Name: Modelo do rato da partição fígado associando e ligadura da veia porta para procedimento encenado Hepatectomy (ALPPS) (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: Aprenda o modelo cirúrgico ALPPS em ratos para induzir hipertrofia hepática rápida através de ligadura da veia porta e transecção do parênquima. Este método permite avaliações fisiológicas e moleculares detalhadas da regeneração hepática acelerada.

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Os autores têm sem agradecimentos.

Todos os experimentos neste protocolo foram aprovados pelas autoridades veterinárias do Cantão de Zurique, Suíça (número 60/2014). Além disso, todas as etapas experimentais foram realizadas em estrita conformidade com as orientações em experiências com animais pelas diretrizes da Federação de Europeu laboratório Animal ciência associações (FELASA) e o suíço Academia de ciências médicas (SAMS) .
1. criação de animais, sala de operação de equipamentos e instrumentos, anestesia
<ol><li>Manter ratos Wistar machos, com um peso de 250-300 g em gaiolas ventiladas condições normais isentos de agentes patogénicos em um ciclo claro/escuro de 12/12 h. Dê animais livre acesso à comida e água a uma temperatura ambiente de 22 ± 1 ° C.</li>
	<li>Induzir a anestesia em uma caixa, onde o isoflurano é liberado com 5% de vol para 30 s (figura 1A), seguido por uma concentração de isoflurano de 3% vol., até que o animal está sob anestesia profunda. Confirme o nível da anestesia com o reflexo de dedo-pinch.</li>
	<li>Proporcionar analgesia usando por via subcutânea aplicada buprenorfina (0,01 mg/kg), durante a intervenção cirúrgica, seguida de 0,02 mg/kg cada 12 h na fase do pós-operatório por 48 h.</li>
	<li>Transferir o animal para o local de trabalho, onde eles espontaneamente estão exposto a uma mistura de gás de 1,0-2,5 vol % isoflurano em oxigênio para respirar (fluxo: 600 mL/min).</li>
	<li>Feche os olhos do animal e usar uma pomada para proteger os olhos. Injetar soro fisiológico 5 mL por via subcutânea, metade de cada lado do abdômen, seguido de atropina de 0,1 mg.</li>
	<li>Realizar uma cirurgia usando um microscópio cirúrgico em um quarto de microcirurgia.</li>
	<li>Manter o animal sob anestesia volátil, usando uma máscara de ventilação, consistindo de uma membrana de látex (figura 1B), através do qual o focinho do rato é empurrado. Fixe as extremidades com fita adesiva (figura 1B).</li>
	<li>Dispor os instrumentos cirúrgicos de forma estéril em uma tabela lateral: soro fisiológico e Betadine embebido esponjas (Figura 2A), abdominais parede retractores (Figura 2B), assim como as suturas 3-0 para a retração da parede abdominal e xifoide, tesouras, Adson fórceps, bem um microfórceps dicas em linha reta e curvas e pré-cortado, gravatas de seda 6-0 para o procedimento da ligadura (Figura 2).</li>
	<li>Use um microfórceps bipolar não-colagem por transecção do parênquima hepático. Feche a parede abdominal e pele com suturas de seda 3-0 com agulhas de SH-1 e 5-0 Maxon (Figura 2D). Use uma pinça bipolar para hemostasia.</li>
</ol>2. início da cirurgia
<ol><li>Raspe o abdômen do animal com um aparador de cabelo animal pequeno de xifoide para os órgãos genitais com uma lateral da área de 2 cm da linha média. Remova completamente o cabelo.</li>
	<li>Desinfecte esta área 3 vezes com betadine embebido esponjas.</li>
	<li>Realizar uma incisão com um bisturi para a pele e em seguida, use uma tesoura cirúrgica para abrir o abdômen.</li>
	<li>Retrai o direito e a parede abdominal esquerda e xifoide com suturas de seda 3-0 (Figura 3A).</li>
	<li>Retrai o estômago, cólon e intestino do ligamento hepatoduodenal do rato com retractores fio pequeno self-made (Figura 3B).</li>
</ol>3. a veia porta ligadura (LPC)
<ol><li>Acessar a veia porta e seus ramos lateral retração do estômago e do intestino delgado (Figura 3B).</li>
	<li>Disse a veia porta sem rodeios por pegar o peritônio com o microfórceps e lentamente descascar-medialmente.</li>
	<li>
Dissecar os ramos da veia porta para fora (Figura 3) na seguinte sequência: ramo (1) bem posterior, (2) deixou o ramo mediano lateral e esquerdo juntos e (3) caudado filial.
	<ol>
<li>Primeiro, retire o peritônio com movimentos pequenos, não muito enérgicos para evitar rasgar os pequenos ramos arteriais que os lóbulos do fígado que executam diretamente sob a cobertura peritoneal.</li>
		<li>Uma vez que a veia porta principal é desnudada, cercar os ramos com lento empurrando para a frente e espalhando os movimentos e, em seguida, puxe um pedaço de 1 cm de seda 6-0 amarrem em torno da filial respectiva veia porta e ligam-lo.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Ligam o ramo lobo bem posterior. (Figura 3) A dificuldade técnica do ramo direito posterior consiste no fato de que a artéria para o lóbulo direito posterior cruza o ramo de veia portal bem posterior.
	<ol>
<li>Puxe a artéria cranialmente juntamente com o peritônio para expor o ramo de veia portal certa com o microfórceps curvo.</li>
		<li>Ligate ramo lóbulo direito posterior com o pré-cortado, gravata de seda 6-0. O lóbulo direito posterior transforma visivelmente pálido, uma vez que a veia porta é ligada.</li>
		<li>Evite empurrar contra resistência durante os cercando para evitar rasgar a artéria ou a veia porta. Em caso de sangramento, aplique pressão pelo menos um minuto com um cotonete estéril e então reavaliar. Se o sangramento não parar, sacrifica o animal.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Ligate a lateral esquerda (LLL) e lóbulo mediano esquerdo (LML) ramos. Estes ramos tem um tronco comum. (Figura 3). O ramo lobo mediano esquerdo surge a partir da veia portal dentro do parênquima do LLL.
	<ol>
<li>Ligate a veia porta, levando a ambos da La Leche League e também o amor meu ramo vida juntos usando o Pre-corte gravata de seda 6-0.</li>
		<li>Evitar danos às artérias levando a LLL e amo minha vida, correndo dentro da camada peritoneal. Enquanto o peritônio é descascado volta cuidadosamente, eles ficam intactos. O LLL e amor minha vida transformar visivelmente pálido quando os ramos são ligados.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Ligate ramo lobo caudado (Figura 3). A veia porta, levando a pouco separados lobos caudados em ratos decola da veia portal principal, distal e medialmente para a decolagem do ramo lobo direito da veia portal principal (não estritamente inferiormente como em seres humanos ou animais maiores).
	<ol>
<li>Dissecá-lo para fora e cercá-lo, levantando o peritônio plus ducto biliar e artérias da veia portal principal.</li>
		<li>Cercar o ramo caudado veia porta com um microfórceps curvo, vindo de lateralmente. Os dois lobos caudados empalidecer visivelmente, uma vez que o ramo lobo caudado é ligado com seda 6-0.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Amarrando a estes três ramos da veia porta leva a exclusiva veia porta perfusão do lobo bem mediana (RML), que é visível por uma linha de demarcação distintas entre o lobo médio direito e esquerdo.</li>
</ol>4. a veia porta ligadura com transecção (PVL + T)
<ol><li>Executar a transecção ao longo da linha de demarcação entre RML e amo a minha vida depois de LPC (Figura 3D).</li>
	<li>Use uma pinça de prata bipolar não-furando com uma ponta muito fina e neurocirúrgica para precauterize o tecido hepático, criando uma faixa de cauterização de 1 mm ao longo da linha de demarcação.</li>
	<li>Use a tesoura para corte cuidadosamente o tecido precauterized. É bastante difícil de avaliar correctamente a profundidade da transecção. O objetivo é aproximar a cava quanto possível, que corre intrahepatically em ratos. Lesão de veia cava é acompanhado de extensa hemorragia, que geralmente pode não ser parada.</li>
	<li>Em caso de lesão, aplique uma pressão suave usando um cotonete de algodão, mas se o sangramento não parar dentro de 3-4 min, sacrificar o animal. Geralmente, as tentativas de reparar a veia cava usando suturas foram infrutíferas. Ratos são muito sensíveis ao ar embolia, que pode ocorrer na ocasião e levar à parada cardíaca.</li>
</ol>5. intra-operatória medição da pressão da veia porta e fluxo de Volume
<ol><li>Avalie a pressão da veia porta por canulação direta com uma agulha G30 conectada a um monitor de pressão (Figura 4A).</li>
	<li>Uso a sonda de fluxo de volume de 2mm colocada lateralmente ligado ao dispositivo de fluxo por medição directa do fluxo volumétrico portal mais 2 min (Figura 4B). Só gravar dados com qualidade estável de medição conforme indicado no display da máquina.</li>
	<li>Avaliar a pressão e o fluxo da veia porta separadamente após o grupo das etapas que definem o procedimento respectivo, ou seja, a subordinação de três ramos da veia porta ou o amarrando fora os três ramos da veia porta plus realizando a transecção parenquimatosa entre o amor e a RML minha vida.</li>
</ol>6. últimos passos da cirurgia
<ol><li>Certifique-se de que o intestino está colocado corretamente na cavidade abdominal antes de fechar.</li>
	<li>Feche o peritônio e a parede abdominal com suturas de seda 3-0 com agulhas de SH-1.</li>
	<li>Finalmente a sutura da pele usando Maxon 5-0.</li>
	<li>Desinfecte a pele novamente.</li>
	<li>Aplica novamente soro fisiológico 5 mL por via subcutânea para o tecido subcutâneo lateral no abdômen.</li>
</ol>7. fígada volumetria em ratos utilizando pequeno Animal CT
<ol><li>24 h antes da primeira imagem latente de CT injetar 200 μL do agente de contraste na veia da cauda através de um cateter intravenoso G26.</li>
	<li>Use um micro CT para digitalizar os ratos. Coloque o animal em uma caixa de acrílico para induzir anestesia geral (Primeiro lave com 5% de vol por 30 s, seguido por uma concentração de isoflurano de 2-3% vol., até que o animal é anestesiado e mantê-lo em toda a varredura através de um sistema de tubulação). Para qualidade de imagem ideal, sincronize a tomografia computadorizada com a respiração do animal.</li>
	<li>Exportar a imagem digital e comunicações em arquivos de medicina (DICOM) e analisá-los usando o domínio público de imagem plataforma OsiriX 8.0. Use a ferramenta "polígono fechado" para desenhar as bordas de lóbulo baseadas o radiodensitiy do contraste de nanopartículas no fígado e usar a região de menu de interesse (ROI) para calcular volumes parciais de fígado (ver Figura 2A em Schadde et al . 17.)</li>
	<li>No modelo padrão, permitir que o fígado a crescer durante 3 dias e obter diariamente Tomografias computadorizadas para avaliar o aumento de volume.</li>
</ol>

<ol><li>She, W. H., Chok, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+to+increase+the+resectability+of+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Strategies to increase the resectability of hepatocellular carcinoma.</a> World J Hepatol. 7 (18), 2147-2154 (2015).</li>
<li>Vauthey, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+measurement+of+the+future+liver+remnant+prior+to+extended+liver+resection%3A+methodology+and+clinical+associations%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Standardized measurement of the future liver remnant prior to extended liver resection: methodology and clinical associations.</a> Surgery. 127 (5), 512-519 (2000).</li>
<li>Kinoshita, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preoperative+portal+vein+embolization+for+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Preoperative portal vein embolization for hepatocellular carcinoma.</a> World J Surg. 10 (5), 803-808 (1986).</li>
<li>van Lienden, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+Vein+Embolization+Before+Liver+Resection%3A+A+Systematic+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Intervent+Radiol%22%5BJournal%5D)">Portal Vein Embolization Before Liver Resection: A Systematic Review.</a> Cardiovasc Intervent Radiol. , (2012).</li>
<li>Kianmanesh, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+portal+vein+ligation%3A+a+new+planned+two-step+all-surgical+approach+for+complete+resection+of+primary+gastrointestinal+tumors+with+multiple+bilateral+liver+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Surg%22%5BJournal%5D)">Right portal vein ligation: a new planned two-step all-surgical approach for complete resection of primary gastrointestinal tumors with multiple bilateral liver metastases.</a> J Am Coll Surg. 197 (1), 164-170 (2003).</li>
<li>Nadalin, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volumetric+and+functional+recovery+of+the+liver+after+right+hepatectomy+for+living+donation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">Volumetric and functional recovery of the liver after right hepatectomy for living donation.</a> Liver Transpl. 10 (8), 1024-1029 (2004).</li>
<li>Michalopoulos, G. K., DeFrances, M. C. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9082986">Liver regeneration.</a> Science. 276 (5309), 60-66 (1997).</li>
<li>Fulop, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alterations+in+hepatic+lobar+function+in+regenerating+rat+liver%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Alterations in hepatic lobar function in regenerating rat liver.</a> J Surg Res. 197 (2), 307-317 (2015).</li>
<li>Schnitzbauer, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+portal+vein+ligation+combined+with+in+situ+splitting+induces+rapid+left+lateral+liver+lobe+hypertrophy+enabling+2-staged+extended+right+hepatic+resection+in+small-for-size+settings%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Right portal vein ligation combined with in situ splitting induces rapid left lateral liver lobe hypertrophy enabling 2-staged extended right hepatic resection in small-for-size settings.</a> Ann Surg. 255 (3), 405-414 (2012).</li>
<li>de Santibanes, E., Clavien, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Playing+Play-Doh+to+prevent+postoperative+liver+failure%3A+the+%26%2334%3BALPPS%26%2334%3B+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Playing Play-Doh to prevent postoperative liver failure: the &#34;ALPPS&#34; approach.</a> Ann Surg. 255 (3), 415-417 (2012).</li>
<li>Schadde, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monosegment+ALPPS+hepatectomy%3A+extending+resectability+by+rapid+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Monosegment ALPPS hepatectomy: extending resectability by rapid hypertrophy.</a> Surgery. 157 (4), 676-689 (2015).</li>
<li>Dokmak, S., Belghiti, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22895355">Which limits to the &#34;ALPPS&#34; approach?</a> Ann Surg. 256 (3), e6(2012).</li>
<li>Aloia, T. A., Vauthey, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+staged+hepatectomy+%28ALPPS%29%3A+what+is+gained+and+what+is+lost%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy (ALPPS): what is gained and what is lost?</a> Ann Surg. 256 (3), e9(2012).</li>
<li>Yao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+rat+model+of+portal+vein+ligation+combined+with+in+situ+splitting%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Establishment of a rat model of portal vein ligation combined with in situ splitting.</a> PLoS One. 9 (8), e105511(2014).</li>
<li>Schlegel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ALPPS%3A+from+human+to+mice+highlighting+accelerated+and+novel+mechanisms+of+liver+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">ALPPS: from human to mice highlighting accelerated and novel mechanisms of liver regeneration.</a> Ann Surg. 260 (5), 839-846 (2014).</li>
<li>Croome, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+porcine+model+for+associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+a+staged+hepatectomy%5BTitle%5D)+AND+%22HPB+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Characterization of a porcine model for associating liver partition and portal vein ligation for a staged hepatectomy.</a> HPB (Oxford). 17 (12), 1130-1136 (2015).</li>
<li>Schadde, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+of+the+growing+liver+accelerates+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Hypoxia of the growing liver accelerates regeneration.</a> Surgery. 161 (3), 666-679 (2017).</li>
<li>Moris, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanistic+insights+of+rapid+liver+regeneration+after+associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+stage+hepatectomy%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Mechanistic insights of rapid liver regeneration after associating liver partition and portal vein ligation for stage hepatectomy.</a> World J Gastroenterol. 22 (33), 7613-7624 (2016).</li>
<li>Garcia-Perez, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associated+Liver+Partition+and+Portal+Vein+Ligation+%28ALPPS%29+vs+Selective+Portal+Vein+Ligation+%28PVL%29+for+Staged+Hepatectomy+in+a+Rat+Model.+Similar+Regenerative+Response%3F%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Associated Liver Partition and Portal Vein Ligation (ALPPS) vs Selective Portal Vein Ligation (PVL) for Staged Hepatectomy in a Rat Model. Similar Regenerative Response?</a> PLoS One. 10 (12), e0144096(2015).</li>
<li>Shi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+preliminary+study+of+ALPPS+procedure+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A preliminary study of ALPPS procedure in a rat model.</a> Sci Rep. 5, 17567(2015).</li>
<li>Almau Trenard, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+experimental+model+of+portal+vein+ligation+associated+with+parenchymal+transection+%28ALPPS%29+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Cir+Esp%22%5BJournal%5D)">Development of an experimental model of portal vein ligation associated with parenchymal transection (ALPPS) in rats.</a> Cir Esp. 92 (10), 676-681 (2014).</li>
<li>Dhar, D. K., Mohammad, G. H., Vyas, S., Broering, D. C., Malago, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+rat+model+of+liver+regeneration%3A+possible+role+of+cytokine+induced+neutrophil+chemoattractant-1+in+augmented+liver+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg+Innov+Res%22%5BJournal%5D)">A novel rat model of liver regeneration: possible role of cytokine induced neutrophil chemoattractant-1 in augmented liver regeneration.</a> Ann Surg Innov Res. 9, 11(2015).</li>
<li>Wei, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+rat+model%3A+Associating+liver+partition+with+portal+vein+ligation+for+staged+hepatectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Establishment of a rat model: Associating liver partition with portal vein ligation for staged hepatectomy.</a> Surgery. 159 (5), 1299-1307 (2016).</li>
<li>Tschuor, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salvage+parenchymal+liver+transection+for+patients+with+insufficient+volume+increase+after+portal+vein+occlusion+-+an+extension+of+the+ALPPS+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Salvage parenchymal liver transection for patients with insufficient volume increase after portal vein occlusion - an extension of the ALPPS approach.</a> Eur J Surg Oncol. 39 (11), 1230-1235 (2013).</li>
<li>Schadde, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+survival+and+safety+of+ALPPS%3A+first+report+of+the+International+ALPPS+Registry%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Early survival and safety of ALPPS: first report of the International ALPPS Registry.</a> Ann Surg. 260 (5), 829-836 (2014).</li>
<li>Harnoss, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolyl+Hydroxylase+Inhibition+Enhances+Liver+Regeneration+Without+Induction+of+Tumor+Growth%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Prolyl Hydroxylase Inhibition Enhances Liver Regeneration Without Induction of Tumor Growth.</a> Ann Surg. , (2016).</li>
<li>Olthof, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparable+liver+function+and+volume+increase+after+portal+vein+embolization+in+rabbits+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Comparable liver function and volume increase after portal vein embolization in rabbits and humans.</a> Surgery. 161 (3), 658-665 (2017).</li>
<li>Olthof, P. B., van Gulik, T. M., Bennink, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+use+of+hepatobiliary+scintigraphy+before+liver+resection%5BTitle%5D)+AND+%22HPB+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Optimal use of hepatobiliary scintigraphy before liver resection.</a> HPB (Oxford). 18 (10), 870(2016).</li>
<li>Lau, L., Christophi, C., Muralidharan, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoperative+functional+liver+remnant+assessment+with+indocyanine+green+clearance%3A+another+toehold+for+climbing+the+%26%2334%3BALPPS%26%2334%3B%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Intraoperative functional liver remnant assessment with indocyanine green clearance: another toehold for climbing the &#34;ALPPS&#34;.</a> Ann Surg. 261 (2), e43-e45 (2015).</li>
<li>Cieslak, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+Liver+Function+Using+%2899m%29Tc-Mebrofenin+Hepatobiliary+Scintigraphy+in+ALPPS+%28Associating+Liver+Partition+and+Portal+Vein+Ligation+for+Staged+Hepatectomy%29%5BTitle%5D)+AND+%22Case+Rep+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Assessment of Liver Function Using (99m)Tc-Mebrofenin Hepatobiliary Scintigraphy in ALPPS (Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy).</a> Case Rep Gastroenterol. 9 (3), 353-360 (2015).</li>
<li>Truant, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drop+of+Total+Liver+Function+in+the+Interstages+of+the+New+Associating+Liver+Partition+and+Portal+Vein+Ligation+for+Staged+Hepatectomy+Technique%3A+Analysis+of+the+%26%2334%3BAuxiliary+Liver%26%2334%3B+by+HIDA+Scintigraphy%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Drop of Total Liver Function in the Interstages of the New Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy Technique: Analysis of the &#34;Auxiliary Liver&#34; by HIDA Scintigraphy.</a> Ann Surg. 263 (3), e33-e34 (2016).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

Este protocolo apresenta um modelo animal de ALPPS com sua rápida hipertrofia induzida pelo LPC + T, que aproximadamente dobra o aumento de volume dentro de 3 dias em relação ao LPC sozinho. 17 o lobo hepático direito médio é usado como um lobo de modelo para o crescimento do fígado porque o lobo médio hepático é uma massa parenquimatosa contígua fornecida por duas veias portal separadas para sua esquerda e a sua direita, como mostrado na Figura 1 , em uma reserva tra...

O tamanho do fígado remanescente limita a resectability de tumores no fígado. 1 em geral, quando inferior a 25% fígado tecido é deixado para trás, o paciente está em risco aumentado de morte por insuficiência hepática aguda devido à falta de função metabólica para o organismo inteiro ("pequeno demais para síndrome de tamanho"). 2 este post-hepatectomy insuficiência hepática é a complicação mais devastadora após ressecção hepática. Portanto os médicos tentaram induzir a regeneração hepática antes da ressecção do fígado manipulando o fluxo da veia portal. 3 verificou que, uma vez que a veia porta é obstruída, a parte restante com o fluxo da veia porta começa a crescer a um ritmo lento e, assim, pode aumentar até 60% no tamanho. Ligadura cirúrgica5 ou intervencionista veia porta 4 oclusão ambos foram clinicamente estabelecidos. 4 o aumento do volume e função do fígado é confiável, mas a taxa de crescimento do fígado após oclusão portal é apenas cerca de um quinto em comparação com o crescimento do fígado remanescente após hepatectomy parcial. 6
O tempo necessário para o fígado crescer é semanas a meses, mesmo que o fígado pode regenerar em uma taxa muito mais rápida após a ressecção. Como tal, o fígado é o único órgão que cresce voltar à função normal após a remoção de uma parte dela. 7 um novel procedimento induzindo a regeneração hepática em um ritmo semelhante como depois hepactectomy parcial foi desenvolvido por um grupo de cirurgiões quem descobriu que adicionando uma transecção entre o obscurecidas e a parte não-obstruída do fígado induz o fígado hipertrofia com a mesma taxa de crescimento, como após a ressecção hepática, mas antes da ressecção. 9 o procedimento inicia rápida hipertrofia de 80% dentro de um remanescente de semana fígado no futuro, o que permite a ressecção de tumores extensos, principalmente irressecável, fígados dentro de uma semana. O procedimento foi chamado "Associação ligadura da partição do fígado e da veia porta para encenada hepatectomy = ALPPS" e tornou-se rapidamente popular em todo o mundo. 10 vários relatórios de suporte para uma expansão da resectability de tumores no fígado ressecável no limite alcançado pela nova técnica,11 enquanto o complexo procedimento cirúrgico também foi criticado por sua taxa de complicação de alta. 12 , 13
O desenvolvimento de um roedor e também grandes modelos animais de lenta e rápida hipertrofia tem sido tentados desde a publicação do ALPPS em 2012 para permitir uma melhor caracterização histológica e a compreensão dos mecanismos e para testar os efeitos de drogas sobre o taxas de crescimento diferente de tecido do fígado em animais. O primeiro modelo animal desenvolvido foi um modelo do rato. Neste modelo, hipertrofia rápida após a transecção parenquimatosa entre o direito e a parte esquerda do lobo mediano acelerado regeneração do lobo bem mediano. 14 um modelo diferente foi introduzido mais tarde no mouse. Neste modelo o lóbulo lateral esquerdo foi ressecado e os ramos da veia porta para cada lóbulo do fígado exceto o lóbulo mediano esquerdo foram amarrados. 15 entretanto, grandes modelos animais de ALPPS em suínos foram descritos também. 16
Para o estudo dos mecanismos fisiológicos, como alterações de fluxo e pressão na veia porta, perfusão e oxigenação do tecido do fígado, o modelo de rato é superior ao modelo de ALPPS em camundongos. Outra vantagem do rato sobre o modelo murino é que no modelo de rato, não há nenhuma necessidade para uma ressecção do lóbulo lateral esquerdo,15 que possam contaminar os efeitos da ressecção hepática com aqueles de ALPPS. O modelo de rato em contraste não reduz o fígado massa celular. Um modelo de porco usa o lóbulo direito posterior do lóbulo crescente, mas o fígado de porco é altamente lobulado. Portanto, é difícil criar um avião de transecção na ponte de tecido já fina entre o posterior direito e o lobo anterior direita. Em contraste, o lóbulo mediano em ratos consistem de duas partes que são fornecidas separadamente por uma veia porta cada e um avião transecção parenquimatosa pode ser facilmente criado entre os dois usando técnicas microcirúrgicos. A disponibilidade de computador pequeno animal tomografia computadorizada (TC) e/ou ressonância magnética (MRI) permite a quantificação muito exata do crescimento volumétrico entre ligadura da veia porta sozinha e ligadura da veia porta e a transecção adicionada, que é importante para a validação de qualquer modelo de rápida hipertrofia hepática.
O protocolo aqui apresentado descreve a técnica cirúrgica e procedimentos usados para validação volumétrica e Caracterização fisiológica do modelo de lenta e rápida hipertrofia após ligadura da veia porta e ligadura da veia porta com transecção, respectivamente, em ratos.

<table><tbody><tr><td>Isoflurano, garrafas de 250 mL</td><td>Attane, Piramal, Mumbai, Índia</td><td>LDNI 22098</td><td>Equipamento veterinário padrão</td></tr><tr><td>Vaporizador de isofluorano Tec-3</td><td>Ohmeda, GE-Healthcare, Chicago, IL</td><td>não está mais disponível</td><td>Equipamento veterinário padrão&nbsp;</td></tr><tr><td>Buprenorfina (Temgesic)</td><td>Indivior, Baar, Suíça</td><td>7680419310353</td><td></td></tr><tr><td>pomada de vitamina A</td> com número GTIN <td>Bausch& Lomp, Zug, Suíça</td><td>7680223980247</td> Sulfato de atropina <td>com número GTIN</td></tr><tr><td>0,5 mg/mL</td><td>Sintetica SA, Mendrisio, Suíça</td><td>7680565330045</td><td>Microscópio de microcirurgia com número GTIN</td></tr><tr><td></td><td>Olympus, Tóquio, Japão</td><td>SZX10</td><td>Equipamento veterinário padrão</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Mundipharma, Basileia, Suíça</td><td>7680342821377</td><td>Esponjas com número GTIN</td></tr><tr><td></td><td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Alemanha</td><td>NK83.1</td><td>Mini-esponjas</td></tr><tr><td>Afastadores de Parede Abdominal</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Feito por si mesmo a partir de clipes de papel e cotonetes</td></tr><tr><td>3-0 seda&nbsp;</td><td>Ethicon, Sommerville, NJ</td><td>K872H</td><td>Tesoura cirúrgica padrão</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Instrumentos de precisão mundial (WPI), Sarasota, FL</td><td>503371</td> Pinça <td>Adson microcirúrgica padrão</td></tr><tr><td></td><td>Instrumentos de precisão mundial (WPI), Sarasota, FL</td><td>501244-G</td><td>Micropinças microcirúrgicas padrão</td></tr><tr><td>de pontas finas</td><td>Instrumentos de precisão mundial (WPI), Sarasota, FL</td><td>501976</td><td>As pontas precisam ser polidas regularmente</td></tr><tr><td>Micropinças de pontas finas curvas</td><td>Instrumentos de precisão mundial (WPI), Sarasota, FL</td><td>504513</td><td>Essencial para contornar os ramos da veia porta&nbsp;</td></tr><tr><td>6-0 LOOK seda trançada preta</td><td>Surgical Specalities Corporation, Wyomissing, PA&nbsp;</td><td>SP114</td><td>Carretel, pré-cortado antes do procedimento</td></tr><tr><td>2-0 suturas de seda</td><td>Ethicon, Sommerville, NJ</td><td>K833</td><td>Suturas maxon cirúrgicas</td></tr><tr><td>padrão 5-0</td><td>Covidien, Dublin, Irlanda</td><td>6608-21</td><td></td></tr><tr><td>Micropinças bipolares</td> cirúrgicas padrão <td>Sutter, Freiburg, Alemanha</td><td>780148SGS</td><td>Essencial para transecção parenquimatosa</td></tr><tr><td>Q-tips small</td><td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Alemanha</td><td>EH11.1</td><td>Pontas cirúrgicas padrão</td></tr><tr><td>Q-tips big</td><td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Alemanha</td><td>XL54.1</td><td>Agulha cirúrgica padrão</td></tr><tr><td>G30&nbsp;</td><td>Terumo, Tóquio, Japão</td><td>NN-3013R&nbsp;</td><td>Equipamento de anestesia padrão</td></tr><tr><td>Sonda de fluxo volumétrico de 2 mm&nbsp;</td><td>Transonic Systems, Ithaca, NY</td><td>MA-2PS</td><td>A menor sonda disponível para medidor de fluxo HAT-311</td></tr><tr><td>Medidor de fluxo transônico Transonic</td><td>Systems, Ithaca, NY</td><td>HAT-311 Medidor de fluxo transsônico QC</td><td>Um dos&nbsp; medidores de fluxo de primeira geração para cirurgia</td></tr><tr><td>ExiTron nano 12,000&nbsp;</td><td>Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Alemanha</td><td>130-095-698 Meio de</td><td>contraste nanomoloecular que opacifica o fígado e o baço</td></tr><tr><td>Cateter intravenoso G26</td><td>Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ</td><td>391349</td><td>Equipamento de anestesia padrão</td></tr><tr><td>Quantum FX MicroCT&nbsp;</td><td>Perkin Elmer, Waltham, MA</td><td>N / A</td><td>Tomografia computadorizada padrão para pequenos animais no instituto de fisiologia da Universidade de Z & uuml; rico</td></tr><tr><td>OsiriX 8.0</td><td>Pixmeo Sarl, Genebra, Suíça</td><td>N/A</td><td>Software de domínio público : www.pixmeo.com</td></tr></tbody></table>

modelo do rato da partição fígado associando e ligadura da veia porta para procedimento encenado hepatectomy (alpps)

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Dados clínicos recentes suportam uma abordagem cirúrgica agressiva para tumores primário e metastático no fígado. Para algumas indicações, como metástases hepáticas colo-rectal, a quantidade de tecido hepático deixados para trás após ressecção hepática tornou-se o principal fator limitante do resectability dos grandes ou múltiplos tumores no fígado. Uma quantidade mínima de tecido funcional é necessária para evitar a complicação grave da post-hepatectomy insuficiência hepática, que tem alta taxa de morbidade e mortalidade. Induzir o fígado crescimento do potencial remanescente antes da ressecção tornam-se mais estabeleceu em cirurgia do fígado, ou sob a forma de embolização da veia porta por radiologistas intervencionistas, ou na forma de ligadura de veia porta várias semanas antes da ressecção. Recentemente, foi demonstrado que a regeneração hepática é mais extensa e rápida, quando a transecção parenquimatosa é adicionada à ligadura da veia porta numa primeira fase e, em seguida, após apenas uma semana de espera, ressecção realizada numa segunda fase (partição associando com o fígado e ligadura da veia porta para encenada hepatectomy = ALPPS). ALPPS rapidamente se tornou popular em todo o mundo, mas tem sido criticado por sua mortalidade perioperatória alta. O mecanismo de crescimento acelerado e extenso induzido por este procedimento não tem sido bem compreendido. Modelos animais foram desenvolvidos para explorar os mecanismos fisiológicos e moleculares de regeneração hepática acelerada em ALPPS. Este protocolo apresenta um modelo do rato que permite a exploração mecanicista da regeneração acelerada.

A ligadura da veia porta de dois procedimentos cirúrgicos diferentes (LPC) e LPC com resultado de transecção (PVL + T) na cinética de crescimento distintamente diferentes. PVL induz aumento de volume moderado dentro de 3 dias, enquanto que no LPC + T um lobo bem mediano muito maior (RML) pode ser visto (Figura 5). Isto pode ser verificado por volumetria diária. O volume da RML aproximadamente dobra dentro de 3 dias no LPC, enquanto que triplica em PVL + T.<su...

Indução rápida hipertrofia hepática usando associando partição do fígado e ligadura da veia porta para um hepatectomy encenada (ALPPS) tem sido proposto para ressecção de tumores no fígado ressecável no limite. Este modelo pode elucidar os mecanismos envolvidos na hipertrofia rápida e permite testes de drogas que promovem ou bloqueiam a aceleração da regeneração.

Modelo do rato da partição fígado associando e ligadura da veia porta para procedimento encenado Hepatectomy (ALPPS)

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

O objetivo geral dessa intervenção cirúrgica é alcançar uma hipertrofia rápida do fígado de rato por meio da ligadura da veia porta e da secção do parênquima. Esse modelo permite avaliações fisiológicas e moleculares detalhadas da regeneração hepática rápida. O fígado se regenera após a ligadura da veia porta.Encontramos uma maneira de seccionar o parênquima adicionalmente à ligadura da veia porta para acelerar essa regeneração. Este método fornece um modelo para regeneração hepática acelerada. É um método utilizado na cirurgia humana para pacientes com tumores hepáticos limitadamente ressecáveis.Uma vez que o animal esteja completamente anestesiado e preparado para a cirurgia, rape o abdômen ao longo da linha média, do xifoide até os genitais, utilizando tesouras para pelos de pequenos animais. Remova completamente os pelos dentro de dois centímetros da linha média. Após a desinfecção da pele, faça uma incisão através da parede abdominal.Em seguida, retrair ambas as paredes e o xifoide com pontos de seda 3-0. Depois, utilizando retratores de arame pequenos feitos sob medida, afastar o estômago, o cólon e o intestino delgado da ligação hepatoduodenal. Dessa forma, acessar a veia po

rat-model-associating-liver-partition-portal-vein-ligation-for-staged

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

O transplante hepático em ratos é um modelo indispensável experimental para a pesquisa biomédica. Aqui apresentamos nossos procedimentos cirúrgicos para transplante ortotópico do fígado do rato com a reconstrução da artéria hepática utilizando um enxerto parcial de 50%.

Procedimentos cirúrgicos para um modelo de rato de Transplante de Fígado parcial ortotópico com reconstrução arterial hepática

O transplante de fígado auxiliar proporciona um suporte temporário em insuficiência hepática aguda, até que a regeneração do fígado, não. O transplante heterotópico auxiliar fígado (HALT) com Arterialização veia porta (PVA) torna a função hepática está suficientemente bem. Desenvolvemos uma técnica análoga, no rato, para examinar a influência da arterialização veia portal na morfologia e função do enxerto.

Heterotópico Rat auxiliar Liver Transplantation com fluxo regulado Portal Vein Arterialização na Insuficiência Hepática Aguda

Aqui, apresenta-se um protocolo envolvendo transplante hepático parcial de re-arterialized de rato. Especificamente, 70% fígado foi ressecado na vivo usando uma técnica atualizada de hepatectomy orientada a embarcação. A artéria hepática foi reconstruída em uma forma de ponta-a-lado. A técnica de punho foi modificada para encurtar o tempo de anastomose da veia cava infrahepatic.

Re-Arterialized transplante de fígado parcial de rato com na vivo orientado a embarcação 70% Hepatectomy

O objetivo deste estudo é modificar o modelo de transplante de fígado ortotópico de ratos para representar melhor o transplante de fígado humano e melhorar a sobrevivência do receptor. O método apresentado restabelece o fluxo arterial hepático conectando a artéria hepática comum do fígado doador à artéria hepática adequada do fígado receptor.

Complicações reduzidas após reconexão arterial em um modelo de rato de transplante de fígado ortotópico

Inúmeros estudos têm demonstrado as vantagens da ressecção anatômica. No entanto, se a ressecção anatômica pode aumentar as taxas de ressecção R0 permanece controverso. Consequentemente, o presente estudo descreve um procedimento inovador envolvendo o conceito em bloco combinado com ressecção anatômica em hepatectomia laparoscópica, que pode reduzir a recorrência pós-operatória e metástases.

Aplicação do Conceito em Bloco Combinado com Ressecção Anatômica em Hepatectomia Laparoscópica

A associação da partição hepática e da ligadura da veia porta para hepatectomia estadiada (ALPPS) demonstrou resultar em regeneração hepática notável após várias semanas após a cirurgia de primeiro estágio. Modelos animais submetidos a ALPPS foram desenvolvidos para explorar a capacidade potencial de regeneração hepática e alcançar resultados clínicos favoráveis.

Um modelo de camundongo da partição hepática associada e ligadura da veia porta para procedimento de hepatectomia encenada auxiliado por microscopia

O protocolo auxiliar de transplante hepático heterotópico de rato descrito aqui oferece uma ferramenta prática de investigação para explorar os mecanismos de rejeição do aloenxerto hepático. Este modelo ajuda a aliviar os obstáculos cirúrgicos e o estresse animal do transplante hepático ortotópico em ratos.

Modelo de transplante de fígado total auxiliar heterotópico de rato utilizando uma hepaticouretorostomia para estudos de rejeição de aloenxerto

O modelo de camundongo de hepatectomia parcial 2/3 (66%) é bem descrito na literatura, mas hepatectomias mais extensas mimetizando a síndrome do pequeno para o tamanho após o transplante de fígado raramente foram usadas. Descrevemos um procedimento de hepatectomia estendida de 78% em um modelo de camundongo que resulta em aproximadamente 50% de letalidade pós-operatória em camundongos saudáveis.

Hepatectomia estendida de 78% em modelo cirúrgico de camundongo

Apresentamos uma técnica laparoscópica para resseção anatômica S7+S8d com transeção da veia hepática direita, preservando a veia hepática inferior direita e o segmento S6. Baseando-se em marcos anatômicos meticulosos sem ultrassom intraoperatório, essa abordagem oferece uma opção precisa e que poupa parênquima para tumores do fígado direito localizados dorsalmente, especialmente em ambientes com recursos avançados limitados de navegação.

Resseção anatômica laparoscópica S7+S8d preservando a veia hepática inferior direita e S6 com transeção da veia hepática direita

O modelo do rato de ligadura e punção cecal como uma ferramenta valiosa para o estudo da sepse humana.

Procedimento de punção cecal Ligadura

Aprenda o modelo cirúrgico ALPPS em ratos para induzir hipertrofia hepática rápida através de ligadura da veia porta e transecção do parênquima. Este método permite avaliações fisiológicas e moleculares detalhadas da regeneração hepática acelerada.

Modelo do rato da partição fígado associando e ligadura da veia porta para procedimento encenado Hepatectomy (ALPPS)

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