Desenvolvimento neurológico Reflex Teste em Neonatais rato filhotes de cachorro

O objetivo geral desta metodologia de reflexo de rato neonatal é aprender a realizar essas tarefas de forma rápida, precisa e comparável. Este método pode responder a questões-chave no campo das deficiências do desenvolvimento nervoso, como a paralisia cerebral. A principal vantagem dessa técnica é que ela oferece uma maneira de testar os reflexos iniciais do desenvolvimento em filhotes de ratos recém-nascidos.

Como os humanos, os roedores recém-nascidos têm reflexos de desenvolvimento precoce que oferecem uma janela para o desenvolvimento posterior. Indivíduos novos neste método terão dificuldades, pois os reflexos ocorrem rapidamente e podem ser difíceis de pontuar. É importante ser o mais consistente possível.

As implicações dessa técnica se estendem à terapia e ao diagnóstico de paralisia cerebral e deficiências de desenvolvimento. A determinação de comportamentos reflexos é o padrão-ouro para a determinação e a eficácia das intervenções terapêuticas. A demonstração visual desse método é fundamental, pois as etapas são difíceis de aprender por meio de palavras escritas.

Para começar, aclimate os ratos ao ambiente e ao manuseio humano, conforme descrito no protocolo de texto que acompanha. Uma vez aclimatados, acasale os ratos para produzir uma ninhada de filhotes para teste. A partir do terceiro dia pós-natal, transfira os filhotes para uma sala silenciosa em um horário consistente todos os dias.

Deixe-os se aclimatar por no mínimo uma hora antes de realizar uma série de testes de reflexo do neurodesenvolvimento. Na sala, instale uma lâmpada de aquecimento ou almofada térmica para manter a temperatura corporal do filhote em 36,5 graus Celsius. Além disso, registre o peso do filhote todos os dias.

Em seguida, configure uma câmera de vídeo com uma velocidade do obturador de pelo menos 1/1000 de segundo para analisar os testes de reflexo quadro a quadro. Posicione a câmera de forma que fique diretamente acima ou ao lado do filhote de rato e dos materiais de teste durante cada teste. Para cada um dos testes a seguir, execute o teste todos os dias até que o filhote seja capaz de realizar a tarefa em dois dias consecutivos.

A data da primeira ocorrência é a data que deve ser registada para a quantificação dos dados. A partir do terceiro dia pós-natal, realize o teste de reflexo de preensão do membro anterior. Para este teste, coloque uma haste cega contra a palma de cada uma das patas dianteiras do filhote, uma de cada vez, e aplique manualmente uma leve pressão.

A pressão deve deslocar ligeiramente a pata dianteira para garantir que o contato seja feito e os filhotes possam sentir a haste. A preensão aparecerá como flexão de todos os dedos ao redor da haste. A aquisição bem-sucedida desse reflexo ocorre quando ambas as patas dianteiras seguram a haste por dois dias seguidos.

Em seguida, coloque uma haste romba contra a sola de cada pata traseira e aplique uma leve pressão manualmente para realizar o teste de reflexo de preensão dos membros posteriores. A leve pressão deve deslocar ligeiramente a pata traseira para garantir que o contato seja feito e os filhotes possam sentir a haste. A preensão bem-sucedida da haste aparece como flexão dos dedos ao redor da haste.

A aquisição desse reflexo ocorre quando ambas as patas traseiras seguram a haste por dois dias seguidos. Também a partir do terceiro dia pós-natal, realize o teste do reflexo de endireitamento. Para este teste, segure firmemente o filhote em decúbito dorsal, de modo que todas as quatro patas fiquem em pé.

Solte o filhote e inicie imediatamente o cronômetro. O endireitamento é alcançado quando o filhote é capaz de virar ou rolar para as quatro patas e cada pata é perpendicular ao corpo. Dê a cada filhote no máximo 15 segundos para atingir esse objetivo.

A partir do quarto dia pós-natal, realize o teste de reflexo de colocação dos membros posteriores. Para este teste, segure o filhote verticalmente no ar pelo tronco. Acaricie suavemente o dorso da pata traseira com uma superfície romba, como a borda de uma mesa.

Um reflexo de colocação correto é quando o filhote de rato retira o membro posterior estimulado, seguido pela colocação do membro posterior nessa superfície. Também a partir do quarto dia pós-natal, realize o teste de evitação de penhascos. Para este teste, coloque o filhote de rato na borda de uma superfície plana, de modo que as patas dianteiras e o focinho do filhote fiquem sobre a borda.

O resultado correto é uma resposta protetora em que o filhote de rato se afasta da beira do penhasco. Comece a avaliação da marcha no sexto dia pós-natal. Para este teste, coloque os filhotes no centro de um círculo de 15 centímetros de diâmetro e deixe o filhote sair do círculo por 30 segundos.

Uma marcha bem-sucedida é realizada quando o filhote de rato é capaz de mover as duas patas dianteiras para fora do círculo em menos de 30 segundos. Comece a análise do sobressalto auditivo no 10º dia pós-natal. Aqui, é necessário algo, como um sino, que seja capaz de produzir um ruído alto.

Posicione o sino diretamente sobre o filhote. Toque a campainha e avalie se uma resposta de sobressalto está presente ou não. Uma resposta de sobressalto positiva é observada quando o filhote exibe um movimento brusco para longe do som.

A partir do 12º dia pós-natal, coloque os filhotes em uma superfície aberta e não escorregadia e observe a postura que o filhote tem ao se mover. Uma postura imatura é refletida pelo arrasto do abdômen ao se mover e pelo apontamento perpendicular das patas dianteiras e traseiras em relação ao corpo. Uma postura madura é adquirida quando o filhote consegue levantar o abdômen da superfície e as patas dianteiras e traseiras são apontadas para trás ou paralelas ao corpo ao se mover.

Também a partir do dia 12 pós-natal, comece a observar as pálpebras do filhote. Registre o dia em que ambas as pálpebras se abrem. No dia 14 pós-natal, inicie o teste de endireitamento acelerado.

Para este teste, coloque o filhote em decúbito dorsal 30,48 centímetros acima de uma plataforma de pouso de espuma. Solte o filhote e observe sua capacidade de se endireitar. O endireitamento adequado refere-se a quando o filhote é capaz de virar para a posição de bruços e pousar sobre as patas.

Filhotes recém-nascidos expostos à inflamação no útero nasceram significativamente menores do que os controles. A suplementação dietética com brotos de brócolis foi capaz de aumentar o peso ao nascer desses filhotes. Juntamente com o peso ao nascer, o teste do reflexo do neurodesenvolvimento é uma medida preditiva do desenvolvimento e maturação corticais anormais, o que pode ser significativo em circunstâncias em que a neuropatologia evidente não é evidente.

Após o nascimento, o exame da colocação do reflexo neonatal dos membros posteriores nesses grupos mostrou um atraso significativo na aquisição desse reflexo para filhotes expostos à inflamação in utero em comparação com os controles. A suplementação dietética com brotos de brócolis evitou o atraso. Os resultados do teste de evitação do reflexo neonatal revelaram que os filhotes expostos à inflamação in utero são significativamente atrasados na aquisição de uma resposta protetora.

Mais uma vez, o consumo de brotos de brócolis evitou atrasos significativos. Esse mesmo resultado foi observado após o exame da marcha reflexa neonatal. Durante este procedimento, outros métodos, como registros diários de peso, podem ser realizados para responder a perguntas adicionais, como taxa de crescimento diário, recuperação do crescimento, gravidade da lesão e efeito da restrição de crescimento.

Após seu desenvolvimento, essa técnica abriu caminho para pesquisadores no campo da neurociência explorarem testes de reflexo de desenvolvimento em roedores neonatais. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como realizar testes de reflexo de desenvolvimento precoce em filhotes de ratos recém-nascidos. Além disso, você deve entender o significado dos reflexos comportamentais precoces, pois eles fornecem um biomarcador precoce de lesão e o efeito da intervenção terapêutica.