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Usando dispositivos microfluídicos medir Longevidade e Celular fenótipos em células individuais l...
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JoVE Journal Biology
Using Microfluidic Devices to Measure Lifespan and Cellular Phenotypes in Single Budding Yeast Cells

Usando dispositivos microfluídicos medir Longevidade e Celular fenótipos em células individuais levedura de brotamento

Full Text
8,212 Views
09:18 min
March 30, 2017

DOI: 10.3791/55412-v

Ke Zou1,2, Diana S. Ren2, Qi Ou-yang1,3, Hao Li2, Jiashun Zheng2

1The State Key Laboratory for Artificial Microstructures and Mesoscopic Physics, School of Physics,Peking University, 2Department of Biochemistry and Biophysics,University of California, San Francisco, 3Peking-Tsinghua Center for Life Sciences at Center for Quantitative Biology, Academy for Advanced Interdisciplinary Studies,Peking University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este artigo apresenta um protocolo optimizado para a produção de batatas fritas de microfluidos e a configuração de experiências de microfluidos para medir o tempo de vida e fenótipos celulares de células de levedura individuais.

O objetivo geral deste experimento é fazer um dispositivo microfluídico especializado e usá-lo para medir a vida útil e os fenótipos celulares de uma única célula de levedura. Este método pode ajudar a responder a algumas das principais questões no campo do envelhecimento por leveduras, como por que as células-mãe envelhecem e morrem e quais são os eventos moleculares anteriores que impulsionam a perda da homeostase celular e, eventualmente, o envelhecimento e a morte celular? A principal vantagem dessa técnica é que podemos rastrear células-mãe, rastrear sua vida útil e os vários marcadores moleculares ao mesmo tempo, para que possamos procurar eventos moleculares que se correlacionem com a vida útil.

Embora esse método possa fornecer informações sobre o envelhecimento da levedura, ele também pode ser aplicado a outras áreas, como o monitoramento de respostas secundárias à participação que requer verificação celular por muitas gerações. Geralmente, os indivíduos novos neste método terão dificuldades porque a fabricação de dispositivos microfluídicos, o carregamento de células e a configuração do microscópio exigem muita prática para serem executados com sucesso. A demonstração prévia deste método é crítica, pois é difícil carregar adequadamente o dispositivo microfluídico com levedura.

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