Name: Analisando dendríticas Morfologia em Colunas e Camadas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-03-23T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 41 s
Description: Aprenda a analisar o roteamento dendrítico em neurônios da medula de Drosophila usando técnicas de imagem de dupla visualização e ferramentas computacionais em 3D. Este método avança a compreensão da morfologia dendrítica e do circuito neural.

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Este trabalho foi apoiado pelo Programa de Pesquisa Intramural dos Institutos Nacionais de Saúde, o Instituto Eunice Kennedy Shriver Nacional de Saúde Infantil e Desenvolvimento Humano (HD008913 subvenção para C.-HL) e do Centro de Tecnologia da Informação (PGM, NP, ESM e MM).

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<li>Huberman, A. D., Clandinin, T. R., Baier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+cellular+mechanisms+of+lamina-specific+axon+targeting%5BTitle%5D)+AND+%22CSH+Perspect+Biol%22%5BJournal%5D)">Molecular and cellular mechanisms of lamina-specific axon targeting.</a> CSH Perspect Biol. 2 (3), a001743(2010).</li>
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<li>Karuppudurai, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hard-wired+glutamatergic+circuit+pools+and+relays+UV+signals+to+mediate+spectral+preference+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">A hard-wired glutamatergic circuit pools and relays UV signals to mediate spectral preference in Drosophila.</a> Neuron. 81 (3), 603-615 (2014).</li>
<li>Strother, J. A., Nern, A., Reiser, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+observation+of+ON+and+OFF+pathways+in+the+Drosophila+visual+system%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Direct observation of ON and OFF pathways in the Drosophila visual system.</a> Curr Biol. 24 (9), 976-983 (2014).</li>
<li>Ting, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoreceptor-derived+activin+promotes+dendritic+termination+and+restricts+the+receptive+fields+of+first-order+interneurons+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Photoreceptor-derived activin promotes dendritic termination and restricts the receptive fields of first-order interneurons in Drosophila.</a> Neuron. 81 (4), 830-846 (2014).</li>
<li>Ting, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tiling+of+R7+axons+in+the+Drosophila+visual+system+is+mediated+both+by+transduction+of+an+activin+signal+to+the+nucleus+and+by+mutual+repulsion%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Tiling of R7 axons in the Drosophila visual system is mediated both by transduction of an activin signal to the nucleus and by mutual repulsion.</a> Neuron. 56 (5), 793-806 (2007).</li>
<li>Peng, H., Ruan, Z., Long, F., Simpson, J. H., Myers, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((V3D+enables+real-time+3D+visualization+and+quantitative+analysis+of+large-scale+biological+image+data+sets%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">V3D enables real-time 3D visualization and quantitative analysis of large-scale biological image data sets.</a> Nat Biotechnol. 28 (4), 348-353 (2010).</li>
<li>Takemura, S. Y., Lu, Z., Meinertzhagen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+circuits+of+the+Drosophila+optic+lobe%3A+the+input+terminals+to+the+medulla%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Synaptic circuits of the Drosophila optic lobe: the input terminals to the medulla.</a> J Comp Neurol. 509 (5), 493-513 (2008).</li>
<li>Takemura, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholinergic+circuits+integrate+neighboring+visual+signals+in+a+Drosophila+motion+detection+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Cholinergic circuits integrate neighboring visual signals in a Drosophila motion detection pathway.</a> Curr Biol. 21 (24), 2077-2084 (2011).</li>
<li>Keller, P. J., Schmidt, A. D., Wittbrodt, J., Stelzer, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reconstruction+of+zebrafish+early+embryonic+development+by+scanned+light+sheet+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Reconstruction of zebrafish early embryonic development by scanned light sheet microscopy.</a> Science. 322 (5904), 1065-1069 (2008).</li>
<li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatially+isotropic+four-dimensional+imaging+with+dual-view+plane+illumination+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Spatially isotropic four-dimensional imaging with dual-view plane illumination microscopy.</a> Nat Biotechnol. 31 (11), 1032-1038 (2013).</li>
<li>Popko, J., Fernandes, A., Brites, D., Lanier, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+analysis+of+NeuronJ+tracing+data%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">Automated analysis of NeuronJ tracing data.</a> Cytometry A. 75 (4), 371-376 (2009).</li>
<li>Meijering, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+validation+of+a+tool+for+neurite+tracing+and+analysis+in+fluorescence+microscopy+images%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">Design and validation of a tool for neurite tracing and analysis in fluorescence microscopy images.</a> Cytometry A. 58 (2), 167-176 (2004).</li>
<li>Pool, M., Thiemann, J., Bar-Or, A., Fournier, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NeuriteTracer%3A+a+novel+ImageJ+plugin+for+automated+quantification+of+neurite+outgrowth%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">NeuriteTracer: a novel ImageJ plugin for automated quantification of neurite outgrowth.</a> J Neurosci Methods. 168 (1), 134-139 (2008).</li>
<li>Scorcioni, R., Polavaram, S., Ascoli, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((L-Measure%3A+a+web-accessible+tool+for+the+analysis%2C+comparison+and+search+of+digital+reconstructions+of+neuronal+morphologies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">L-Measure: a web-accessible tool for the analysis, comparison and search of digital reconstructions of neuronal morphologies.</a> Nat Protoc. 3 (5), 866-876 (2008).</li>
<li>Kaplan, E. L., Meier, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonparametric+Estimation+from+Incomplete+Observations%5BTitle%5D)+AND+%22JASA%22%5BJournal%5D)">Nonparametric Estimation from Incomplete Observations.</a> JASA. 53, 457-481 (1958).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a revelar.

Aqui, vamos mostrar como imagem e analisar mandris dendríticas dos neurônios da medula Drosophila. A primeira seção, dual-view de imagem, descreve a deconvolução e combinação de duas pilhas de imagens em uma pilha de imagens de alta resolução. A segunda seção, o rastreamento dendrite e registro, descreve a detecção e registo das dendrites dos neurónios da medula para a matriz coluna de referência. A terceira seção, a análise dendrítica, descreve o uso de scripts personalizados para analisar os padrões dendrític...

Durante o desenvolvimento, os neurônios dendritos elaborados em complexos mas estereotipados padrões ramificados para formar sinapses com os seus parceiros pré-sinápticos. padrões de ramificação dendríticas correlacionar com a identidade e as funções neuronais. Os locais de mandris dendríticas determinar o tipo de entradas pré-sinápticos que recebem, enquanto o dendríticas ramificação tamanhos de complexidade e de campo governar o número de entrada. Assim, as propriedades morfológicas dendríticas constituem factores determinantes para a conectividade sináptica e computação neuronal. Em muitas regiões do cérebro complexas, tais como os lóbulos óptica da mosca e a retina dos vertebrados, circuitos sinápticos são organizadas em colunas e camadas para facilitar o processamento de informação 1, 2. Em tal organização coluna e camada, os neurónios pré-sinápticos de distintos axónios projecto modalidade para terminar numa camada específica (os chamados direccionamento específico de camada) e para formar uma matriz bi-dimensional ordenada (de modo-Called mapa topográfico), enquanto os neurônios pós-sinápticos estender dendritos de tamanhos adequados em camadas específicas para receber entradas pré-sinápticas dos tipos e números corretos. Enquanto axonal direcionamento para as camadas e colunas tem sido bem estudada 3, 4, muito menos se sabe sobre como dendritos são encaminhadas para camadas específicas e expandir adequadamente dimensionada campos receptivos para formar conexões sinápticas com os parceiros pré-sinápticos corretos 5. A dificuldade de imagem e quantificar dendrítica direcionamento para as camadas e colunas tem dificultado o estudo do desenvolvimento dendrítica em estruturas cerebrais colunar e laminados. Drosophila neurônios da medula é um modelo ideal para o estudo de roteamento dendrítica e montagem de circuito em colunas e camadas. O neurópilo mosca medula é organizado como uma estrutura 3D de 10 camadas e aproximadamente 750 colunas. Cada coluna é inervado por um conjunto de fibras aferentes, incluindo photoreceptors R7 / R8 e neurônios da lâmina L1 - L5, cujos terminais axonal formar mapas topográficos de uma forma específica de camada 6. Cerca de 38 tipos de neurônios da medula estão presentes em cada coluna de medula e dendrites elaboradas em camadas específicas e com tamanhos de campo adequados para receber as entradas a partir destes aferentes 7. Os circuitos sinápticos na medula foram reconstruídos no nível do microscópio electrónico; Assim, as parcerias sinápticas estão bem estabelecidos 7, 8. Além disso, as ferramentas genéticas para a marcação de vários tipos de neurónios de medula são disponíveis 9, 10, 11. Ao examinar três tipos de transmedulla (TM) neurônios (Tm2, Tm9 e TM20), já anteriormente identificados dois atributos específicos de células do tipo-dendríticas: (i) neurônios Tm projetam dendrites quer na direcção anterior ou posterior (proj planardirecção exão), dependendo dos tipos de células e (ii) dendrites dos neurónios de medula terminam em camadas específicas da medula de uma forma específica de célula do tipo-(terminação específica de camada) 12. Planar direção de projeção e terminação específica camadas são suficientes para diferenciar estes três tipos de neurônios Tm, enquanto que mutações que perturbam respostas TM para camada e coluna pistas prejudica aspectos distintos desses atributos. Aqui, apresentamos um fluxo de trabalho completo para examinar o padrão dendrítica de neurônios da medula Drosophila em colunas e camadas (Figura 1). Em primeiro lugar, vamos mostrar um método de imagem dual-view, que usa software personalizado para combinar dois imagem confocal pilhas para gerar imagens isotrópicas de alta qualidade. Este método necessita apenas de microscopia confocal convencional para gerar imagens de alta qualidade que permitem o rastreio de confiança de ramos dendríticos, sem recorrer à microscopia de super-resolução, tals STED (Emissão Estimulada de Esgotamento) ou iluminação estrutural. Em segundo lugar, apresentamos um método para rastrear mandris dendríticas e para registrar os traços neurite resultantes para uma matriz coluna de referência. Em terceiro lugar, podemos mostrar os métodos computacionais para a extracção de informação sobre a direcção de projecção planar e terminação específica de camada de dendritos, bem como para derivar estimativas para a ramificação e de terminação frequências dendríticas. Juntos, estes métodos permitem a caracterização dos padrões dendríticas em 3D, a classificação de tipos de células com base em morfologias dendríticas, e a identificação de possíveis defeitos em mutantes.

<table><tbody><tr><td>Software</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Huygens Professional</td><td>Scientific Volume Imaging</td><td>versão 16.05</td><td>para deconvolução de imagem (https://svi.nl).&nbsp; software comercial</td></tr><tr><td>MIPAV</td><td></td><td>versão 7.3.0</td><td>para recombinação e registro de imagem (http://mipav.cit.nih.gov/);</td></tr><tr><td>plug-in MIPAV freeware: PlugInDrosophila Plugin</td><td>MIPAV freeware</td>RetinalRegistration.class<td></td><td></td></tr><tr><td>: PlugInDrosophilaStandard ColumnRegistration.class</td><td></td><td></td><td>freeware</td></tr><tr><td>Imaris</td><td>Bitplane</td><td></td><td>para rastrear neurites e atribuir pontos de referência para registro de imagens (http://www.bitplane.com); software comercial</td></tr><tr><td>Vaa3D</td><td></td><td></td><td>para visualização de arquivos swc ( https://github.com/Vaa3D/release/releases/); freeware</td></tr><tr><td>Matlab</td><td>Mathworks</td><td>R2014b</td><td>para análise morfométrica de dendritos (http://www.mathworks.com); software comercial</td></tr><tr><td>Caixa de ferramentas Matlab: TREES1.14</td><td></td><td>v1.14</td><td>para análise de parâmetros morfométricos dendríticos (http://www.treestoolbox.org/download.html); caixa de ferramentas Matlab freeware</td></tr><tr><td>: Dendritic_Tree_Toolbox</td><td></td><td>v1.0</td><td>Para o cálculo dos parâmetros morfométricos (https://science.nichd.nih.gov/confluence/display/snc/Data+collections+for+imagines+combination+and+standardize+column+registration). Freeware</td></tr><tr><td>Nome</td><td>Empresa</td><td>Número de catálogo</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Sample files</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>SWC definição</td><td></td><td></td><td>de arquivo http://www.neuronland.org/NLMorphologyConverter/MorphologyFormats/SWC/Spec.html</td></tr><tr><td>Os códigos e arquivos de amostra para combinação e registro</td><td></td><td></td><td>de imagens https://science.nichd.nih.gov/confluence/display/snc/Data+collections+for+imagines+combination+and+standardize+column+registration</td></tr><tr><td>Exemplo de ponto de referência&nbsp;</td><td></td><td></td><td>https://science.nichd.nih.gov/confluence/download/attachments/117216914/points.csv?version=1&modificationDate= 1471880596000&api=v2</td></tr><tr><td>Nome</td><td>Empresa</td><td>Número de catálogo</td><td>Comentários</td></tr><tr><td>Sistema de computador</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>MS Windows Windows 7 x64 ou Macintosh OS X 10.7 ou posterior</td><td></td><td></td><td>Processador quad-core de 3GHz 64 bits, 16G RAM (mínimo)</td></tr><tr><td>Opcional: Quadro4000&nbsp; (ou acima) placa gráfica</td><td>Nvidia</td><td></td><td>para visualização estereográfica de dendritos.</td></tr><tr><td>Opcional: NVIDIA 3D vision2</td><td>Nvidia</td><td></td><td>http://www.nvidia.com/object/3d-vision-main.html</td></tr><tr><td>Opcional: Tela LCD de 120 Hz para NVIDIA 3D vision2</td><td></td><td></td><td>http://www.nvidia.com/object/3d-vision-system-requirements.html</td></tr><tr><td>Nome</td><td>Empresa</td><td>Número de catálogo</td><td>Comentários</td></tr><tr><td>Reagentes para imagem</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>24B10 anticorpo</td><td>Os Estudos de Desenvolvimento Hybridoma Bank</td><td>24B10</td><td></td></tr><tr><td>GFP Tag Anticorpo</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>G10362</td><td></td></tr><tr><td>Goat anti-Rabbit (H+L), Alexa Fluor 488</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A11034</td><td></td></tr><tr><td>Goat anti-Mouse (H+L), Alexa Fluor 568</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A21124</td><td></td></tr><tr><td>VECTASHIELD Antifade Montagem Média</td><td>Vector Laboratories</td><td>H-1000</td><td></td></tr><tr><td>Montagem&nbsp; Argila&nbsp;</td><td>Fisher</td><td>S04179</td><td></td></tr><tr><td>70% glicerol em 1x PBS</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Capa de vidros, alto desempenho, D = 0.17&nbsp; milímetro</td><td>Zeiss</td><td>474030-9000-000</td><td></td></tr></tbody></table>

analisando dendríticas morfologia em colunas e camadas

Analyzing Dendritic Morphology in Columns and Layers

Em muitas regiões do sistema nervoso central, tais como os lóbulos óptica da mosca e do córtex vertebrado, circuitos sinápticos são organizados em camadas e colunas para facilitar a conexão cerebral durante o desenvolvimento e processamento da informação nos animais desenvolvidos. neurônios pós-sinápticos dendritos elaborados nos padrões específicos do tipo em camadas específicas para sinapse com terminais pré-sinápticos apropriados. O neurópilo mosca medula é composta de 10 camadas e cerca de 750 colunas; cada coluna é enervado pelo dendritos de mais de 38 tipos de neurônios da medula, que combinam com os terminais axonal de cerca de 7 tipos de aferentes de uma forma específica do tipo. Este relatório detalha os procedimentos para a imagem e analisar dendrites dos neurónios da medula. O fluxo de trabalho inclui três seções: (i) a secção de imagem dual-view combina duas pilhas de imagens confocal coletadas em orientações ortogonais em um de alta resolução de imagem 3D de dendrites; (Ii) a dendrite rastreamento e secção de registo traça dendríticamandris em 3D e registra traços dendríticas para a matriz coluna de referência; (Iii) a secção de análise dendrítica analisa padrões dendríticas em relação às colunas e camadas, incluindo terminação e de projecção planar direcção específica da camada de mandris dendríticas, e obtém estimativas de ramificação e de terminação frequências dendríticas. Os protocolos utilizam plugins personalizados construídos na MIPAV open-source (Medical Imaging processamento, análise e visualização) da plataforma e personalizadas caixas de ferramentas na linguagem laboratório matriz. Juntos, estes protocolos de fornecer um fluxo de trabalho completo para analisar o encaminhamento dendríticas de medula neurónios de Drosophila em camadas e colunas, para identificar os tipos de células, e para determinar defeitos de mutantes.

Usando o procedimento de imagem dupla vista aqui apresentado, uma mosca contendo neurónios do cérebro TM20 escassamente marcado foi fotografada em duas direcções ortogonais. Antes da imagem, o cérebro foi corado com anticorpos primários e secundários apropriados para visualizar GFP e fotorreceptoras axônios membrana-tethered. Para imagiologia, o cérebro foi montado pela primeira vez na orientação horizontal (Figura 2A, B). Um neurónio TM20 marcado com GFP e os axónios fo...

Aqui, mostramos como analisar roteamento dendrítica de neurônios da medula Drosophila em colunas e camadas. O fluxo de trabalho inclui uma técnica de imagem dual-vista a melhorar a qualidade de imagem e ferramentas computacionais para a detecção, registrar mandris dendríticas para a matriz coluna de referência e para analisar as estruturas dendríticas no espaço 3D.

Analisando dendríticas Morfologia em Colunas e Camadas

In many regions of the central nervous systems, such as the fly optic lobes and the vertebrate cortex, synaptic circuits are organized in layers and ...

O objetivo geral deste protocolo é analisar o trajeto dendrítico de neurônios da medula de drosófila adulta em colunas e camadas, a fim de caracterizar padrões dendríticos, determinar tipos celulares com base na morfologia e identificar mutantes. Este método pode ajudar a responder perguntas fundamentais na área da neurociência, incluindo o mapeamento da circuitaria cerebral e a compreensão do mecanismo de conexão dos dendritos. A principal vantagem desta técnica é que ela transmite as propriedades dendríticas no espaço tridimensional, melhorando assim a compreensão da lógica e das funções do arranjo dendrítico.O objetivo deste procedimento é obter duas pilhas de imagens dos neurônios de interesse em duas orientações ortogonais, horizontais e frontais. Utilizando técnicas padrão, marque cérebros de moscas dissecados com anticorpo primário coelho anti-GFP e um anticorpo que rotula axônios de fotorreceptores. Em seguida, marque os anticorpos primários com anticorpos secundários fluorescentes e clarifique o cérebro em glicerol 70% e PBS 1X.Para montar o cérebro na orientação horizontal, transfira um cérebro clareado com glicerol para uma gota de 20 microlitros de meio de montagem com

analyzing-dendritic-morphology-in-columns-and-layers

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Numerosos estudos recentes identificaram mutações em proteínas sinápticas associada a patologias cerebrais. Primários cultivados neurônios corticais oferecem grande flexibilidade para examinar os efeitos destas proteínas doenças associadas na morfologia e motilidade espinha dendrítica.

Análise de Morfologia Spine dendríticas em neurônios cultivados CNS

A arborização dendrítica de neurônios sensoriais...

Análise morfológica de Drosophila Larval sensorial periférica Dendrites Neuron e axônios Usando Mosaicos Genéticos

Apresenta-se um protocolo que permite visualizar e para avaliar quantitativamente a morfologia da árvore dendrítico das células de Purkinje individuais crescidas em culturas organotípicas do cerebelo. Este protocolo destina-se a promover estudos sobre os mecanismos de Purkinje desenvolvimento de células dendríticas.

A Análise de Purkinje Morfologia de células dendríticas em Culturas fatia organotípicas

Fonte: Ting, C., et al., Analisando a morfologia dendrítica em colunas e camadas. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o procedimento de preparação de um cérebro de Drosophila, capturando pilhas de imagens horizontais e frontais de dendritos de medula marcados com GFP sob um microscópio confocal e criando uma reconstrução 3D para analisar sua morfologia em camadas e colunas.

Analisando a morfologia dendrítica em camadas e colunas de medula de Drosophila

Descrevemos dois métodos para visualização e quantificação da arborização dendrítica no hipocampo de modelos de camundongos: imagens em tempo real e de profundidade de campo estendida. Enquanto o primeiro método permite um rastreamento topográfico sofisticado e a quantificação da extensão da ramificação, o último permite a visualização rápida da árvore dendrítica.

Avaliação de dendríticas Arborização no giro dentado do hipocampo em Ratos Região

Aqui apresentamos um protocolo Golgi-Cox com detalhes detalhados. Este método de mancha de tecido confiável permite uma avaliação de alta qualidade da citoarquitetura no hipocampo e em todo o cérebro, com solução de problemas mínima.

Avaliação da complexidade dendrítica do hipocampo em ratos idosos usando o método de Golgi-Cox

Este protocolo centra-se na análise quantitativa de complexidade arborização dendrítica neuronal (NDAC) em Drosophila, que pode ser usado para estudos da morfogênese dendrítica.

Análise quantitativa da arborização dendrítica Neuronal complexidade em Drosophila

Apresentamos um protocolo para rotular e analisar neurônios piramidais, o que é fundamental para avaliar possíveis alterações morfológicas em neurônios e espinhas dendríticas que podem estar por trás de anormalidades neuroquímicas e comportamentais.

Rotulagem Balística de Neurônios Piramidais em Fatias Cerebrais e na Cultura Celular Primária

A morfologia dendrítica neuronal muitas vezes está por trás da função. De fato, muitos processos de doenças que afetam o desenvolvimento de neurônios se manifestam com um fenótipo morfológico. Este protocolo descreve um método simples e poderoso para analisar arbores dendríticas intactas e suas espinhas associadas.

Imagem e quantificação de dendritos neuronais intactos via clareza de tecido

Apresentado é uma ferramenta computacional que permite a medição automática simples e direta das orientações de ramos dendríticas neuronais a partir de imagens de fluorescência 2D.

Identificação Automática de Ramos Dendráticos e sua Orientação

As espinhas dendríticas são compartimentos pós-sinápticos da maioria das sinapses excitatórias. Alterações na morfologia da coluna dendrítica ocorrem durante o neurodesenvolvimento, envelhecimento, aprendizado e muitos distúrbios neurológicos e psiquiátricos, ressaltando a importância de uma análise confiável da coluna dendrítica. Este protocolo descreve a quantificação da morfologia da coluna dendrítica de forma precisa e reprodutível usando um software automático de reconstrução...

Quantificação da coluna dendrítica usando um software automático de reconstrução tridimensional de neurônios

Aprenda a analisar o roteamento dendrítico em neurônios da medula de Drosophila usando técnicas de imagem de dupla visualização e ferramentas computacionais em 3D. Este método avança a compreensão da morfologia dendrítica e do circuito neural.

Analisando dendríticas Morfologia em Colunas e Camadas

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