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Imunocoramento Secções biocitina-preenchidos e processados ​​para neuroquímicos Markers
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JoVE Journal Neuroscience
Immunostaining of Biocytin-filled and Processed Sections for Neurochemical Markers

Imunocoramento Secções biocitina-preenchidos e processados ​​para neuroquímicos Markers

Full Text
23,920 Views
08:54 min
December 31, 2016

DOI: 10.3791/54880-v

Bogumila Swietek1, Akshay Gupta2, Archana Proddutur2, Vijayalakshmi Santhakumar2

1Graduate School of Biomedical Sciences,Rutgers New Jersey Medical School, 2Department of Pharmacology, Physiology and Neuroscience,Rutgers New Jersey Medical School

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este protocolo apresenta um método para a recuperação morfológica dos neurónios durante patched registos electrofisiolicos utilizando biocitina de enchimento e de pós-processamento subsequente imuno-histoquímica. Mostramos que as seções encheu-biocitina grossas que estavam manchados e lamínulas pode ser restained com um segundo dia de anticorpos primários ou meses mais tarde.

O objetivo deste protocolo é apresentar um método eficiente para identificar neurônios corrigidos durante registros eletrofisiológicos usando biocitina e imunocoloração para recuperação da morfologia antes da recoloração com anticorpos específicos para determinar a identidade neuroquímica. Portanto, este método descreve um passo importante necessário para estudar a diversidade na estrutura e função neuronal. Isso é essencial para entender seu papel nas redes cerebrais.

A principal vantagem de usar técnicas de processamento sequencial é que ela elimina a perda de dados devido à incapacidade de recuperar a morfologia. Portanto, isso também ajuda a orientar os marcadores neuroquímicos a serem testados nessas células. Embora este método seja descrito para recuperação morfológica de células em seções espessas, ele também pode ser aplicado a seções finas e em amostras previamente coradas e montadas.

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