Name: -Nervo poupadores Mid-obstrução uretral (Nemo) em fêmeas pequenos roedores (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-04-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: Aprenda a criar obstrução uretral parcial em roedores fêmeas com técnica cirúrgica que poupa a inervação vesical. Este método minimiza a morbidade animal e permite avaliar padrões de expressão gênica.

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O trabalho foi financiado por uma bolsa operacional do CHIR (DJB).

O protocolo experimental seguinte foi aprovado pelo comitê de cuidados com os animais da instituição. 1. Nemo em ratas <ol><li> Preparação <ol><li> Colocar um rato fêmea Sprague-Dawley pesando cerca de 200 g sob anestesia de isoflurano a 3%, peso do animal, e barbear e desinfectar a área pré-púbica 3 vezes utilizando uma limpeza cirúrgica iodo. </li><li> Em uma almofada de aquecimento, fita membros posteriores e cauda para baixo e cateterização da bexiga com um angiocateter de calibre 20, que também é delicadamente gravada para baixo para evitar o deslizamento. </li></ol></li><li> dissecação <ol><li> Usar um bisturi para efectuar uma incisão na pele 8 milímetros longitudinal a partir da sínfise púbica palpável para o meato uretral. Levantar a pele de ambos os lados para facilitar o fechamento da ferida mais tarde. </li><li> Dissecar sem rodeios para identificar a uretra stent espalhando longitudinal com tesoura fina. Coloque ganchos pele fina auto-retenção para melhorar a exposiçãoda uretra. </li><li> Executar alguma suave longitudinal espalhamento utilizando tesouras curvas dorsal para a uretra, para desenvolver o plano entre a uretra e da vagina. Então, sem rodeios passar uma sutura de seda 4-0 atrás da uretra e preparar o duplo lance do nó de um cirurgião. </li></ol></li><li> Obstrução uretral parcial <ol><li> Remover o angiocateter, colocar uma haste de metal 0,9 milímetros paralela à uretra, e, em seguida, apertar o nó em torno da uretra e do metal da haste, de modo que o último ainda facilmente desliza para fora a partir daí. </li><li> Fixar o nó com mais 3 lances usando tensão suave antes de retirar a haste. Cortar o fio de sutura termina cerca de 3 mm long, ou 4 mm se libertação posterior de obstrução faz parte da experiência. </li></ol></li><li> fechamento da ferida <ol><li> Aproximar as glândulas uretrais usando um ponto único enterrado de absorvível trançado sutura 4-0. </li><li> Feche a pele com um ponto colchão horizontal enterrado usando o mesmo sut absorvívelUre. Nota: Embora possa parecer pouco convencional usar uma sutura absorvível para um ponto de penetração cutânea, não encontramos complicações como infecções da ferida e que a remoção da sutura pode ser evitada. </li></ol></li><li> Após o cuidado <ol><li> Injectar buprenorfina 0,1 mg / kg subcutaneamente antes de colocar o rato numa gaiola de recuperação. </li><li> Oferecer alguma dieta macia da recuperação para as primeiras 24 h ao único rato alojado. Após este período, animais de casa novamente nos mesmos pares que antes do procedimento desde que eles estão indo bem e pertencem ao mesmo grupo de tratamento. </li><li> Verifique diariamente os ratos quanto ao tamanho da bexiga e ao bem-estar geral; Registrar seu peso pelo menos uma vez por semana. </li></ol></li></ol> 2. NeMO em Ratos Femininos <ol><li> Preparação <ol><li> Coloque um rato C57bl / 6 fêmea pesando cerca de 18 g e proceda como detalhado no passo 1.1.1. </li><li> Proceder conforme detalhado no passo 1.1.2, exceto usar umiocatheter. </li></ol></li><li> dissecação <ol><li> Usar um bisturi para fazer uma incisão na pele de seis milímetros longitudinal a partir da sínfise púbica palpável para o meato uretral. </li><li> Dissecar sem rodeios para identificar a uretra stent espalhando longitudinal com tesoura fina. Levantar o feixe neuro-vasculares execução ventralmente na uretra por dissecção romba análogo. </li><li> Executar alguma suave longitudinal espalhamento utilizando tesouras curvas dorsal para a uretra, para desenvolver o plano entre a uretra e da vagina. Então, sem rodeios passar uma sutura 5-0 não absorvível trançado atrás da uretra e preparar o duplo lance do nó de um cirurgião. </li></ol></li><li> Obstrução uretral parcial <ol><li> Ligue o angiocateter com uma seringa de 1 ml e injectar 0,1 ml de solução salina normal para a bexiga. </li><li> Coloque uma cânula de calibre 26, paralela à uretra. Aperte levemente o nó em torno da uretra e cânula enquanto puxa de volta o angiocaº. </li><li> Fixar o nó com mais 3 lances usando tensão suave antes de retirar a cânula. </li><li> Teste para a urina que aparece no meato mediante uma pressão suave sobre a bexiga do animal; afrouxar o laço se incapaz de expressar urina. Caso contrário, o corte da sutura termina cerca de 3 mm long. </li></ol></li><li> fechamento da ferida <ol><li> Feche a pele com um ponto colchão horizontal enterrado usando uma sutura absorvível 5-0 trançado. </li></ol></li><li> após o cuidado <ol><li> Injectar 0,1 mg / kg de buprenorfina por via subcutânea, antes de colocar o rato em uma gaiola de recuperação. </li><li> Oferecer alguma dieta de recuperação suave para as primeiras 48 h para o mouse Alojado única. Após este período, animais da casa novamente nos mesmos grupos que antes do procedimento, desde que estão fazendo bem e pertencem ao mesmo grupo de tratamento. NOTA: Os ratos com uma palpável distendido bexiga 24 h após o procedimento que não anulará quando manuseado são over-obstruída e vai morrer dentro do next 1 - 2 dias a menos que levado de volta sob anestesia para a remoção da ligadura obstructivo. </li><li> Verificar os ratinhos diariamente para o tamanho da bexiga e bem-estar geral; registar o seu peso pelo menos semanalmente. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Storage+and+voiding+symptoms%3A+pathophysiologic+aspects%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects.</a> Urology. 62 (5), 3-10 (2003).</li>
<li>Boyle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+lower+urinary+tract+symptoms+in+men+and+women+in+four+centres.+The+UrEpik+study%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study.</a> BJU Int. 92 (4), 409-414 (2003).</li>
<li>Coyne, K. S., Wein, A., Nicholson, S., Kvasz, M., Chen, C. I., Milsom, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Economic+burden+of+urgency+urinary+incontinence+in+the+United+States%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Manag+Care+Pharm%22%5BJournal%5D)">Economic burden of urgency urinary incontinence in the United States: a systematic review.</a> J Manag Care Pharm. 20 (2), 130-140 (2014).</li>
<li>Buttyan, R., Chen, M. W., Levin, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+bladder+outlet+obstruction+and+molecular+insights+into+the+basis+for+the+development+of+bladder+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Urol%22%5BJournal%5D)">Animal models of bladder outlet obstruction and molecular insights into the basis for the development of bladder dysfunction.</a> Eur. Urol. 32 (Suppl 1), 32-39 (1997).</li>
<li>Mattiasson, A., Uvelius, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+contractile+properties+in+hypertrophic+rat+urinary+bladder%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Changes in contractile properties in hypertrophic rat urinary bladder.</a> J Urol. 128 (6), 1340-1342 (1982).</li>
<li>Chang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alteration+of+the+PKC-mediated+signaling+pathway+for+smooth+muscle+contraction+in+obstruction-induced+hypertrophy+of+the+urinary+bladder%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Alteration of the PKC-mediated signaling pathway for smooth muscle contraction in obstruction-induced hypertrophy of the urinary bladder.</a> Lab Invest. 89 (7), 823-832 (2009).</li>
<li>Moore, J. A., Brading, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+porcine+model+of+bladder+outlet+obstruction+incorporating+radio-telemetered+cystometry%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Int%22%5BJournal%5D)">A porcine model of bladder outlet obstruction incorporating radio-telemetered cystometry.</a> BJU Int. 100 (5), 1192-1193 (2007).</li>
<li>Beamon, C. R., Mazar, C., Salkini, M. W., Phull, H. S., Comiter, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+sildenafil+citrate+on+bladder+outlet+obstruction%3A+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+Inte%22%5BJournal%5D)">The effect of sildenafil citrate on bladder outlet obstruction: a mouse model.</a> BJU Inte. 104 (2), 252-256 (2009).</li>
<li>Pandita, R. K., Fujiwara, M., Alm, P., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cystometric+evaluation+of+bladder+function+in+non-anesthetized+mice+with+and+without+bladder+outlet+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Cystometric evaluation of bladder function in non-anesthetized mice with and without bladder outlet obstruction.</a> J Urol. 164 (4), 1385-1389 (2000).</li>
<li>Kang, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Sequential+Changes+in+Bladder+Function+after+Partial+Bladder+Outlet+Obstruction+in+Awake+Sprague-Dawley+Rats%3A+Focus+on+the+Decompensated+Bladder%5BTitle%5D)+AND+%22Korean+J+Urol%22%5BJournal%5D)">Early Sequential Changes in Bladder Function after Partial Bladder Outlet Obstruction in Awake Sprague-Dawley Rats: Focus on the Decompensated Bladder.</a> Korean J Urol. 52 (12), 835-837 (2011).</li>
<li>Schroeder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+an+oral+endothelin+converting+enzyme+inhibitor+on+rat+detrusor+function+after+outlet+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Protective effect of an oral endothelin converting enzyme inhibitor on rat detrusor function after outlet obstruction.</a> J Urol. 172 (3), 1171-1174 (2004).</li>
<li>Sidler, M., Aitken, K., Jiang, J., Bijos, D., Bägli, D. <a target="_blank" href="http://www.jurology.com/article/S0022-5347(16)01357-4/abstract">"sometimes a sham is just a sham" - why the rodent model of partial bladder outlet obstruction needs adjustment.</a> J Urol. 195 (4), e379(2016).</li>
<li>Jin, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+detrusor+overactivity+in+rats+after+relief+of+partial+urethral+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Persistent detrusor overactivity in rats after relief of partial urethral obstruction.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 301 (4), R896-R904 (2011).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

A mortalidade dos animais é uma das principais preocupações do modelo tradicional de pBOO na uretra proximal, em 15% ou mais em muitos relatórios 10, 11, 13. Nemo parece ter mortalidade mínima quando aplicado em ratos fêmeas. obstrução uretral proximal em murganhos é tecnicamente mais exigente do que em ratos e, portanto, ainda mais propensos a complicações. Utilizando uma cânula de calibre 26 como um espaço re...

Parcial obstrução da saída da bexiga (pBOO) tem uma prevalência elevada e pode resultar em disfunção da bexiga grave 1; o espectro varia de malformações congénitas, tais como válvulas de uretra posterior ou hypospadias, mais de estreitamento uretral adquiridos a hiperplasia benigna da próstata. O último que afecta mais de 30% dos homens de sessenta anos e mais velhos 2. Grande fardo paciente e os custos de saúde associados com imensas pBOO justificar o esforço de investigação considerável colocar em estudar a remodelação da bexiga em resposta à resistência aumentada saída 3. De 2006 até 2015, mais de 220 PubMed indexados artigos foram publicados sobre o efeito de pBOO na bexiga urinária. Embora os modelos animais para pBOO Elaboraram-se várias espécies, tais como 4 a 5 de rato, o coelho 6, 7 porco, e compue 8, 9, sem dúvida, o modelo animal mais habitualmente utilizada, porém, são ratos do sexo feminino submetidos a obstrução parcial da uretra proximal; acesso ao abdómen dos animais, exteriorizante da bexiga, e dissecção em torno do pescoço da bexiga são inevitáveis ​​com esta técnica obstrução uretral proximal tradicional. Variabilidade no grau de obstrução e a mortalidade dos animais são apenas alguns dos problemas associados com este procedimento 10, 11; mostrou-se que em animais de engano operados, dissecção em torno da uretra proximal leva a alterações fisiológicas que se correlacionam com perda de fibras nervosas no colo da bexiga 12. Esta descoberta indica que o modelo animal pBOO mais utilizada, a qual envolve o acesso a uretra proximal em roedores do sexo feminino, conduz a uma lesão desnervação com alterações estruturais e funcionais associadas da bexiga, afectandofarsa e animais obstruídas. Por conseguinte, foi necessário um método alternativo evitar lesões desnervação. O nosso laboratório desenvolvidos e avaliada uma abordagem obstrução médio-uretral poupadores de Nervo (nemo), eficaz na indução de alterações associadas à obstrução esperada na bexiga, tais como aumento da massa do órgão e urina residual, enquanto que os animais operados de forma simulada foram indistinguíveis dos animais de controlo não operados . Além disso, o esfíncter uretral estriado permaneceu intacta como ela se encontra próximo do limite de dissecção. Além disso, a variabilidade no aumento induzido por obstrução em massa da bexiga foi significativamente menor do que na obstrução uretral proximal tradicional e a mortalidade dos animais foi zero. Nós também aplicado com sucesso nemo em ratinhos fêmea com uma mortalidade inferior a 10% nos animais obstruídos, enquanto que todos os modelos pBOO para ratinhos descritos até à data foram associadas com uma mortalidade de cerca de 50%. Estudar remodelação da bexiga no contexto de pBOO em ratos irá beneficiar de applicabildade de todo o espectro de modificações transgénicos. Dissecando em torno do meio da uretra em roedores do sexo feminino não induz as alterações estruturais ou funcionais indesejáveis ​​e de confusão na bexiga urinária observado no modelo de obstrução proximal tradicional. No entanto, a indução de uma obstrução parcial no nível médio-uretral ainda induz a hipertrofia da bexiga e aumento da urina residual, como esperado a partir de um modelo animal para pBOO. Importante, realizando nemo em ratinhos abre investigação de remodelação da bexiga em pBOO a métodos transgénicos, que são praticamente inexistentes em roedores maiores.

<table><tbody><tr><td>Rato fêmea</td><td>Rato de Dawley Charles-River Canada</td><td>(Crl:SD); Código da cepa: 400</td><td>cerca de 200 g</td></tr><tr><td>Vaporizador de isoflorano</td><td>Benson medical industries inc.</td><td>Isoflurano TEC III; código do produto: 53-T3ISO&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Isoflorano</td><td>Fresenius Kabi Saúde Animal</td><td>Isoflorano; código do produto CP0406V2</td><td>&nbsp; Frasco de 250 mL</td></tr><tr><td>Bisturi descartável</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td># 15 Bisturis estéreis de aço inoxidável; número de catálogo 549-9-15S</td><td></td></tr><tr><td>Pinça de microscopia</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Pinça de Microscopia Aesculap, Finepoint, 115mm; número do produto 5443</td><td></td></tr><tr><td>Pinça Adson</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Pinça de Dissecção Aesculap Adson, Curva, 120mm; número do produto 5002-9</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura cirúrgica curva</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Tesoura Cirúrgica, Curva, S/S, 105mm; número de catálogo 1376</td><td></td></tr><tr><td>0,9 mm haste de metal inox</td><td>goodfellow.com</td><td>Aço Inoxidável - AISI 316L Diâmetro do fio:0,9mm; código de encomenda 911-684-65</td><td></td></tr><tr><td>Ganchos de pele - auto-fabricados em aço inox</td><td>goodfellow.com</td><td>Aço Inoxidável - AISI 316L Diâmetro do fio:0,9mm; código de encomenda 911-684-65</td><td></td></tr><tr><td>4-0 Sutura de seda</td><td>esutures.com</td><td>4-0 Sofsilk preto 98" fio; número do produto LS640</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Vicry sutura</td><td>esutures.com</td><td>5-0 Vicryl não tingido 27" RB-1 taper; número do produto J213H</td><td></td></tr><tr><td>Porta-agulha</td><td>Medsupplier.com</td><td>Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Porta-agulhas - 5 1/2"; código do produto SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Temgesic (Buprenorfina)</td> <td>primeiro suprimento veterinário</td><td>Buprenex 0.3MG/ml em amperes; item #075701</td><td></td></tr><tr><td>Seringa de 1 mL com agulha de 27 G</td><td>Fisher Scientific</td><td>BD&nbsp; Seringa Tuberculina, BD 309623</td><td></td></tr><tr><td>20 G Angiocath</td><td>Fisher Scientific</td><td>Andwin Scientific&nbsp; ANGIOCATH 20 GA; Nº de catálogo. </td><td></td>NC9561906</tr><tr><td>Dieta de recuperação</td><td>clearh2o</td><td>DietGel 31M; 72-08-5022</td><td></td></tr><tr><td>C57Bl / 6 camundongos fêmeas</td><td>Charles-River Canada</td><td>C57BL / 6 Mouse (C57BL / 6NCrI); Código da cepa: 027</td><td>cerca de 18 g</td></tr><tr><td>24 G angiocath</td><td>Fisher Scientific</td><td>Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc.&nbsp;IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; Nº de catálogo. </td><td></td>NC9814340</tr><tr><td>5-0 Ethibond</td><td>esutures.com</td><td>5-0 Ethibond verde 30" RB-1 cone; número do produto X550H</td><td></td></tr><tr><td>26 G agulha de seringa</td> Agulha de seringa <td>Sigma-Aldrich</td><td>BD Precisionglide, Calibre 26; z192392</td><td></td></tr><tr><td>Solução salina normal</td><td>Baxter</td><td>0,9% Cloreto de sódio injetável, USP, 100 mL MINI-BAG; código do produto 2B0043</td><td></td></tr></tbody></table>

-nervo poupadores mid-obstrução uretral (nemo) em fêmeas pequenos roedores

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

obstrução da saída da bexiga parcial (pBOO) tem alta prevalência, causas carga paciente significativa, e os custos de saúde imensos. O modelo animal mais comum para investigar remodelação da bexiga em pBOO são roedores do sexo feminino submetidos a obstrução parcial na uretra proximal. Variabilidade no grau de obstrução e a mortalidade dos animais são os principais preocupações com obstrução proximal. Além disso, dissecando em torno da uretra proximal e do colo da bexiga compromete inervação da bexiga. Nós desenvolvemos um modelo de obstrução mid-uretral poupadores de nervo (Nemo) para pBOO evitando as desvantagens do modelo tradicional. Nós nos aproximamos da uretra apenas inferior à sínfise púbica, o que evitou a necessidade de laparotomia, bem como para dissecção nesta área; Também, o esfíncter uretral estriado permaneceu intacta. Foi realizada nemo em ratos Sprague-Dawley do sexo feminino (12 obstruções, 6 animais sham), bem como em ratinhos fêmea C57 / BL6 (20 obstruçãos, 18 animais sham). Depois de duas semanas, avaliamos a função da bexiga, a massa da bexiga, e massa corporal. Nós não tivemos mortalidade entre ratas obstructed- ou operados por simulação; tal como descrito para o proximal tradicional pBOO-método, que amarrado a sutura em torno da uretra proximal e uma haste de metal colocado temporariamente 0,9 milímetros. Nemo induziu um aumento de 85% em massa da bexiga após duas semanas, o volume médio de urina residual foi de 0,4 mL em ratos parcialmente obstruída enquanto apenas 0,03 ml em animais sham. Em ratinhos, foram testados 3 tamanhos de cânulas que colocados ao longo da uretra quando atar o fio de sutura. Descobrimos que a utilização de uma cânula de calibre 27 resultou em mais de mortalidade dos animais 50%; colocação da cânula de calibre 25 não deu a resposta desejada no aumento da massa da bexiga; utilizando uma cânula de calibre 26, produziu resultados favoráveis ​​com a mortalidade mínima dos animais (1/8) ainda um aumento significativo de 2 vezes em massa da bexiga.

-Nervo poupadores Mid-obstrução uretral (Nemo) em ratas Mortalidade Foi realizada uma obstrução mid-uretral em mais de 40 ratas tão longe e não tinha mortalidades. massa da bexiga Média massa bexiga relativa (bexi...

modelagem tradicional de obstrução da saída da bexiga parcial em roedores é cheio com a mortalidade dos animais. Uma lesão desnervação de dissecção em torno da uretra proximal e do colo da bexiga também é de grande preocupação. Nós desenvolvido e avaliado um modelo de obstrução mid-uretral segura e confiável, evitando as deficiências do modelo tradicional.

-Nervo poupadores Mid-obstrução uretral (Nemo) em fêmeas pequenos roedores

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal ...

O objetivo geral desta técnica é cirurgicamente criar uma obstrução parcial da saída da bexiga em roedores fêmeas pequenos, preservando a inervação da saída da bexiga, com baixa morbidade animal, praticamente nenhuma mortalidade e pouca variabilidade no grau de obstrução. Este método pode ajudar a responder perguntas fundamentais sobre o remodelamento da bexiga induzido pela obstrução, como, por exemplo, quais são os padrões de expressão gênica e as alterações epigenéticas associadas à obstrução da saída? As principais vantagens desta técnica são sua confiabilidade e o fato de evitar a necessidade de dissecação ao redor do colo da bexiga, preservando assim a inervação da saída da bexiga.A implicação desta técnica estende-se à terapia da obstrução da bexiga, pois a fase após o alívio e a recuperação pode ser avaliada de maneira reprodutível. A recuperação da obstrução da bexiga é imprevisível em humanos. Com o uso desta técnica, a obstrução pode ser removida, permitindo a avaliação das respostas celulares e teciduais associadas à recuperação da obstrução.Desenvolvemos este método ao observar que a obstrução tradicional, mais proximal, estava associada a disfunção e displasia vesicai

nerve-sparing-mid-urethral-obstruction-nemo-in-female-small-rodents

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