25 de maio de 2017
A degeneração do disco intervertebral é um contribuinte significativo para dor nas costas e uma das principais causas de incapacidade em todo o mundo. Existem numerosos modelos animais de degeneração de disco intervertebral. Demonstramos um modelo ovino de degeneração de disco intervertebral, utilizando uma broca, o que atinge uma lesão de disco consistente e nível reprodutível de degeneração de disco.
O objetivo geral desta abordagem retroperitoneal lateral, método de lesão do disco intervertebral da broca é criar um modelo ovino seguro, consistente e reprodutível de discos intervertebrais degenerativos. Este modelo de degeneração do disco intervertebral lombar ovino pode ajudar a responder a questões-chave no campo da pesquisa translacional da coluna vertebral, fornecendo outro método para investigar o caminho ou a fisiologia da degeneração do disco e a investigação potencial de terapias regenerativas. A principal vantagem dessa abordagem é que ela permite uma lesão cirúrgica consistente por meio de uma abordagem cirúrgica segura em um modelo animal apropriado.
Após anestesiar e intubar uma ovelha e preparar a sala cirúrgica de acordo com o protocolo de texto, coloque o animal na mesa cirúrgica na posição lateral direita. Usando cortadores eletrônicos, raspe a região definida superiormente pelas costelas inferiores, inferiormente pelo osso ilíaco, medialmente pelos processos transversos lombares contralaterais e aproximadamente 10 centímetros laterais aos processos transversos lombares ipsilaterais. Palpe a crista ilíaca, os processos transversos lombares e cruze um ângulo vertebral para os pontos de referência para este local de incisão cirúrgica.
Em seguida, use uma caneta estéril para marcar esses pontos de referência. Em seguida, com lavagem anti-séptica de clorexidina e iodo com álcool, desinfete o abdômen lateral. Em seguida, coloque um campo quadrado fenestrado estéril sobre o local da cirurgia e um grande campo quadrado estéril na mesa superior, seguido pelos instrumentos estéreis.
Sob ampliação cirúrgica da lupa e um farol, injete anestésico local e, em seguida, use uma lâmina de bisturi 22 presa a um cabo de quatro bisturis para fazer uma incisão longitudinal paralela e um centímetro anterior a um a dois processos transversos lombares acima e abaixo dos níveis de interesse do disco intervertebral. Usando diatermia monopolar, divida o tecido subcutâneo subjacente e o aspecto lateral da musculatura da parede abdominal. Direcionando a dissecção para as pontas dos processos transversos lombares, acima e abaixo dos discos intervertebrais de interesse.
Em seguida, divida a fáscia toracolombar longitudinalmente em sua ligação aos processos transversos. Visualize e preserve o quadrado lombar subjacente, os músculos sóleo e os feixes neurovasculares que atravessam. Usando diatermia, mantenha a hemostasia durante o procedimento.
Varra os dedos entre o plano do peritônio e a musculatura da parede abdominal posterior nos níveis do disco intervertebral exposto para realizar a dissecção digital romba. Agora, usando o afastador diva, retraia os músculos quadrado lombar e sóleo posteriormente lateralmente para expor ainda mais os discos intervertebrais. Em seguida, palpe os corpos intervertebrais côncavos e os discos intervertebrais convexos.
Posicione os retratores imediatamente sobre os discos e tome cuidado para que os vasos lombares não sejam danificados. Em seguida, usando a ampliação cirúrgica da lupa com o farol, identifique os vasos lombares que estão localizados aproximadamente um centímetro caudal à placa terminal inferior. Após realizar uma radiografia lateral intraoperatória para confirmar o nível do disco, dependendo dos níveis de disco desejados, exponha os discos intervertebrais separando as estruturas circundantes.
Para os níveis L três, quatro e acima, use dissecção digital romba para varrer as inserções musculares sobre os discos. Para os níveis L quatro, cinco e abaixo, use uma tesoura diatérmica bipolar para dividir nitidamente as inserções musculares do tendão mais espessas sobre o disco. Defina o ponto de lesão da broca observando as extremidades laterais e internas esquerdas no disco intervertebral.
O nível do disco deve ser confirmado com radiografia lateral antes da lesão da broca. Encaixe uma broca de ponta grossa na furadeira elétrica. Certifique-se de que o diâmetro da broca seja ligeiramente menor que a altura do disco intervertebral.
Por exemplo, 3,5 milímetros para discos intervertebrais lombares em ovelhas de 60 a 70 quilos. Aplique um batente de broca para fornecer um comprimento de broca desprotegido de aproximadamente metade do diâmetro do disco intervertebral lombar. Por exemplo, 12 milímetros para discos intervertebrais lombares em ovelhas de 60 a 70 quilos.
Em seguida, aplique a broca no ponto de entrada e direcione-a na trajetória ligeiramente cranial ao centro do disco intervertebral, o que minimizará o risco de lesão da placa terminal. Com a broca em baixa potência, avance lentamente a broca no disco intervertebral por um segundo. Se for encontrada resistência excessiva, ajuste a trajetória de forma ligeiramente cranial ou caudal.
Uma vez alcançada a hemostasia, use a solução de Ringer para irrigar a ferida. Em seguida, realize o fechamento em camadas, preferencialmente usando suturas trançadas sintéticas absorvíveis 2-0 nos tecidos da parede abdominal lateral e sutura subcuticular sintética absorvível 3-0 contínua não tingida na pele. Aqui é mostrado um corte de plano sagital pré-operatório de uma ressonância magnética 3T da metade lombar ovina até o disco intervertebral lombossacral sem evidência de degeneração significativa do disco intervertebral pré-operatório.
Esta radiografia lateral intraoperatória confirma o nível do disco intervertebral e permite o cálculo do índice de altura do disco. A aparência morfológica macroscópica apresentada aqui demonstra o trato de lesão da broca penetrando no anel fibroso e se estendendo para o núcleo pulposo. A lesão também é evidente nesta ressonância magnética 9.4T.
Ao tentar essa abordagem, é importante direcionar a broca cranialmente e avançar a broca lentamente para minimizar o risco de lesão na placa terminal. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como produzir lesão de broca no modelo ovino por meio de uma abordagem retroperitoneal lateral. Não se esqueça de que trabalhar com bisturis e cauterização pode ser perigoso.
Equipamentos de proteção individual e precauções de segurança apropriadas devem ser seguidos em todos os momentos. É importante manter a esterilidade cirúrgica.
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Este estudo apresenta um novo modelo ovino para a degeneração do disco intervertebral utilizando uma técnica com broca. Este modelo tem como objetivo facilitar a pesquisa sobre a fisiopatologia da degeneração do disco e terapias regenerativas potenciais.
O estabelecimento de modelos pré-clínicos confiáveis é essencial para reduzir os riscos na validação de alvos terapêuticos no tratamento de doenças musculoesqueléticas. Este modelo de degeneração do disco ovino fornece um sistema reprodutível para avaliar mecanismos fisiopatológicos e intervenções terapêuticas. Sua relevância translacional apóia testes de hipóteses em estágios iniciais e a priorização de portfólios em pesquisa e desenvolvimento relacionados à coluna vertebral.
O modelo integra-se aos fluxos de trabalho de descoberta ao fornecer um sistema biológico validado para avaliação de alvos orientada por hipóteses e triagem mecanicista.