Um mouse modelo de fadiga induzida por irradiação periférica

Nós descrevemos um método que utiliza a irradiação periférica direcionada para induzir comportamento à fadiga, como em ratos. A dose de irradiação não letal selecionado leva a uma redução de uma semana em atividade de execução roda voluntária.

O objetivo geral deste procedimento é medir o comportamento semelhante à fadiga induzido pela irradiação periférica. Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave sobre fadiga e, em particular, fadiga relacionada à irradiação. Por exemplo, pode ser usado para explorar os diferentes papéis do sistema imunológico e do sistema nervoso central na fadiga após a irradiação.

A principal vantagem dessa técnica é que ela usa especificamente a irradiação periférica para afetar o comportamento de fadiga essencialmente impulsionado. Comece randomizando os camundongos em grupos de controle irradiado simulado ou irradiado. Em seguida, identifique camundongos machos de cinco semanas de idade pela tatuagem na cauda e atribua cada camundongo a uma gaiola de camundongo ventilada padrão individual.

Deixe os ratos se aclimatarem às suas gaiolas por pelo menos mais três dias, manuseando cada camundongo suavemente por um período de três minutos por dia. Em seguida, apresente aos ratos gaiolas individuais e voluntárias de corrida em roda, ou VWRA, cada uma equipada com uma roda conectada a um contador eletrônico para gravação contínua. Inicie a gravação de VWRA através da interface do software do computador.

Defina os intervalos de gravação para uma hora e a duração para pelo menos cinco dias. Finalmente, após cinco dias, pare a gravação do VWRA por meio da interface do software e retorne os mouses às suas gaiolas padrão sem rodar. Depois de anestesiar o mouse, confirme se a anestesia foi eficaz com uma pitada no dedo do pé.

Use pomada nos olhos para evitar o ressecamento. Em seguida, transfira o mouse anestesiado para um dispositivo de blindagem de chumbo. Disponha o mouse na blindagem de forma que apenas a região abdominal inferior e pélvica fique exposta.

Em seguida, use fita adesiva para prender a base da cauda do mouse na posição dentro da blindagem para garantir que a posição não mude durante a irradiação. Se o camundongo estiver no grupo de irradiação, administre 800 centigray a uma taxa de dose de cerca de 110 centigray por minuto. Se o mouse estiver no grupo de controle de irradiação simulada, deixe-o no irradiador inativo pelo tempo equivalente.

Após a conclusão da irradiação, remova o mouse do irradiador e da blindagem e retorne-o à sua gaiola padrão original. Monitore o camundongo continuamente até que ele recupere a consciência suficiente para manter a decúbito esternal. Após três dias sucessivos de irradiação, transfira os camundongos para suas gaiolas VWRA individuais.

Finalmente, para capturar a fadiga induzida por radiação, registre VWRA por 15 dias. O efeito foi significativo nos primeiros sete dias após a radiação, com a menor distância média VWRA ocorrendo no terceiro dia após a radiação. Aqui, a distribuição da mudança no VWRA de antes para depois da irradiação é mostrada.

Enquanto a maioria dos camundongos testados apresentava sintomas semelhantes aos da fadiga, houve um pequeno número de camundongos que mostraram pouca mudança ou mesmo um aumento no VWRA. Ao tentar este procedimento, é importante certificar-se de que os camundongos estejam completamente anestesiados durante a irradiação, pois qualquer movimento pode afetar o direcionamento e a dosagem da irradiação. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como usar a irradiação direcionada perifericamente para induzir um comportamento semelhante à fadiga em camundongos.