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DOI: 10.3791/55755-v
John Odackal*1, Robert Colbourn*2,3, Namrita Jain Odackal4, Lian Tao5, Charles Nicholson5, Sabina Hrabetova2
1Department of Medicine,University of Virginia, 2Department of Cell Biology,SUNY Downstate Medical Center, 3Neural and Behavioral Science Graduate Program,SUNY Downstate Medical Center, 4Division of Neonatology,University of Virginia, 5Department of Neuroscience and Physiology,New York University School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol describes real-time iontophoresis, a method that measures physical parameters of the extracellular space (ECS) of living brains. It allows for the quantification of ECS volume fraction and tortuosity, making it ideal for studying acute reversible changes to brain ECS.
Este protocolo descreve a iontoforese em tempo real, um método que mede os parâmetros físicos do espaço extracelular (ECS) dos cérebros vivos. A difusão de uma molécula inerte liberada no ECS é utilizada para calcular a fração de volume ECS e tortuosidade. É ideal para estudar alterações reversíveis agudas na ECS cerebral.
O objetivo geral deste procedimento é quantificar a fração de volume e a tortuosidade do espaço extracelular no tecido cerebral. Este método responde a questões-chave sobre a relação entre o espaço extracelular e a fisiologia e a doença. A principal vantagem dessa técnica é que ela permite a caracterização em tempo real de dois parâmetros importantes do espaço extracelular.
Geralmente, indivíduos novos neste método terão dificuldades porque o microeletrodo iontoforético exibe uma tendência a mudar suas propriedades durante os experimentos e freqüentemente requer solução de problemas durante os experimentos. A demonstração visual deste método é crítica, pois a manipulação precisa de um microeletrodo seletivo de íons, um eletrodo iontoforético em várias etapas, é necessária para obter uma gravação bem-sucedida. Para iniciar este procedimento, execute o ACSF contendo tetrametilamônio, ou TMA, através da câmara de submersão a dois mililitros por minuto.
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