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DOI: 10.3791/55412-v
Ke Zou1,2, Diana S. Ren2, Qi Ou-yang1,3, Hao Li2, Jiashun Zheng2
1The State Key Laboratory for Artificial Microstructures and Mesoscopic Physics, School of Physics,Peking University, 2Department of Biochemistry and Biophysics,University of California, San Francisco, 3Peking-Tsinghua Center for Life Sciences at Center for Quantitative Biology, Academy for Advanced Interdisciplinary Studies,Peking University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Este artigo apresenta um protocolo optimizado para a produção de batatas fritas de microfluidos e a configuração de experiências de microfluidos para medir o tempo de vida e fenótipos celulares de células de levedura individuais.
O objetivo geral deste experimento é fazer um dispositivo microfluídico especializado e usá-lo para medir a vida útil e os fenótipos celulares de uma única célula de levedura. Este método pode ajudar a responder a algumas das principais questões no campo do envelhecimento por leveduras, como por que as células-mãe envelhecem e morrem e quais são os eventos moleculares anteriores que impulsionam a perda da homeostase celular e, eventualmente, o envelhecimento e a morte celular? A principal vantagem dessa técnica é que podemos rastrear células-mãe, rastrear sua vida útil e os vários marcadores moleculares ao mesmo tempo, para que possamos procurar eventos moleculares que se correlacionem com a vida útil.
Embora esse método possa fornecer informações sobre o envelhecimento da levedura, ele também pode ser aplicado a outras áreas, como o monitoramento de respostas secundárias à participação que requer verificação celular por muitas gerações. Geralmente, os indivíduos novos neste método terão dificuldades porque a fabricação de dispositivos microfluídicos, o carregamento de células e a configuração do microscópio exigem muita prática para serem executados com sucesso. A demonstração prévia deste método é crítica, pois é difícil carregar adequadamente o dispositivo microfluídico com levedura.
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