Name: O Colon-26 Carcinoma Tumor-rolamento Mouse como um modelo para o estudo do câncer caquexia (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-30T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 55 s
Description: Aprenda a executar o modelo Colon-26 in vivo em camundongos CD2F1 para estudar caquexia cancerosa. Este protocolo demonstra a implantação de tumores e o monitoramento da perda muscular progressiva.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Agradecemos a Richard Lieber e Shannon Bremner por sua macro e instruções ImageJ. Enquanto estava na Thomas Jefferson University, este trabalho foi apoiado pelo Departamento de Saúde da Pensilvânia CURE Grant TJU No. 080-37038-AI0801. Posteriormente, este estudo foi apoiado por uma doação à AB dos Institutos Nacionais de Saúde (R21CA190028) e por doações à TAZ dos Institutos Nacionais de Saúde (R01CA122596, R01CA194593), do IU Simon Cancer Center, da Fundação Lustgarten, da Fundação Lilly, Inc. e do IUPUI Pancreas Signature Center.

<ol><li>Tan, B., Fearon, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cachexia%3A+prevalence+and+impact+in+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Clin+Nutr+Metab+Care%22%5BJournal%5D)">Cachexia: prevalence and impact in medicine.</a> Curr Opin Clin Nutr Metab Care. 11, 400-407 (2008).</li>
<li>Aulino, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+cellular+and+physiological+characterization+of+the+cancer+cachexia-inducing+C26+colon+carcinoma+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+cancer%22%5BJournal%5D)">Molecular cellular and physiological characterization of the cancer cachexia-inducing C26 colon carcinoma in mouse.</a> BMC cancer. 10, 363(2010).</li>
<li>Bonetto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((STAT3+activation+in+skeletal+muscle+links+muscle+wasting+and+the+acute+phase+response+in+cancer+cachexia%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">STAT3 activation in skeletal muscle links muscle wasting and the acute phase response in cancer cachexia.</a> PloS One. 6, e22538(2011).</li>
<li>Bonetto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((JAK%2FSTAT3+pathway+inhibition+blocks+skeletal+muscle+wasting+downstream+of+IL-6+and+in+experimental+cancer+cachexia%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">JAK/STAT3 pathway inhibition blocks skeletal muscle wasting downstream of IL-6 and in experimental cancer cachexia.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 303, E410-E421 (2012).</li>
<li>Bonetto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deacetylase+inhibitors+modulate+the+myostatin%2Ffollistatin+axis+without+improving+cachexia+in+tumor-bearing+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Cancer+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Deacetylase inhibitors modulate the myostatin/follistatin axis without improving cachexia in tumor-bearing mice.</a> Current Cancer Drug Targets. 9, 608-616 (2009).</li>
<li>Acharyya, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+cachexia+is+regulated+by+selective+targeting+of+skeletal+muscle+gene+products%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Cancer cachexia is regulated by selective targeting of skeletal muscle gene products.</a> The Journal of Clinical Investigation. 114, 370-378 (2004).</li>
<li>Fearon, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Definition+and+classification+of+cancer+cachexia%3A+an+international+consensus%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Oncology%22%5BJournal%5D)">Definition and classification of cancer cachexia: an international consensus.</a> The Lancet Oncology. 12, 489-495 (2011).</li>
<li>Holecek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+wasting+in+animal+models+of+severe+illness%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Exp+Pathol%22%5BJournal%5D)">Muscle wasting in animal models of severe illness.</a> Int J Exp Pathol. 93, 157-171 (2012).</li>
<li>Acharyya, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dystrophin+glycoprotein+complex+dysfunction%3A+a+regulatory+link+between+muscular+dystrophy+and+cancer+cachexia%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Dystrophin glycoprotein complex dysfunction: a regulatory link between muscular dystrophy and cancer cachexia.</a> Cancer Cell. 8, 421-432 (2005).</li>
<li>Benny Klimek,, E, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+inhibition+of+myostatin-family+proteins+preserves+skeletal+muscle+in+mouse+models+of+cancer+cachexia%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+and+Biophysical+Research+Communications%22%5BJournal%5D)">Acute inhibition of myostatin-family proteins preserves skeletal muscle in mouse models of cancer cachexia.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 391, 1548-1554 (2010).</li>
<li>Pedroso, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation%2C+organomegaly%2C+and+muscle+wasting+despite+hyperphagia+in+a+mouse+model+of+burn+cachexia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cachexia%2C+Sarcopenia+and+Muscle%22%5BJournal%5D)">Inflammation, organomegaly, and muscle wasting despite hyperphagia in a mouse model of burn cachexia.</a> Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle. 3, 199-211 (2012).</li>
<li>Soda, K., Kawakami, M., Kashii, A., Miyata, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manifestations+of+cancer+cachexia+induced+by+colon+26+adenocarcinoma+are+not+fully+ascribable+to+interleukin-6%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+cancer%22%5BJournal%5D)">Manifestations of cancer cachexia induced by colon 26 adenocarcinoma are not fully ascribable to interleukin-6.</a> International journal of cancer. 62, 332-336 (1995).</li>
<li>Costelli, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IGF-1+is+downregulated+in+experimental+cancer+cachexia.+American+journal+of+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22Regulatory%2C+Integrative+and+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">IGF-1 is downregulated in experimental cancer cachexia. American journal of physiology.</a> Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 291, R674-R683 (2006).</li>
<li>Palus, S., Akashi, Y., von Haehling, S., Anker, S. D., Springer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+age+and+sex+on+disease+development+in+a+novel+animal+model+of+cardiac+cachexia%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">The influence of age and sex on disease development in a novel animal model of cardiac cachexia.</a> International Journal of Cardiology. 133, 388-393 (2009).</li>
<li>Norman, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+sexual+dimorphism+on+muscle+strength+in+cachexia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cachexia%2C+Sarcopenia+and+Muscle%22%5BJournal%5D)">Effect of sexual dimorphism on muscle strength in cachexia.</a> Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle. 3, 111-116 (2012).</li>
<li>Stephens, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+dimorphism+modulates+the+impact+of+cancer+cachexia+on+lower+limb+muscle+mass+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Nutrition%22%5BJournal%5D)">Sexual dimorphism modulates the impact of cancer cachexia on lower limb muscle mass and function.</a> Clinical Nutrition. 31, 499-505 (2012).</li>
<li>Cosper, P. F., Leinwand, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+causes+cardiac+atrophy+and+autophagy+in+a+sexually+dimorphic+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Cancer causes cardiac atrophy and autophagy in a sexually dimorphic manner.</a> Cancer Research. 71, 1710-1720 (2011).</li>
<li>Ullman-Cullere, M. H., Foltz, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+condition+scoring%3A+a+rapid+and+accurate+method+for+assessing+health+status+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Body condition scoring: a rapid and accurate method for assessing health status in mice.</a> Laboratory Animal Science. 49, 319-323 (1999).</li>
<li>Bonetto, A., Andersson, D. C., Waning, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+muscle+mass+and+strength+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Bonekey+Rep%22%5BJournal%5D)">Assessment of muscle mass and strength in mice.</a> Bonekey Rep. 4, 732(2015).</li>
<li>Minamoto, V. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+efficacy+and+decreased+systemic-effects+of+botulinum+toxin+A+injection+after+active+or+passive+muscle+manipulation%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Med+Child+Neurol%22%5BJournal%5D)">Increased efficacy and decreased systemic-effects of botulinum toxin A injection after active or passive muscle manipulation.</a> Dev Med Child Neurol. 49, 907-914 (2007).</li>
<li>Murphy, K., Lynch, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Update+on+emerging+drugs+for+cancer+cachexia%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Emerg+Drugs%22%5BJournal%5D)">Update on emerging drugs for cancer cachexia.</a> Expert Opin Emerg Drugs. 14, 619-632 (2009).</li>
<li>Seto, D. N., Kandarian, S. C., Jackman, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Key+Role+for+Leukemia+Inhibitory+Factor+in+C26+Cancer+Cachexia%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">A Key Role for Leukemia Inhibitory Factor in C26 Cancer Cachexia.</a> The Journal of Biological Chemistry. 290, 19976-19986 (2015).</li>
<li>Judge, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+identification+of+FoxO-dependent+gene+networks+in+skeletal+muscle+during+C26+cancer+cachexia%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">Genome-wide identification of FoxO-dependent gene networks in skeletal muscle during C26 cancer cachexia.</a> BMC Cancer. 14, 997(2014).</li>
<li>Kliewer, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+tissue+lipolysis+and+energy+metabolism+in+early+cancer+cachexia+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Biol+Ther%22%5BJournal%5D)">Adipose tissue lipolysis and energy metabolism in early cancer cachexia in mice.</a> Cancer Biol Ther. 16, 886-897 (2015).</li>
<li>Aversa, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+myostatin+signaling+in+non-weight-losing+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Changes in myostatin signaling in non-weight-losing cancer patients.</a> Ann Surg Oncol. 19, 1350-1356 (2012).</li>
<li>Bonetto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+changes+of+muscle+insulin-like+growth+factor-1+and+myostatin+gene+expression+in+gastric+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Early changes of muscle insulin-like growth factor-1 and myostatin gene expression in gastric cancer patients.</a> Muscle Nerve. 48, 387-392 (2013).</li>
<li>Lazarus, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+cancer+cachexia%3A+contribution+of+the+ubiquitin-proteasome+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">A new model of cancer cachexia: contribution of the ubiquitin-proteasome pathway.</a> The American Journal of Physiology. 277, E332-E341 (1999).</li>
<li>al-Majid, S., McCarthy, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resistance+exercise+training+attenuates+wasting+of+the+extensor+digitorum+longus+muscle+in+mice+bearing+the+colon-26+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Res+Nurs%22%5BJournal%5D)">Resistance exercise training attenuates wasting of the extensor digitorum longus muscle in mice bearing the colon-26 adenocarcinoma.</a> Biol Res Nurs. 2, 155-166 (2001).</li>
<li>Bonetto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((JAK%2FSTAT3+pathway+inhibition+blocks+skeletal+muscle+wasting+downstream+of+IL-6+and+in+experimental+cancer+cachexia%5BTitle%5D)+AND+%22American+journal+of+physiology.+Endocrinology+and+metabolism+303%22%5BJournal%5D)">JAK/STAT3 pathway inhibition blocks skeletal muscle wasting downstream of IL-6 and in experimental cancer cachexia.</a> American journal of physiology. Endocrinology and metabolism 303. 303, E410-E421 (2012).</li>
<li>Samuels, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+protein+synthesis+stays+elevated+after+chemotherapy+in+tumour-bearing+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Liver protein synthesis stays elevated after chemotherapy in tumour-bearing mice.</a> Cancer Lett. 239, 78-83 (2006).</li>
<li>Cornwell, E. W., Mirbod, A., Wu, C. L., Kandarian, S. C., Jackman, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C26+cancer-induced+muscle+wasting+is+IKKbeta-dependent+and+NF-kappaB-independent%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">C26 cancer-induced muscle wasting is IKKbeta-dependent and NF-kappaB-independent.</a> PloS One. 9, e87776(2014).</li>
<li>Penna, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+wasting+and+impaired+myogenesis+in+tumor+bearing+mice+are+prevented+by+ERK+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Muscle wasting and impaired myogenesis in tumor bearing mice are prevented by ERK inhibition.</a> PloS One. 5, e13604(2010).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

Especialmente em suas últimas fases, cancro colo-rectal está associada com o desenvolvimento de caquexia, que é responsável por resultados mais pobres e reduções na qualidade de vida do paciente. Muitos estudos têm focado no tratamento de condições secundárias de cancro; No entanto, apesar de muitos esforços nesse sentido, ainda não existe uma terapia aprovada para caquexia associada ao câncer 21. Assim, é imperativo que os modelos animais assemelham-se a patologia humana, tanto quanto possível, a fim de maxi...

perda de massa muscular é uma complicação séria de várias condições clínicas, tais como o cancro, sépsis, fígado, cirrose, insuficiência cardíaca e renal, doença pulmonar obstrutiva crónica, e AIDS. Em particular, a perda de massa muscular é evidente em, pelo menos, 50% dos pacientes com cancro 1. A perda de músculo esquelético nos resultados de cancro de aumento da degradação de proteínas, devido à sobre-activação dos sistemas proteolíticos do esqueleto muscular e / ou a diminuição da síntese de proteína 6. A lipólise também é evidente, conduzindo ao esgotamento de tecido adiposo. Clinicamente, caquexia está associada com a redução da qualidade e duração de vida e é estimada como sendo a causa de morte em 20 - 30% dos doentes com cancro 7. A utilização de modelos experimentais que se assemelham a doença humana, tanto quanto possível, seria benéfico. Um modelo animal óptima é caracterizada por uma elevada reprodutibilidade, assim como por interferência limitado de diferentes terapias e os factores imprevisíveis dedieta, sexo e antecedentes genéticos que são normalmente associados com a condição clínica 8. Até agora, caquexia do cancro tem sido estudada principalmente em modelos animais caracterizados por transplante de células cancerosas ou de injecção de substâncias cancerígenas, embora um novo método é a utilização de ratinhos geneticamente modificados susceptíveis para o desenvolvimento de cancro. Os ratinhos portadores de carcinoma do C26 (também referido como cancro do cólon e adenocarcinoma-26) representam um modelo bem caracterizado e amplamente utilizado de caquexia do cancro 2,5. O crescimento dos resultados de tumores C26 no corpo e perda de peso muscular, principalmente através de gordura melhorada e catabolismo protéico 9. Geralmente, um peso do tumor de 10% em relação ao peso total do corpo está associada com uma redução de 20-25% em peso do músculo esquelético e uma maior depleção de gordura 3,10. Hepatomegalia e esplenomegalia também são observados com o crescimento tumoral, juntamente com a activação da resposta de fase aguda e a elevação da pró-Inflaos níveis de citocinas mmatory 3,11. Entre estes, é bem sabido que a IL-6 desempenha um papel fundamental na mediação da perda de massa muscular no modelo de C26, embora esta citocina não é provavelmente o único indutor de caquexia 12. Elevados de IL-6 provoca atrofia do músculo através da activação da via de JAK / STAT3, e inibindo deste factor de transcrição pode prevenir perda muscular 3,4. Durante a perda muscular induzida por C26, como em muitas condições de atrofia muscular, perda de massa muscular em grande parte, através de reduções do teor de proteína muscular através fibras musculares, não por meio de morte celular ou perda de fibras 13. Em C26 caquexia, uma mudança para menores áreas transversais é observada em ambos os glicolíticas e oxidativos fibras 2. Isso também é consistente com a redução da força muscular 5. Muitos grupos em todo o mundo têm aproveitado o modelo C26, a fim de descobrir novos mediadores da perda de massa muscular ou drogas clinicamente relevantes para CAC câncerHexia. No entanto, muitos procedimentos diferentes para o uso deste modelo têm sido relatados, levantando preocupações sobre a consistência dos dados obtidos e posando barreiras à reprodutibilidade em diferentes condições experimentais. Aqui nós relatamos um uso típico deste modelo para o estudo da caquexia associada ao câncer que produz dados padronizados e reprodutíveis.

<table><tbody><tr><td>Frascos de Cultura de Células</td><td>Falcon - Becton Dickinson</td><td>35-5001</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Cellgro</td><td>10-017-CV</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Gibco</td><td>26140</td><td></td></tr><tr><td>Estreptomicina-Penicilina&nbsp;</td><td>Camundongos Cellgro</td><td>30-002-CI</td><td></td></tr><tr><td>CD2F1</td><td>Harlan</td><td>060</td><td></td></tr><tr><td>Aparelho</td><td>de anestesia EZ-Anestesia</td><td>EZ-7000</td><td></td></tr><tr><td>2-Metil Butano</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M32631</td><td></td></tr><tr><td>OCT</td><td>Tissue-Tek</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>Cryostat</td><td>Leica</td><td>CM1850</td><td></td></tr><tr><td>Discos de cortiça</td><td>Microscopia eletrônica Sciences</td><td>63305</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost mais lâminas de vidro</td><td>VWR</td><td>48311-703</td><td></td></tr><tr><td>Anticorpo policlonal Anti-Laminina Coelho</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L9393</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Distrofina Camundongo Anticorpo monoclonal</td><td>Vector Laboratories</td><td>VP-D508</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Flour 594 anti-mouse IgG</td><td>Life Technologies</td><td>A11062</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Flour 594 IgG anti-coelho Life</td><td>Technologies</td><td>A21211</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxilina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>GHS216</td><td></td></tr><tr><td>Eosina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT110332</td><td></td></tr><tr><td>Xileno</td><td>Acros Organics</td><td>422680025</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio Cytoseal-XYL</td><td>Thermo</td><td>8312-4</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Zeiss</td><td>Observer.Z1&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Tablet de bambu</td><td>Wacom</td><td>CTH-661</td><td></td></tr><tr><td>Prism 7.0 para Mac OS X</td><td>GraphPad Software, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Excel para Mac 2011</td><td>Microsoft Corp.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>Institutos Nacionais de Saúde dos EUA</td><td>IJ1.46</td><td>http://rsbweb.nih.gov/ij/download.html</td></tr><tr><td>Microtainer</td><td>BD</td><td>365873</td><td></td></tr></tbody></table>

o colon-26 carcinoma tumor-rolamento mouse como um modelo para o estudo do câncer caquexia

The Colon-26 Carcinoma Tumor-bearing Mouse as a Model for the Study of Cancer Cachexia

A caquexia do câncer é a perda progressiva de massa muscular esquelética e tecido adiposo, balanço negativo de nitrogênio, anorexia, fadiga, inflamação e ativação de sistemas de lipólise e proteólise. Pacientes oncológicos com caquexia se beneficiam menos das terapias antineoplásicas e apresentam aumento da mortalidade1. Vários modelos animais foram estabelecidos para investigar as causas moleculares responsáveis pela perda de massa corporal e muscular como resultado do crescimento tumoral. Aqui, descrevemos metodologias pertencentes a um modelo bem caracterizado de caquexia do câncer: camundongos portadores do carcinoma C262-4. Embora esse modelo seja muito usado na pesquisa de caquexia, diferentes abordagens tornam a reprodutibilidade um problema potencial. O crescimento do tumor C26 causa perda acentuada e progressiva de massa muscular corporal e esquelética, acompanhada de redução da área de secção transversa muscular e da força muscular3-5. O tecido adiposo também é perdido. A perda de peso coincide com níveis circulantes elevados de citocinas pró-inflamatórias, particularmente a interleucina-6 (IL-6)3, que é diretamente, embora não totalmente, responsável pela caquexia C26. É bem aceito que um mecanismo primário pelo qual o tumor C26 induz a depleção do tecido muscular é a ativação dos sistemas proteolíticos do músculo esquelético. Assim, a expressão de ubiquitina ligases músculo-específicas, como atrogina-1/MAFbx e MuRF-1, representa um método aceito para a avaliação do catabolismo muscular em curso2. Aqui, apresentamos como executar esse modelo de maneira reprodutível e como extirpar vários tecidos e órgãos (fígado, baço e coração), bem como músculos adiposos e esqueléticos (gastrocnêmio, tibial anterior e quadríceps). Também fornecemos protocolos úteis que descrevem como realizar o congelamento muscular, seccionamento e quantificação do tamanho da fibra.

C26 cinética de crescimento do tumor mostrar uma fase de latência para o primeiro 7-8 d após a injecção, seguido de crescimento celular exponencial (4-5 d). A massa tumoral atinge finalmente ~ 10% do peso corporal (cerca de 2 g; Figura 1A-B). Durante a primeira fase, o tumor pode ser localizado por palpação única e aparece como uma pequena protuberância da pele. Na segunda fase, o tumor é observado como uma massa sob a pele. Raramente, o tumor torna-se u...

Camundongos portadores do carcinoma do cólon-26 (C26) representam um modelo clássico de caquexia do câncer. A perda progressiva de massa muscular ocorre em associação com o crescimento do tumor, superexpressão de ubiquitina ligases específicas do músculo e reduções na área da seção transversal do músculo. A perda de gordura também é observada. A caquexia é estudada de maneira dependente do tempo, com gravidade crescente da emagrecimento.

O Colon-26 Carcinoma Tumor-rolamento Mouse como um modelo para o estudo do câncer caquexia

Cancer cachexia is the progressive loss of skeletal muscle mass and adipose tissue, negative nitrogen balance, anorexia, fatigue, inflammation, and ...

Os objetivos gerais deste protocolo são executar o modelo in vivo Colon 26 de forma reprodutível e investigar adequadamente o enfraquecimento e o desgaste muscular progressivo que ocorrem em associação com o crescimento tumoral. Este modelo pode ajudar a responder perguntas-chave na área da caquexia tumoral sobre perda muscular induzida por tumor, fraqueza muscular, aumento do catabolismo muscular e níveis elevados de citocinas hiperinflamatórias. A principal vantagem deste modelo experimental é que as alterações consistentes com um fenótipo caquético podem ser facilmente iniciadas de maneira dependente do tempo, à medida que a gravidade do desgaste aumenta.Demonstrando esses procedimentos estarão Rafael Barreto, um técnico do meu laboratório, e Joseph Rupert, um estudante de doutorado do grupo de Teresa Zimmer. Para implantar os tumores C 26, utilize uma seringa estéril de insulina de um milímetro, equipada com uma agulha de 26 graus, para injetar rapidamente uma vez 10 à sexta células subcutaneamente e interescapularmente nos bolsos de gordura de camundongos adultos individuais, CD dois F um. Retorne os animais para suas gaiolas após a injeção do tumor, com monitoramento.Avalie o

the-colon-26-carcinoma-tumor-bearing-mouse-as-model-for-study-cancer

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Pesquisa sobre o Câncer

Duas técnicas podem ser usadas para estabelecer esse modelo: injeção de uma suspensão de células de câncer na parede cecal ou transplante de um pedaço de tumor subcutâneo para o ceco. Este modelo é útil para estudar a progressão natural do câncer colo-retal e testes de novos agentes terapêuticos contra o câncer colorretal.

Modelo rato ortotópico de câncer colorretal

Nós demonstramos um protocolo em que a administração do agente genotóxico azoximetano (AOM), seguido por três ciclos da pró-inflamatória de sódio sulfato de agente de dextrano (DSS) de forma rápida e consistentemente gera tumores do cólon em ratos com semelhanças morfológicas e moleculares para as observadas em humanos colite Associadas cancro.

Câncer de modelagem Colite Associada com Azoximetano (OMA) e sulfato de sódio Dextran (DSS)

Este vídeo descreve o protocolo para gerar um modelo de camundongo de câncer colorretal de xenoenxerto ortotópico derivado de paciente para estudar a progressão de células de câncer colorretal em camundongos diabéticos/imunodeficiência combinada grave (NOD/SCID) não obesos. Este modelo murino ajuda a entender o crescimento do tumor primário e o padrão de metástases.

Gerando modelo de camundongo PDOX de câncer colorretal: estudando a progressão do câncer colorretal em um modelo murino

A capacidade dos clones metastáticos de colonizar locais distantes depende de sua capacidade de proliferação e/ou de sua capacidade de sobreviver no microambiente hospedeiro sem proliferação significativa. Aqui, apresentamos um modelo animal que permite a visualização quantitativa de ambos os tipos de colonização hepática por clones metastáticos.

Modelo Animal avançado de Colorectal metástase no fígado: técnicas de imagem e Propriedades de metastáticos Clones

Descrevemos o estabelecimento de tumores colorretais ortotópicos através da injeção de células tumorais ou organoides no ceco de camundongos e o subsequente isolamento de células tumorais circulantes (CTCs) deste modelo.

Isolamento de células tumorais circulantes em um modelo de rato ortotópico de câncer colorretal

É apresentado um protocolo para o estabelecimento de um modelo de ratinho geneticamente modificado de câncer colorretal por infecção segmentar adeno-cre e sua vigilância através de colonoscopia de alta resolução.

Um modelo de mouse de engenharia genética de câncer colorretal esporádico

A injeção de veia portal de organoides de câncer colorretal (CRC) gera metástase hepática rica em estroma. Este modelo de camundongos de metástase hepática crc representa uma ferramenta útil para estudar interações tumorais-estroma e desenvolver novas terapêuticas dirigidas a estroma, como terapias genéticas mediadas por vírus associados ao adeno.

Portal Injeção de Veia de Organoides de Câncer Colorretal para Estudar o Estroma metástase hepática

Este protocolo descreve o implante ortotópico de células cancerosas derivadas de pacientes na parede do ceco de camundongos imunodeficientes. O modelo recapitula a doença metastática avançada do câncer colorretal e permite a avaliação de novas drogas terapêuticas em um cenário clinicamente relevante de metástases pulmonares e hepáticas.

Implante Ortotópico de Células Cancerosas Derivadas do Paciente em Camundongos Recapitula o Câncer Colorretal Avançado

Este estudo se concentra na indução subcutânea in vivo de células cancerígenas colorretais luminescentes em um modelo murino e na subsequente medição de luminescência usando um sistema de imagem. O procedimento visa estabelecer um modelo de crescimento tumoral reprodutível para monitoramento em tempo real e avaliação terapêutica.

Injeção subcutânea de células de câncer colorretal humano em camundongos nus atímicos para avaliar a eficácia antitumoral

A matriz extracelular recelularizada de um fígado de rato descelularizado pode ser usada como um modelo ex vivo tridimensional humanizado para estudar a distribuição e expressão transgênica de um vírus ou vetor viral.

Estudo de Vetores Virais em um tridimensional do fígado Modelo repovoada com a linha de células humanas carcinoma hepatocelular HepG2

Aprenda a executar o modelo Colon-26 in vivo em camundongos CD2F1 para estudar caquexia cancerosa. Este protocolo demonstra a implantação de tumores e o monitoramento da perda muscular progressiva.

O Colon-26 Carcinoma Tumor-rolamento Mouse como um modelo para o estudo do câncer caquexia

Explorar mais vídeos