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DOI: 10.3791/55000-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article describes a protocol for culturing low-density primary hippocampal neurons on glass coverslips over a glial monolayer. This method allows for high-resolution optical imaging and functional assays of mature neurons.
Este artigo descreve o protocolo para a cultura de baixa densidade neurónios do hipocampo primárias que crescem em lamelas de vidro invertida sobre uma monocamada de células gliais. As camadas neuronais e gliais são separados por contas de cera de parafina. Os neurónios cultivados por este método são adequados para imagiologia óptica de alta resolução e ensaios funcionais.
Este protocolo foi originalmente publicado pelo Dr. Gary Bunker e seus colegas, e eles permitem a longa densidade e a cultura de alta pureza dos neurônios do hipocampo de carga embrionária, suspendendo os neurônios sobre uma camada mais fixa da glia. Este resultado está entre os perigos de nossos outros resultados cruciais do hipocampo, porque permite que os neurônios cresçam em baixas densidades com poucas células gliais contaminantes. Este resultado é, portanto, ideal para imagens de alta resolução e ativos funcionais de tipografia e neurônios maduros em cultura.
A pós-maturação deste protocolo deve acelerar a adaptação por uma nova vida, pois existem vários estados-chave durante o procedimento que são difíceis de descrever, por isso leva você junto. Este protocolo consiste em três populações independentes que são necessárias para a cultura de neurônios primários de alta qualidade. Esses processos incluem cultura de células gliais, criação e revestimento de lamínulas e preparação de células nervosas do hipocampo.
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