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DOI: 10.3791/55722-v
Yueying Li2, Yong Hai1, Jiayu Chen3, Tie Liu1
1Department of Orthopedics, Beijing Chao-Yang Hospital,Capital Medical University, 2Key Laboratory of Genomic and Precision Medicine, Beijing Institute of Genomics,Chinese Academy of Sciences, 3Clinical and Translational Research Center of Shanghai First Maternity & Infant Hospital, School of Life Sciences and Technology,Tongji University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines the generation of chondrogenic lineage cells from human peripheral blood-derived induced pluripotent stem cells (iPSCs) using an integration-free method. The technique is designed to facilitate cartilage regeneration research by utilizing patient-derived cells.
Apresentamos um protocolo para gerar uma linhagem condrogênica de sangue periférico humano (PB) através de células-tronco pluripotentes induzidas (iPSCs) usando um método livre de integração, que inclui a formação de corpo embrionóide (EB), expansão de células fibroblásticas e indução condrogênica.
O objetivo geral deste procedimento é gerar células de linhagem condrogênica a partir de células-tronco pluripotentes induzidas derivadas do sangue periférico humano, ou células IPS. Este método pode ajudar a responder às principais questões no campo da regeneração da cartilagem sobre o uso de células sanguíneas periféricas derivadas do paciente como células C para a geração de células IPS para reparo da cartilagem. As principais vantagens desta técnica são que ela é facilmente reprodutível, e a diferenciação de condrócitos ocorre nas condições sérica e livre de xeno.
Comece colocando células IPS humanas em meio IPSC humano de quatro mililitros em uma placa de cultura de tecidos de 60 milímetros contendo uma monocamada de células alimentadoras de fibroblastos embrionários de camundongo irradiadas. Cultive as células a 37 graus Celsius em cinco por cento de dióxido de carbono. Quando as células-tronco forem 80 a 90 por cento confluentes, dissocie as células com solução dispace para subcultura.
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