3. Além disso, a ECT é utilizado em vários estudos clínicos tratar metástases de tumor no cérebro <saté&gt; 8, osso 9 e fígado 10. Estudos clínicos em oncologia veterinária já demonstraram que o tratamento ECT resulta em até 80% de longa duração respostas objetivas no tratamento de tumores cutâneos e subcutâneos em cães 11, 12, 13 gatos e cavalos 14. A eficácia anti-tumoral é dependente do tamanho do tumor e os tumores menores que 2 cm3 responder melhor do que os tumores maiores 15. Além disso, um estudo comparando a cirurgia com ECT no tratamento de tumores de células mastro em cães demonstraram que o tratamento com a ECT resultou em 70% de respostas completas durante a cirurgia resultou em 50% de respostas completas 11 demonstra que a ECT é um tratamento equivalente a cirurgia. Além disso, a ECT é um método alternativo para o tratamento de tumores sólidos ao tratamento cirúrgico, especialmente nos casos em que os proprietários não concorda com cirurgia ou se os tumores são difíceis de impostos especiais de consumo com margens claras principalmente devido à sualocal (por exemplo, infiltração de grandes vasos, tumores da cabeça ou da perna, na região anal, etc.). O objetivo deste trabalho é definir os procedimentos operacionais da ECT dando instruções para o uso de cisplatina e bleomicina em combinação com a aplicação de pulsos elétricos a fim de tratar de forma segura e adequada tumores cutâneos e subcutâneos em cães e gatos.

<table><tbody><tr><td>Cisplatina Kobi</td><td>Fresenius Kobi Oncologia, Hampshire, Grã-Bretanha</td><td></td><td>medicamento citostático</td></tr><tr><td>Bleomicina PCH</td><td>Pharmachemie BV, Haarlem,</td><td>medicamento citostático</td>holandês <td></td></tr><tr><td>AquaUltra Basic</td><td>Ultragel, Budapeste, Hungria</td><td></td><td>gel à base de água&nbsp;</td></tr><tr><td>Eletropulsador ELECTROvetS13&nbsp;</td><td>Gerador de pulso de onda quadrada</td> <td>Leroy biotech, Toulouse, França</td><td></td></tr></tbody></table>

procedimentos operacionais da eletroquimioterapia para tratamento do tumor em cães e gatos

Operating Procedures of the Electrochemotherapy for Treatment of Tumor in Dogs and Cats

Electroquimioterapia (ECT) é uma abordagem de local, que é utilizado para o tratamento de tumores sólidos de diferentes histologias. O seu mecanismo baseia-se na permeabilização da membrana celular por meio de &quot;electroporação&quot;. Para atingir o &quot;electroporação&quot; das células, impulsos eléctricos são gerados por um gerador e entregue ao tecido alvo através da utilização de eléctrodos. A electroporação é um método físico, que é utilizada para introduzir moléculas, como fármacos citostáticos, nas células que não pode atravessar a membrana celular por conta própria. Em electroquimioterapia, actualmente, cisplatina e bleomicina são utilizados clinicamente. Eficácia antitumoral Eletroquimioterapia é alta, por exemplo até 100% de resposta completa de mastócitos canino tumores menores que 2 cm 3 foi conseguida. Além disso, electroquimioterapia pode ser utilizado para o tratamento de tumores inoperáveis. Uma das características importantes de electroquimioterapia é que ele pode ser eficaz como um tratamento de uma só vezsó. No entanto, no caso de falha ou resposta parcial do tumor pode ser repetido várias vezes com igual ou maior eficácia. Eletroquimioterapia já é um tratamento padrão para tumores cutâneos e subcutâneos de vários histologias em oncologia humana e veterinária. Além disso, vários estudos clínicos que exploram Eletroquimioterapia para tumores profundos estão em curso.

O caso apresenta um tumor de mastócitos localizados na pálpebra de um cão. O paciente foi tratado com cisplatina intratumoral-injetado e a aplicação de 8 pulsos elétricos através de eletrodos de placas. O tamanho do tumor era de 5 mm. Devido à área de localização sensível a anestesia geral do tumor foi usado. De acordo com o tamanho do tumor 0,5 ml (0,5 mg) de cisplatina foi injectado intratumoral. Um minuto após a injecção de impulsos eléctricos foram aplicadas utilizando um eléctrodo de placa de 8 mm. Apenas uma série de pulsos elétricos foi aplicado. Após o tratamento o paciente foi supervisionado até que ele recuperou a consciência suficiente. O paciente foi liberado depois de duas horas. Depois de uma semana o paciente veio para um check-up regular. O tumor ulcerada ea área ao redor do tumor foi ligeiramente inchado. O tumor foi medido por Vernier paquímetro e fotografada. Um mês após o tratamentt nenhuma evidência do tumor foi anotada. A ferida foi fechada com cicatriz e alopecia foi observada no local de tratamento. Após o tratamento o cão não mostraram quaisquer sinais de dor, a função da pálpebra foi preservada durante todo o período de cicatrização e os efeitos cosméticos após o tratamento são excelentes. <img alt="figura 1" src="/files/ftp_upload/54760/54760fig1.jpg" /> Figura 1. Eletroquimioterapia tratamento. A figura mostra o cão antes do tratamento (A), uma semana (B), um mês (C) e três meses após o tratamento (D). Tumor de células (A) de mastro na pálpebra inferior. O cão do pugilista alemão 2,5 anos com um tamanho de tumor de 5 mm antes da terapia. (B) Depois da terapia do tumor começou a ulceração e o tecido circundante da área electroporação tornou-se ligeiramente inchada. dois nósEKS após a terapia de uma crosta formada no local do tumor e caiu fora (não mostrado). (C) Um mês após electroquimioterapia nenhuma evidência do tumor foi observada e Cicatrix com alopecia foi visto no local do tumor. (D) Três meses após a total reepitelização Eletroquimioterapia ocorridos no local do tumor. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54760/54760fig1large.jpg" target="_blank">Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td></td><td colspan="2"> modalidade de operação (OM) </td></tr><tr><td> Número, volume e localização de nódulos tumorais </td><td> UMA </td><td> B </td></tr><tr><td> 1 - 3 nódulos &lt;1 cm da pele e tumores orais </td><td> √ </td><td></td></tr><tr><td> &gt; 3 nódulos, qualquer pele volume e tumores orais cabeça </td><td></td><td> √ </td&gt; </tr><tr><td> qualquer número, qualquer volume de pele e tumores orais cabeça </td><td></td><td> √ </td></tr></tbody></table> Tabela 1. Selecção da modalidade de funcionamento baseia-se no número de nódulos de tumor e o seu tamanho sedação profunda = OM A.; A anestesia geral = OM B. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Quimioterápico droga / tamanho do tumor </td><td> aplicação intratumoral </td><td> aplicação intravenosa </td></tr><tr><td> Dose de cisplatina (1 mg / ml) &lt;1 cm3 </td><td> 1 ml (1 mg) / cm 3 de tumor </td><td></td></tr><tr><td> Dose de cisplatina (1 mg / ml)&gt; 1 cm3 </td><td> 0,5-1 ml (0,5-1 mg) / cm 3 de tumor </td><td></td></tr><tr><td> Dose de bleomicina (3000 UI / ml) &lt;1 cm3 </td><td> 0,5 ml (1,500 IU) / cm 3 de tumor </td><td> 300 UI / kg </td></tr><tr><td> Dose de bleomicina (3000 UI / ml)&gt; de 1 cm3 </td><td> 0,5 - 1 ml (1,500-3,000 IU) / cm 3 de tumor </td><td> 300 UI / kg </td></tr></tbody></table> Tabela 2. O volume de injecção apropriada de citostáticos de acordo com a via de administração e o tamanho do tumor em cães. <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Quimioterápico droga / tamanho do tumor </td><td> aplicação intratumoral </td><td> aplicação intravenosa </td></tr><tr><td> Dose de bleomicina (3000 UI / ml) &lt;1 cm3 </td><td> 0,5 ml (1,500 IU) / cm 3 de tumor </td><td> 300 UI / kg </td></tr><tr><td> Dose de bleomicina (3000 UI / ml)&gt; de 1 cm3 </td><td> 0,5 - 1 ml (1.500 - 3.000 UI) / cm 3 de tumor </td><td> 300 UI / kg </td></tr></tbody></table>Tabela 3. O volume de injecção apropriada de citostáticos de acordo com o tamanho do tumor em gatos.

A eletroquimioterapia é o tratamento local de tumores sólidos. O principal mecanismo é a permeabilização mediada por eletroporação da membrana das células tumorais, que permite maior internalização de citostáticos como bleomicina e cisplatina. Assim, a eficácia antitumoral é potencializada no local da aplicação de pulsos elétricos nos tumores.

Procedimentos Operacionais da Eletroquimioterapia para tratamento do tumor em cães e gatos

Electrochemotherapy (ECT) is a local approach which is used for treating solid tumors of different histologies. Its mechanism is based on cell membrane ...

O objetivo geral deste procedimento é tratar tumores cutâneos e subcutâneos em cães e gatos com o uso de fármacos citostáticos em combinação com a aplicação de pulsos elétricos. A eletroquimioterapia é uma abordagem local utilizada para o tratamento de tumores sólidos de diferentes histologias. Seu mecanismo baseia-se na permeabilização da membrana celular por meio da eletroporação.O principal mecanismo da eletroquimioterapia é aumentar a eficácia de fármacos quimioterápicos por meio da eletropermeabilização, o que aumenta a acumulação intracelular do medicamento. A eletroporação provoca uma maior captação de dois agentes quimioterápicos, bleomicina e cisplatina, que são fármacos hidrofílicos com baixa permeabilidade à membrana. O caso apresentado mostra o procedimento de tratamento para um cão boxeador alemão com um tumor de mastócito diagnosticado na pálpebra inferior.Podem ser utilizadas duas vias diferentes de administração na eletroquimioterapia: intratumoral e intravenosa. O cisplatina pode ser administrado por via intratumoral, enquanto a bleomicina pode ser administrada por via intratumoral ou intravenosa. As concentrações dos fármacos são baixas, sem efeitos colaterais sistêmicos.A aplicação de pulsos elétricos pode ser realizada com qualquer gerador de pulsos elétricos que produza pulsos elétricos em onda quadrada de amplitude e duração apropriadas e com frequência adequada. O gerador utilizado para a confecção deste vídeo possui um software integrado e uma interface de tela sensível ao toque para selecionar pulsos elétricos pré-definidos. Ele é equipado com um suporte manual para eletrodos, contendo um botão ativador de pulso conectado ao gerador por meio de um cabo.Os pulsos elétricos são acionados por um pedal. Ao injetar a droga intratumoralmente, o sinal de boa retenção tecidual é o embranquecimento do tecido. Observe o vazamento da droga que pode ocorrer durante a injeção intratumoral.Os pulsos elétricos devem ser aplicados o mais rapidamente possível para obter o efeito vasoconstritor, que contribui para a retenção da solução medicamentosa injetada. Um bom contato entre os eletrodos e a pele é muito essencial, o que pode ser garantido pela depilação e aplicação de gel à base de água quando são utilizados eletrodos de placa. Os pulsos elétricos são administrados por meio de eletrodos que podem ter diferentes configurações.Podem ser usados eletrodos em placa ou em forma de agulha. A escolha depende da localização, tamanho e espessura do tumor. Neste caso, foram utilizados eletrodos de aço inoxidável não invasivos em placa, com uma distância de sete milímetros entre os eletrodos.Os parâmetros dos pulsos elétricos em onda quadrada são definidos na tela sensível ao toque. Outra característica da eletroquimioterapia é a indução de um bloqueio vascular, ou seja, a diminuição do fluxo sanguíneo dentro do tumor, e, consequentemente, a retenção dos fármacos quimioterápicos no seu interior, o que pode ser visto como uma isquemia leve e breve. Consequentemente, devido ao efeito disruptor vascular, a possível hemorragia do tumor tratado é prevenida.Exame inicial é recomendado após uma semana para avaliar possíveis efeitos colaterais locais e sistêmicos. Após uma semana, o tumor apresentou ulceração e a área ao redor do tumor estava levemente inchada. A consulta de acompanhamento após um mês serve como avaliação da resposta ao tratamento.A resposta ao tratamento depende da diferença no volume do tumor. Portanto, os nódulos tumorais são medidos com paquímetro Vernier e fotografados. Após quatro semanas, nenhuma evidência do tumor foi observada.O ferimento foi fechado, e observou-se cicatriz com alopecia no local do tratamento. Após o tratamento, o cão não apresentou dor, a função da pálpebra foi preservada durante todo o período de cicatrização, e os efeitos cosméticos após o tratamento são excelentes. A eletroquimioterapia pode ser aplicada em nódulos tumorais cutâneos ou subcutâneos solitários ou múltiplos, com intenção curativa ou como tratamento adjuvante à cirurgia.A eletroquimioterapia é eficaz como tratamento único, mas, em caso de falha ou resposta tumoral parcial, pode ser repetida várias vezes com eficácia melhorada. Em conclusão, as vantagens da eletroquimioterapia são sua simplicidade, curta duração das sessões de tratamento, baixas doses de quimioterápicos e efeitos colaterais insignificantes. Além disso, é realizada em regime ambulatorial.Portanto, os pacientes não precisam ficar no hospital.

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Research

JoVE Journal

Cancer Research

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