Using a Fluorescent PCR-capillary Gel Electrophoresis Technique to Genotype CRISPR/Cas9-mediated Knockout Mutants in a High-throughput Format

Muhammad Khairul Ramlee; Jing Wang; Alice M. S. Cheung; Shang Li

doi:10.3791/55586

/

Usando uma técnica de PCR fluorescente-capilar Electroforese em Gel de genótipo CRISPR / cas9 mediada KO mutantes em um formato de elevado rendimento

Using a Fluorescent PCR-capillary Gel Electrophoresis Technique to Genotype CRISPR/Cas9-mediated Knockout Mutants in a High-throughput Format

JoVE Journal
Genética

É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.

JoVE Journal Genética

Using a Fluorescent PCR-capillary Gel Electrophoresis Technique to Genotype CRISPR/Cas9-mediated Knockout Mutants in a High-throughput Format

Usando uma técnica de PCR fluorescente-capilar Electroforese em Gel de genótipo CRISPR / cas9 mediada KO mutantes em um formato de elevado rendimento

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

13,704 Views

•

08:25 min

•

April 08, 2017

DOI:

10.3791/55586-v

DOI:

10.3791/55586-v

•

08:25 min

April 08, 2017

•

3 Views

Muhammad Khairul Ramlee¹, Jing Wang¹, Alice M. S. Cheung¹, Shang Li¹

¹Cancer & Stem Cell Biology Programme,Duke-NUS Medical School

Transcrição

Summary

A técnica de genotipagem descrito aqui, que acopla reacção em cadeia da polimerase fluorescente (PCR) para electroforese em gel capilar, permite a genotipagem de alto rendimento de clones knockout mediada por nucleases. É contorna as limitações enfrentadas por outras técnicas de genotipagem e é mais rentável do que os métodos de sequenciação.