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Rato pulmão Slices para Visualize células vivas pulmonar dendríticas precisão de corte
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JoVE Journal Immunology and Infection
Precision-cut Mouse Lung Slices to Visualize Live Pulmonary Dendritic Cells

Rato pulmão Slices para Visualize células vivas pulmonar dendríticas precisão de corte

Full Text
18,596 Views
09:33 min
April 5, 2017

DOI: 10.3791/55465-v

Miranda R. Lyons-Cohen1, Seddon Y. Thomas1, Donald N. Cook1, Hideki Nakano1

1Immunity, Inflammation, and Disease Laboratory, Division of Intramural Research,National Institute of Environmental Health Sciences, NIH

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article describes a method for generating precision-cut lung slices (PCLS) to visualize immune cell localization in the lung. The technique allows for the observation of various immune cell types and their interactions in a live ex vivo environment.

Key Study Components

Area of Science

  • Immunology
  • Cell Biology
  • Respiratory Physiology

Background

  • Precision-cut lung slices maintain the three-dimensional architecture of lung tissue.
  • This method enables visualization of immune cell trafficking and localization.
  • It can also assess airway and smooth muscle tissue contraction.
  • The technique is applicable for studying inflammation in the lung.

Purpose of Study

  • To visualize the localization and migration patterns of immune cells in the lung.
  • To provide insights into immune responses during inflammation.
  • To explore interactions between different cell types in lung tissue.

Methods Used

  • Harvesting lung tissue from six to 12 week old mice.
  • Using scissors to open the abdominal cavity and access the lungs.
  • Draining blood from the lungs by snipping the inferior vena cava.
  • Puncturing the diaphragm to allow ribcage expansion.

Main Results

  • Successful visualization of immune cell localization in lung slices.
  • Demonstrated the ability to track immune cell migration patterns.
  • Provided insights into the interactions of immune cells with lung tissue.
  • Showed potential for studying airway and smooth muscle contraction.

Conclusions

  • The PCLS method is a valuable tool for immunological research.
  • It allows for real-time observation of immune cell dynamics.
  • This technique can enhance understanding of lung immunology.

Frequently Asked Questions

What are precision-cut lung slices?
Precision-cut lung slices are thin sections of lung tissue that maintain the three-dimensional architecture and can be used for live imaging studies.
How can this method be applied in research?
This method can be used to study immune cell behavior, interactions, and responses in the lung under various conditions, including inflammation.
What are the advantages of using PCLS?
PCLS allows for the visualization of live tissue interactions while preserving the native structure of the lung, enabling more accurate studies of cellular dynamics.
Is this method applicable to other cell types?
Yes, the protocol can be adapted to visualize various cell types beyond immune cells, depending on the research focus.
What is the significance of studying immune cells in the lung?
Understanding immune cell localization and behavior in the lung is crucial for insights into respiratory diseases and inflammatory responses.
Can this method be used for therapeutic research?
Yes, it can help in evaluating the effects of potential therapies on immune cell behavior and lung tissue responses.

Descreve-se um método para a geração de corte de precisão pulmonar fatias (PCLS) e imunocoloração-los para visualizar a localização de vários tipos de células imunitárias no pulmão. Nosso protocolo pode ser estendido para visualizar a localização e função de muitos tipos diferentes de células sob uma variedade de condições.

O objetivo geral deste método é usar fatias de pulmão de corte preciso, ou PCLS, para visualizar a localização e o tráfego de vários tipos de células imunes no pulmão. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da imunologia, como os padrões de localização e migração de células imunes no pulmão. A principal vantagem dessa técnica é que várias interações podem ser visualizadas no tecido vivo ex vivo que mantém a arquitetura tridimensional do pulmão.

Embora esse método possa fornecer informações sobre a localização e o tráfego de células imunes durante a inflamação, ele também pode ser usado para visualizar a contração das vias aéreas e do tecido muscular liso. Para colher o tecido pulmonar, primeiro use uma tesoura para abrir a pele e o peritônio do meio do abdômen até a mandíbula de um camundongo de seis a 12 semanas de idade e mova os intestinos para o lado da cavidade abdominal. Corte a veia cava inferior para drenar o sangue dos pulmões e use a ponta afiada da tesoura para perfurar o diafragma para permitir a expansão da caixa torácica.

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