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DOI: 10.3791/55251-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article describes a method for isolating skeletal muscle mitochondria from a pig's quadriceps muscle using differential centrifugation. The respiratory rates of mitochondrial respiratory chain complexes I, II, and IV are then measured using high-resolution respirometry.
Aqui, uma amostra de músculo quadríceps é retirada de um porco anestesiado e as mitocôndrias são isoladas por centrifugação diferencial. Em seguida, as frequências respiratórias dos complexos I, II e IV da cadeia respiratória mitocondrial são determinadas por meio de respirometria de alta resolução.
O objetivo geral deste procedimento é isolar as mitocôndrias do músculo esquelético por centrifugação diferencial e determinar as taxas respiratórias dos complexos da cadeia respiratória mitocondrial I, II e IV. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo bioenergético mitocondrial, como doenças e síndromes associadas à disfunção mitocondrial, como diversas doenças neurológicas, sepse e distúrbios relacionados à idade. A principal vantagem desta técnica é a ausência da maioria dos fatores citológicos na preparação mitocondrial isolada, o que pode interferir na análise das funções mitocondriais. Demonstrando o procedimento estará Sandra Nansoz, a técnica do meu laboratório.
Para iniciar este procedimento, obtenha um copo de amostras de músculo esquelético, conforme descrito no protocolo de texto. Coloque o copo em um balde de gelo. Usando uma tesoura fina, pique o músculo em pedaços de um a dois milímetros de tamanho.
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