Name: Minimamente Invasiva transversal aórtica constrição em Ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-03-14T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 40 s
Description: Aprenda a técnica de constricção transversal aórtica minimamente invasiva em ratos para induzir hipertrofia ventricular esquerda sem ventilação artificial. Este método simplifica estudos de remodelamento miocárdico em cardiologia.

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Gostaríamos de reconhecer o Mecanismo de Pesquisa da Universidade de Ciências da Vida (ULS) do Hong Kong Polytechnic University para a prestação de Vevo 2100 sistema de ultra-som. Um agradecimento especial ao Dr. Chunyi Wen da Divisão Interdisciplinar de Engenharia Biomédica, Hong Kong Polytechnic University, de formação e de facilitação. Este trabalho foi apoiado pelo governo HK RGC Grant GRF 17127215, 764812 e HKU6 / CRF / 11G para Billy KC Chow.

O protocolo segue as orientações da Comissão sobre o Uso de Animais Vivos em Ensino e Pesquisa (CULATR) da Universidade de Hong Kong. 1. Operação Preparação do Site <ol><li> Desinfectar o local da operação com álcool isopropílico 75%. Ajustar a temperatura da almofada de aquecimento a 37 ° C para evitar alterações no coração e taxas respiratórias do indivíduo animal. </li><li> Use instrumentos cirúrgicos esterilizados num esterilizador gravidade deslocamento a 121 ° C durante 30 min ou por outros métodos apropriados. </li><li> Aqui 2 - 4 agulhas de calibre 30 e curva-los com um suporte de agulha, como pode ser visto na Figura 1, para fazer uma ferramenta para a ligação e separação do tecido e para o uso como um retractor. Montar a agulha agora curvada sobre um aplicador de algodão para uso em cirurgia. </li><li> Blunt uma agulha de calibre 27 e curvá-lo 90º com o suporte da agulha. Suavizar a ponta, esfregando uma superfície dura para fazer um espaçador de 0,4 mm na etapa ligadura. </li></ol><ol><li> Anestesiar a 2 meses de idade, do sexo masculino, 22-25 g rato C57BL / 6N com uma cetamina apropriado e mistura de xilazina em relação ao peso corporal: 100 mg / kg + 10 mg / kg ip Confirme a anestesia com a pitada reflex cauda negativa . </li><li> Remova o cabelo na região anterior do pescoço e no peito com uma aplicação de 2 a 3 min de creme depilatório. Retire o creme com água morna e um aplicador de algodão. </li><li> Aplicar pomada oftálmica ou gel para os olhos do animal para evitar a secagem da córnea. </li><li> Colocar o animal em uma almofada de aquecimento na posição supina e realizar monitoramento intra-operatório, tendo a certeza de manter a documentação apropriada a cada intervalo de 15 min. </li><li> Use fita de papel cirúrgica para fixar as extremidades para a almofada de aquecimento, a fim de manter o animal na posição correcta durante a cirurgia. </li><li> Desinfectar a pele alternadamente com álcool e solução de iodo-povidona três vezes. </li><li> Use um dr estérilmacaco com um campo de funcionamento exposto a evitar a contaminação. Utilizar novas luvas estéreis para cada rato e, se necessário. </li></ol> 3. Ligadura Procedimento <ol><li> Abra a pele do rato na posição de linha média do pescoço e peito com um bisturi. </li><li> Puxe a glândula tireóide para a cabeça, separando gentilmente tecidos conjuntivos com uma tesoura sem corte. </li><li> Separar a camada muscular na traqueia na linha média em relação ambos os lados com as agulhas curvas. </li><li> Usando a tesoura sem corte, corte do esterno para a segunda nervura (aproximadamente 5 mm). Abra o corte com uma válvula ou uma pinça curva. </li><li> Separa-se os lóbulos timo um do outro e da parede torácica inferior, separando o tecido conjuntivo com a agulha curvada; o arco aórtico e duas artérias carótidas será claramente visível neste ponto. </li><li> Coloque a agulha curvada sob o arco e perfurar entre a parede do vaso e do tecido conjuntivo, do outro lado por purulentahing a cabeça curvada para fora. </li><li> Usando a agulha curva, puxar o fio de sutura 6-0 de monofilamento sob o arco aórtico. </li><li> Coloque o espaçador no circuito e fixar a sutura no lugar com um duplo nó. Remover o espaçador suavemente. </li><li> Confirmar uma constrição bem sucedida com a posição nó e cortar as extremidades da sutura. </li><li> Feche a parede torácica utilizando 6/0 fio de seda com um padrão de sutura simples interrompido. Fechar a pele com uma sutura 6/0 mono filamento num teste padrão de sutura contínua. </li></ol> Cuidados 4. Pós-operatório <ol><li> Aplicar a solução de iodo-povidona para o local de sutura e colocar o animal em uma gaiola pré-aquecido para a recuperação e acompanhamento pós-operatório. </li><li> Injectar buprenorfina (0,05-0,1 mg / kg sc a cada 12 h) após o animal ter recuperado a consciência para aliviar a dor e proporcionar o mouse com alimentos moles apropriado. </li><li> Devolver o animal para uma criança de 12 h de luz / quarto ciclo escuro após a recuperação completa. </li></ol> 5.Ecocardiografia: Confirmação da ligadura de sucesso e Medidas <ol><li> Depois de uma semana, anestesiar o rato previamente em tiras com 3-5% de isoflurano, por indução, e 1-1,5%, para manutenção, com uma taxa de 1 L / min de fluxo de oxigénio. </li><li> Remova o cabelo do peito usando creme depilatório. Completamente remover o creme com água morna e um aplicador de algodão. </li><li> Garantir o mouse na posição supina para a plataforma de manipulação animal, mantida a 37 ° C. Aplique gel eletrodo para as patas e gravá-los para o bloco com eletrodos. </li><li> Aplique o gel de ultra-som para o peito do rato. Com uma sonda de 40 MHz MS550D e um sistema de ultra-som de alta frequência, realizar Doppler colorido e pulsátil Doppler de varrimento sobre as artérias carótidas direita e esquerda, bem como sobre o arco aórtico. </li><li> Usando B-Mode, localize o ventrículo esquerdo. Usando M-Mode, as pressões sistólica e diastólica espessura da parede pode ser medido. Use Cine loja e quadro de loja para guardar dados e imagens conforme necessário. </li><li> vocêcantar B-Mode, localizar a artéria carótida comum esquerda antes do ponto de ramificação. Use pulsada de onda e Doppler colorido para avaliar o fluxo. Repita com a artéria carótida direita em um ponto similar. Salvar as imagens no Cine loja e modos Quadro loja para analisar mais tarde. </li><li> Inclinar a plataforma de manipulação de animais para a esquerda para que o mouse está na posição de decúbito esquerdo. Coloque a sonda no mouse, a 30 ° compensados ​​a partir de uma posição paralela à cabeça na posição para-esternal e manipular X e Y para encontrar o arco aórtico. </li><li> Localize a constrição. Usar um modo de Doppler a cores para fazer o local da constrição mais visível, como o sangue será que flui através de um canal estreito entre o ponto onde as duas artérias carótidas ramificar-se do arco aórtico. </li><li> Use pulsada de onda e Doppler colorido para medir a velocidade do fluxo de pico. Use Cine loja e quadro de loja para guardar dados e imagens conforme necessário. </li><li> Permitir que o animal se recuperar em uma almofada de aquecimento na posição prona.Devolver o animal para a gaiola original em um 12 horas de luz / quarto ciclo escuro depois que ele se recuperou totalmente da anestesia. </li></ol>

<ol><li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li>
<li>de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20410870">Transverse aortic constriction in mice.</a> J Vis Exp. (38), (2010).</li>
<li>Hu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+aortic+banding+in+mice%3A+effects+of+altered+cardiomyocyte+insulin+signaling+during+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 285 (3), H1261-H1269 (2003).</li>
<li>Shimizu, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excessive+cardiac+insulin+signaling+exacerbates+systolic+dysfunction+induced+by+pressure+overload+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Excessive cardiac insulin signaling exacerbates systolic dysfunction induced by pressure overload in rodents.</a> J Clin Invest. 120 (5), 1506-1514 (2010).</li>
<li>Tarnavski, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+surgical+models+in+cardiovascular+research%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Mouse surgical models in cardiovascular research.</a> Methods Mol Biol. 573, 115-137 (2009).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+murine+model+for+the+study+of+reverse+cardiac+remodelling%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Cardiol%22%5BJournal%5D)">A modified murine model for the study of reverse cardiac remodelling.</a> Exp Clin Cardiol. 18 (2), e115-e117 (2013).</li>
<li>Hartley, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+estimation+of+reduced+coronary+flow+reserve+in+mice+with+pressure+overload+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy.</a> Ultrasound Med Biol. 34 (6), 892-901 (2008).</li>
<li>Scherrer-Crosbie, M., Thibault, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiography+in+translational+research%3A+of+mice+and+men%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Echocardiogr%22%5BJournal%5D)">Echocardiography in translational research: of mice and men.</a> J Am Soc Echocardiogr. 21 (10), 1083-1092 (2008).</li>
<li>Faerber, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+heart+failure+by+minimally+invasive+aortic+constriction+in+mice%3A+reduced+peroxisome+proliferator-activated+receptor+gamma+coactivator+levels+and+mitochondrial+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: reduced peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator levels and mitochondrial dysfunction.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 141 (2), 492-500 (2011).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+Cardiac+Morphological+and+Functional+Changes+in+Mouse+Model+of+Transverse+Aortic+Constriction+by+Echocardiographic+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging.</a> J Vis Exp. (112), (2016).</li>
</ol>

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

Rockman e colegas desenvolveu o primeiro método para bandagem aórtica como um método para estudar sobrecarga de pressão no coração. Esta pesquisa permitiu começar a descobrir as conseqüências celulares e moleculares da hipertensão e insuficiência cardíaca 1. Um método melhorado, minimamente invasiva constrição da aorta transversal (MTAC), fornece um método passível, dependente do tempo para a indução de sobrecarga de pressão ventricular esquerda e insuficiência cardíaca, sem os inconvenientes da ...

<html> O objetivo geral deste artigo é demonstrar como transversal constrição aórtica (TAC) em ratos podem ser modificados para produzir uma cirurgia mais simples e mais conveniente. TAC foi introduzido pela primeira vez em 1991 1 e permitiu que os biólogos moleculares para estudar as vias celulares e moleculares que levam à hipertrofia no ventrículo esquerdo e insuficiência cardíaca, particularmente em pequenos animais com genomas manipuladas 2, 3, 4, 5, 6. Apesar da sua eficácia em produzir a sobrecarga de pressão desejado, em última análise, a técnica está limitada pela dificuldade em realizar o procedimento, e a sua baixa taxa de sobrevivência. Um cirurgião realização TAC devem ser capazes de realizar a entubação endotraqueal, toracotomia, e usar a ventilação artificial, a fim de evitar o colapso do pulmão 1. conteúdo &quot;&gt; Muitas vezes, um método simples e menos invasiva é desejada. Como consequência, minimamente invasiva constrição da aorta transversal (MTAC) foi concebido 3. Embora o resultado (especificamente, hipertrofia do ventrículo esquerdo) é o mesmo, o procedimento envolve um número significativamente menor aparelhos e menos danos para o animal. MTAC revela-se um método conveniente que tem uma taxa de sobrevivência maior, acima de 90%, e tem um tempo de operação de apenas 15 a 25 min. os raros casos de morte após cirurgia bem sucedida pode ser atribuída ao excesso constrição -tight do arco aórtico, resultando em sobrecarga ventricular esquerda tremenda e redução fatal de fornecimento de sangue para os órgãos críticos, tais como os rins. Após o processo é completado, a ecocardiografia pode ser usado para avaliar o sucesso de bandas e a morfologia e da função cardíaca. Um sistema de ultra-som de alta frequência pode ser utilizado para medir o diâmetro e as alterações no fluxo na esquerda e direitaartérias carótidas, para visualizar o arco aórtico constrição para medições de pico de velocidade de fluxo, e para determinar a espessura da parede do ventrículo esquerdo e parâmetros funcionais 7, 8. Após a eutanásia, os órgãos também podem ser recolhidos para estudos histopatológicos com hematoxilina e eosina e colágeno coloração Picrosirius, sendo este último particularmente útil para a observação de fibrose.

<table><tbody><tr><td>1 polegada 30 Gauge Needles</td><td>BD, Franklin Lakes, NJ 07417, EUA.&nbsp;</td><td>305128</td><td>Curvo como no procedimento e <forte>Figura 1</forte></td></tr><tr><td><forte>27 Agulha de calibre</forte></td><td>BD, Franklin Lakes, NJ 07417, EUA.&nbsp;</td><td>301629</td><td>Faça sem corte e liso para espaçador</td></tr><tr><td><forte>6/0 Dafilon</td><td>B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Alemanha.</td><td>C0933066</td><td></td></tr><tr><td>6/0 Silkam</td><td>B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Alemanha.</td><td>C0762067</td><td></td></tr><tr><td>Luvas estéreis</td><td>A.R. Medicom, Inc (Ásia), Hong Kong.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>< aplicador > algodão forte< / forte ></td> <td>Mannings, Quarry Bay, Hong Kong.</td><td></td><td>Local Shopping Center</td></tr><tr><td>Creme Depilatório</td><td>Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong</td><td></td><td>Local Shopping Center</td></tr><tr><td>Lexer-Baby Scissor</td><td>FST, Colúmbia Britânica V7H 0A6, Canadá.</td><td>14078-10</td><td></td></tr><tr><td>Curved Iris Forcep</td><td>FST, Colúmbia Britânica V7H 0A6, Canadá.</td><td>11065-07</td><td></td></tr><tr><td>Micro Olsen-Hegar Porta-Agulhas</td><td>WPI, Sarasota, FL 34240, EUA.&nbsp;</td><td>501989</td><td></td></tr><tr><td>Stereo Micrioscope</td><td>WPI, Sarasota, FL 34240, EUA.&nbsp;</td><td>PZMIII-BS</td><td></td></tr><<tr><td>strong>GenTeal Eye Gel</td><td>Novartis, East Hanover, NJ 07936, EUA.&nbsp;</td><td></td><td>Farmácia Local</td></tr><tr><td>Almofada de Aquecimento</td><td>Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, EUA.&nbsp;</td><td>DCT-20</td><td></td></tr><tr><td><forte>Fita cirúrgica</forte></td><td>Unidade de animais</td><td></td><td></td> de laboratório</tr><tr><td><forte>Cetamina e xilazina</forte></td><td>Unidade</td><td></td><td></td> de animais de laboratório</tr><tr><td><forte>Betadina</forte></td><td>Unidade de animais de</td><td></td><td></td> laboratório</tr><tr><td><forte>Buprenorfina</forte></td><td>Unidade</td><td></td> <td>de animais de laboratório</td></tr></tbody></table>

minimamente invasiva transversal aórtica constrição em ratos

Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice

Minimamente invasiva constrição da aorta transversal (MTAC) é um método mais conveniente para a constrição da aorta transversal em ratinhos que constrição padrão de tórax aberto transversal da aorta (TAC). Embora a constrição da aorta transversal é um método altamente funcional para a indução de alta pressão no ventrículo esquerdo, é um processo mais difícil e demorado devido ao seu uso de ventilação artificial com entubação traqueal. TAC é muitas vezes também menos de sobrevivência, como o método mais recente, MTAC, nem exige o corte das costelas e dos músculos intercostais nem intubação traqueal com uma configuração de ventilação. Em MTAC, por oposição ao de uma toracotomia para acesso à cavidade torácica, o arco aórtico é alcançado através de uma incisão na linha média anterior no pescoço. A tireóide é puxado para trás para revelar o entalhe esternal. O esterno é posteriormente reduzido para o segundo nível de costela, e o arco aórtico é alcançado simplesmente através da separação dos tecidos conjuntivos e timo. A partir deHá, um fio de sutura pode ser enrolado em torno do arco e amarrado com um espaçador, e em seguida, o corte do esterno e a pele pode ser fechada. MTAC é uma maneira muito mais rápida e menos invasiva para induzir hipertensão ventricular esquerda e permite a possibilidade de estudos de alto rendimento. O sucesso da constrição pode ser verificado usando-alta frequência ecocardiografia trans-torácica, especialmente Doppler colorido e pulsátil Doppler, para determinar as velocidades de fluxo do arco aórtico e à esquerda e artérias carótida direita, a dimensão dos vasos sanguíneos, e a função ventricular esquerda e morfologia. A constrição sucesso também irá desencadear alterações histopatológicas significativas, tais como hipertrofia das células do músculo cardíaco com fibrose intersticial e perivascular. Aqui, o procedimento de MTAC é descrita, demonstrando como as mudanças de fluxo resultantes nas artérias carótidas podem ser examinados com ecocardiografia, morfologia, e as alterações histopatológicas no coração.

MTAC permite a indução da hipertensão significativa no ventrículo esquerdo de uma forma atempada. Como visto na Figura 1, a preparação das ferramentas principais para o procedimento é simples e mínima, requerendo apenas 2-4 agulhas de calibre 30 para ser dobradas e mantidas no lugar com um tubo de poliuretano. O próprio procedimento cirúrgico também é menos complicado, como comparado a TAC, e pode ser realizad...

Minimamente invasiva constrição aórtica transversal (MTAC) conserva o essencial da constrição aórtica transversal regulares (TAC), eliminando o uso de um ventilador com intubação traqueal. Ele revela-se um método altamente desejável para os estudos de alto rendimento sobre a sobrecarga do ventrículo esquerdo, particularmente em estudos translacionais.

Minimamente Invasiva transversal aórtica constrição em Ratos

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard ...

O objetivo geral deste procedimento é induzir hipertrofia ventricular esquerda por meio da constrição do arco aórtico transverso com um procedimento cirúrgico simples que não requer ventilação artificial. Este método pode ajudar a responder perguntas fundamentais na área de cardiologia sobre remodelamento miocárdico, hipertrofia cardíaca, apoptose e fibrose, bem como condições de sobrecarga de pressão no ventrículo esquerdo. A principal vantagem desta técnica é que ela preserva os aspectos essenciais da constrição aórtica transversa convencional, ao mesmo tempo que elimina a necessidade de ventilador e intubação traqueal.Antes de iniciar o procedimento, utilize um porta-agulhas para curvar as pontas de duas a quatro agulhas de calibre 30 e monte as agulhas em aplicadores de algodão individuais. Em seguida, rompa a ponta de uma agulha de calibre 27 e use o porta-agulhas para dobrar a ponta em 90 graus. Depois, alise a ponta em uma superfície dura para formar um espaçador de 0,4 milímetro.Após confirmar o nível apropriado de sedação pela ausência de resposta ao aperto no dedo do pé, aplique pomada nos olhos do animal e posicione o camundongo em uma placa aquecida a 37 graus Celsius, na posição supina. Prenda as patas à placa aquecida com fita cirúrgica. Em seguida, desinfete a pele com três passagens consecutivas de álcool e solução de povidona-iodo e coloque um campo estéril com área operatória exposta sobre o animal.Para iniciar o procedimento de ligadura, utilize um escalpe estéril para abrir a pele na posição mediana do pescoço e do tórax. Em seguida, sob um microscópio estereoscópico, use uma tesoura romba para separar suavemente os tecidos conjuntivos e puxar a glândula tireoide em direção à cabeça. Com auxílio de agulhas curvas, separe a camada muscular na traqueia ao longo da linha mediana, para ambos os lados do animal, e use a tesoura romba para cortar o esterno aproximadamente cinco milímetros até a segunda costela.Abra a incisão com pin&ccedil;as curvas e use uma agulha curva para separar os lobos do timo e a parede inferior do t&oacute;rax. Nesse momento, o arco a&oacute;rtico transverso e as duas art&eacute;rias car&oacute;tidas ficar&atilde;o claramente vis&iacute;veis. Posicione a agulha curva sob o arco e use a ponta para fazer uma perfura&ccedil;&atilde;o entre a parede do vaso e o tecido conjuntivo do outro lado.Use a agulha para posicionar um fio de sutura monofilamento 6-0 sob o arco aórtico e coloque o espaçador previamente preparado dentro do laço. Fixe o fio com um nó duplo e remova suavemente o espaçador. Após confirmar a constrição bem-sucedida com o nó, corte as pontas do fio e use um fio de sutura de seda 6-0 para fechar a parede torácica com um padrão de sutura interrompida simples, seguido pelo fechamento da pele com um fio de sutura monofilamento 6-0 em um padrão de sutura contínua.Em seguida, aplique solução de povídon-iodo no local da sutura e coloque o animal em uma gaiola pré-aquecida para recuperação e monitoramento pós-operatório. Após uma semana, aplique gel eletrolítico nas patas do animal experimental e fixe-as com fita adesiva sobre uma plataforma aquecida a 37 graus Celsius com eletrodos. A seguir, aplique gel de ultrassom no tórax do camundongo e selecione o modo B em um sistema de ultrassom de alta frequência.Usando uma sonda MS550D de 40 megahertz, localize o ventrículo esquerdo. Em seguida, no modo M, meça a espessura da parede sistólica e diastólica. Retorne ao modo B para localizar a artéria carótida comum esquerda antes do ponto de bifurcação, e utilize onda pulsada e doppler colorido para avaliar o fluxo, armazenando as imagens para análise posterior conforme apropriado.Incline a plataforma de manipulação do animal para a extrema esquerda, de modo que o camundongo fique em posição decúbito lateral esquerdo, e posicione a sonda com um ângulo de 30 graus em relação a uma posição paralela à cabeça, na localização parasternal. Ajuste os torques x e y para identificar o arco aórtico e localize a constrição utilizando o modo Doppler colorido, para tornar o local da constrição mais visível. Com o uso do Doppler de onda pulsada e Doppler colorido, meça a velocidade máxima do fluxo no ponto onde o sangue flui entre as duas artérias carótidas que se originam do arco aórtico.Em seguida, permita que o animal se recupere sobre uma placa aquecida na posição prona com monitoramento até a recuperação completa. A constrição transversa da aorta minimamente invasiva, ou MTAC, produz de forma confiável sobrecarga de pressão no ventrículo esquerdo em camundongos ligados, com uma aorta transversa claramente visível e constrição aumentada da velocidade máxima do fluxo no local da constrição. Em comparação, o animal submetido a cirurgia simulada não demonstra constrição aparente, apresentando velocidade normal do fluxo máximo.Como consequência da ligadura, a velocidade do fluxo sanguíneo é significativamente aumentada na artéria carótida direita, e a pressão pode aumentar na aorta ascendente e no coração, levando ao desenvolvimento de hipertrofia ventricular esquerda, reduzindo significativamente o fluxo na artéria carótida comum esquerda. No entanto, um fluxo sanguíneo quase idêntico é observado nas artérias carótidas direita e esquerda no camundongo submetido a cirurgia simulada. Os parâmetros relacionados à hipertrofia resultante são facilmente observados nos corações significativamente aumentados e deformados de camundongos submetidos à ligadura MTAC, bem como na sua sobrevida geral reduzida.Essas alterações são ainda observadas ao nível celular, incluindo um aumento no tamanho das células musculares cardíacas e fibrose nos camundongos MTAC, em comparação com animais não ligados. Uma vez dominada, esta técnica pode ser concluída em cinco a dez minutos, se realizada corretamente. Ao tentar este procedimento, é importante lembrar-se de ter cuidado para não danificar os vasos.Após assistir a este vídeo, você deverá ter uma boa compreensão de como induzir hipertrofia ventricular esquerda por meio da constrição transversa do arco aórtico, utilizando um procedimento cirúrgico simples que não requer ventilação artificial.

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Constrição aórtica transversal (TAC) no rato é um modelo experimental comumente usado para estudar os mecanismos subjacentes a hipertrofia cardíaca eo desenvolvimento de insuficiência cardíaca. Aqui, descrevemos os procedimentos a constrição da aorta para criar um grau reprodutível de hipertrofia cardíaca em camundongos.

Constrição aórtica transversais em ratos

Neste vídeo, demonstramos um protocolo experimental para constrição aórtica transversa minimamente invasiva em camundongos para examinar a insuficiência cardíaca induzida por sobrecarga de pressão.

Bandagem do Arco Aórtico Transverso em Modelo de Camundongo: Uma Técnica Minimamente Invasiva em Camundongos para Indução de Alta Pressão no Ventrículo Esquerdo

O objetivo deste protocolo é avaliar de forma não invasiva alterações cardíacas estruturais e funcionais em um rato modelo da doença de coração criado por constrição aórtica transversal, usando B e M-mode ecocardiografia e cor / impulso de imagem onda Doppler.

Avaliação da morfológicas e funcionais cardíacas Mudanças no Modelo rato de Transverse aórtica constrição por ecocardiográfica de imagem

O objectivo do presente protocolo é descrever passo a passo a técnica de constrição da aorta transversa minimamente invasiva (TAC) em camundongos. Pela eliminação de intubação e ventilação que são obrigatórios para o procedimento padrão comumente usado, TAC minimamente invasiva simplifica o procedimento operatório e reduz o esforço de colocar o animal.

Técnica de constrição da aorta minimamente invasiva transversal em camundongos para indução de Hipertrofia Ventricular Esquerda

Aqui, apresentamos um protocolo de constrição transversal da aorta (TAC) através de uma toracotomia lateral. Esta técnica é um procedimento cirúrgico minimamente invasivo, fechado no peito, com o objetivo de simular a sobrecarga de pressão e de insuficiência cardíaca em ratos utilizando as configurações padrão de laboratório de TAC.

Um modelo de peito fechado para induzir a constrição da aorta transversa em ratos

Este protocolo apresenta um método aprimorado para obter hipertrofia miocárdia transitória com sutura absorvível, simulando diminuição da hipertrofia ventricular esquerda após a remoção da sobrecarga de pressão. Pode ser valioso para os estudos sobre pré-condicionamento hipertrófico do miocárdio.

Constrição aórtica transversal operacional com sutura absorvível para obter hipertrofia miocárica transitória

O presente protocolo descreve uma técnica modificada e simplificada com procedimento minimamente invasivo de constrição transversa da aorta (TAC) utilizando um afastador de fabricação própria. Esse procedimento pode ser realizado sem ventilador ou microscópio e introduz sobrecarga pressórica, eventualmente levando à hipertrofia cardíaca ou insuficiência cardíaca.

Técnica Modificada para Constrição Aórtica Transversa em Camundongos

Camundongos transgênicos têm sido extremamente úteis em atribuir função fisiológica para genes. Como a pesquisa, tal em geral, e estudos funcionais da via aérea, em particular, têm sofrido uma mudança notável na direção modelos murinos. Aqui nós fornecemos os protocolos...

Em medições in vitro de constrição traqueal Utilizando camundongos

Nós descrevemos um procedimento passo a passo para a criação de sobrecarga de pressão e hipertrofia ventricular esquerda em ratos Wistar pela constrição da aorta ascendente com clipe metálico pequeno. Este modelo é amplamente utilizado para o estudo de alterações de remodelação durante a hipertrofia cardíaca e para identificar e avaliar estratégias para a regressão de tais mudanças.

Aorta ascendente constrição em ratos para a criação de sobrecarga de pressão Cardíaca Hipertrofia Modelo

A técnica criada para inocular xenografts ortotópico de câncer de bexiga invasivo primário requer laparotomia e mobilização da bexiga. Este procedimento inflige morbidade significativa nos ratinhos, é tecnicamente difícil e demorado. Por isso, desenvolvemos um de alta precisão, a abordagem percutânea utilizando a orientação do ultra-som.

Minimamente Invasiva Estabelecimento de murino ortotópico bexiga Xenoenxertos

Aprenda a técnica de constricção transversal aórtica minimamente invasiva em ratos para induzir hipertrofia ventricular esquerda sem ventilação artificial. Este método simplifica estudos de remodelamento miocárdico em cardiologia.

Minimamente Invasiva transversal aórtica constrição em Ratos

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