Name: Detecção de défices comportamentais em ratos após lesão cerebral traumática (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-01-30T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 54 s
Description: Aprenda a detectar déficits neurológicos e cognitivos em ratos após lesão cerebral traumática usando testes comportamentais padronizados. Este método auxilia pesquisadores a avaliar danos cerebrais e eficácia de tratamentos experimentais.

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Agradecemos Ian Bolding assistência com preparação cirúrgica de temas e Elizabeth Sumner para sua edição meticulosa. Estes estudos foram concluídos como parte de uma equipe financiada pela The Moody projeto para pesquisa de lesão cerebral traumática translacional.

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Os autores não têm nada para divulgar.

Quando realizar qualquer tipo de teste comportamental, é fundamental para ser consistente. Este detalhe inclui muitas considerações que parecem insignificantes, mas tem um grande impacto sobre a resposta do animal. Um passo importante que não pode ser esquecido é a aclimatação de animais para casa-gaiola/moradia antes de qualquer experiência. Esta preparação reduz os efeitos da resposta ao estresse fisiológico dos animais, que podem alterar os resultados comportamentais18. Da mesma forma, é absolutamente essencial que todo esforço é feito para lidar com todos os animais da mesma maneira. Essa consistência inclui, como mencionada anteriormente, aclimatação à moradia e também aclimatação à manipulação e transporte entre quartos antes do treinamento ou teste. Este conceito não pode ser exagerado. Manipulação de animais desleixada é desastrosa para qualquer teste comportamental19. Da mesma forma, todo o esforço precisa ser feita para testar os animais ao mesmo tempo do dia, se durante o seu ciclo escuro ou claro. Para os testes aqui discutidos, testes na fase clara ou escura são aceitável, desde que os testes são realizados de forma consistente. Testes feitos em momentos diferentes durante o ciclo circadiano foi mostrado para alterar os resultados comportamentais18,20. Além disso, o manipulador, bem como o animal deve ser em um estado de calma, livre de stress para aumentar a precisão dos resultados.
Particularmente no caso do Neuroscore, negativos e falsos positivos são comuns. Falsos positivos normalmente ocorrem quando um animal não é totalmente habituado ao manuseio e teste. O animal deve ser completamente relaxado, então a resposta observada é reflexivo e não devido ao aperto da reacção fora de estresse ou medo de músculos. Um manipulador tenso pode influenciar os resultados através da transmissão de estresse para o animal. Portanto, segurando o rato muito solto ou muito apertado podem tanto ser problemáticos. Além disso, se o manipulador estiver nervoso, isso pode confundir a reação dos ratos. Há também o risco de que um observador inexperiente irá interpretar mal a resposta do rato. Bom treinamento e muita prática são essenciais para o sucesso e a consistência da Neuroscore.
Em geral, a principal preocupação com estes testes é a falta de uma grande diferença e às vezes não há diferença, entre os grupos de tratamento. Desde que os animais podem reagir diferentemente a diferentes manipuladores, ruídos, tempos de dia e potencialmente, temporadas21, todo esforço deve ser feito para reduzir todos os possíveis fatores de confusão.
Os resultados das tarefas de feixe-equilíbrio e feixe-pé mostrados aqui demonstram que estes testes são úteis no início após lesão para detectar os déficits na função vestibulomotor. Normalmente estes défices resolução tempo1,14. Neste modelo, por 6 meses após a lesão, resolveram os défices induzida por lesão. Os resultados do ponto de tempo 6 meses indicam que não existem diferenças entre NAIVE, SHAM ou ratos feridos; no entanto, todos os ratos foram relaxantes nas jaulas em casa por 6 meses, envelhecendo e ganhando peso. Assim, quando que eles são re-testados em 6 meses depois da cirurgia (ou equivalentes no caso de INGÊNUO), eles são essencialmente tornar-se velho e gordo, e portanto todos os grupos não executam bem como eles em comparação com sua linha de base dia 0 resultados.
Outra consideração importante é que o teste de comportamento utilizado é o teste correto. Por exemplo, os testes utilizados aqui são pensados para representar a função de áreas específicas do cérebro. Um exemplo é o sistema vestibular, que é importante para o equilíbrio. Áreas do cérebro envolvidas na função sensório-motor, tais como o córtex incluindo córtex sensório-motor, o tálamo, os neurônios corticoespinhal, gânglios basais, nigro-estriado, para citar alguns, são todos os envolvidos na coordenação de vestibulomotor. Assim, déficits no balanço de feixe ou feixe-pé indicam possíveis défices nestas áreas. Além disso, o hipocampo e córtex pré-frontal estão envolvidos na aprendizagem e memória funções testaram pelo labirinto de água de memória de trabalho. Mesmo quando o teste correto é escolhido, as limitações dos testes que são empregados devem ser mantidas em mente. Por exemplo, nenhum dos testes aqui apresentados são sensíveis a défices de humor, como depressão, ansiedade ou interações sociais, tais como agressão, impulsividade ou tomada de decisão. Para reiterar, é imperativo para escolher o teste apropriado para a área de comportamento e cérebro a ser avaliada.
Interpretação e análise de dados comportamentais devem ser abordados com cautela. É altamente recomendável incluir análises de poder de cada tipo de ensaio, separadamente, porque, usando um resultado comportamental como uma medida de um déficit neural, é, por natureza, uma medida bruta de um efeito sutil. Além disso, testes diferentes requerem diferentes tipos de análises estatísticas. Por exemplo, os testes de Neuroscore e feixe-equilíbrio descritos são dependentes a interpretação de um observador treinado para marcar o comportamento usando uma escala ordinal. Esses tipos de dados não são contínuos e estatísticas não é normalmente distribuídas, então não paramétricas devem ser usadas, tais como o teste de Kruskal-Wallis, como demonstrado nas seções 6.1 e 6.2. Alternativamente, o feixe-pé e testes de labirinto de água de memória de trabalho produzem dados que são contínuos e normalmente distribuídas, então paramétricas estatísticas podem ser usadas, como ANOVA One-Way ou medidas repetidas ANOVA de duas vias, conforme demonstrado em seções 6.3 e 6.4.
As tarefas comportamentais apresentadas aqui têm resistido ao teste do tempo e dar resultados reprodutíveis, particularmente quando emparelhado com o modelo FPI em ratos, embora existam muitos outros métodos de ensaio comportamental da lesão cerebral. O neuroscore é uma curta avaliação realizada com um mínimo de equipamento. Outros testes de reflexos e de força estão disponíveis e podem ser incorporados uma avaliação neurológica, tais como a tarefa de pulsão lateral, o teste de acinesia, o teste do plano inclinado e força de preensão (ver Fujimoto et al 22 e ouro et al 23). o feixe-equilíbrio e feixe-pé tarefas descritas são medidas dos défices vestibulomotor após lesão. Coordenação de Vestibulomotor pode ser considerada uma medida do comportamento locomotor bruto, enquanto outras medidas dos défices locomotoras brutos incluem o Rotarod, polo rotativo e abrir a atividade de campo. A capacidade de nadar, medida como velocidade de mergulho durante o labirinto de água, é também uma indicação da coordenação motora bruta22,23. A tarefa de labirinto de água de memória de trabalho conclui este conjunto de testes de detecção de ambos os défices de memória (indicados pelo julgamento 1) de referência e trabalhando os défices de memória (indicados pelo julgamento 2 ou a diferença entre julgamento 1 e 2 de julgamento). Outras medidas da função cognitiva incluem o labirinto radial do oito braço, o labirinto de Barnes, o teste de reconhecimento de objeto romance e diferentes variações do labirinto de água. Estas variações incluem o labirinto de água original Morris e o labirinto de Lashley III (novamente ver Fujimoto et al . 22 e ouro et al 23). esta bateria de testes tem provado para ser útil cedo depois da lesão e, em graus variados, fora a 12 meses após a lesão1.
Além disso, as tarefas demonstradas aqui podem ser usadas com diferentes cepas, sexo e idade dos ratos; no entanto, acomodações podem precisar de ser feitas para diferentes tamanhos e em casos de maior fragilidade. Por exemplo, ratos mais velhos, mais pesados precisam de um raio mais amplo para a tarefa de feixe-equilíbrio e ratos envelhecidos, frágil, pode precisar de menor duração dos tempos de nadar na água de labirinto. Assim, há espaço para a flexibilidade nestes testes e potencial para desenvolvimento de novos testes para acomodar as hipóteses e situações diferentes.

Os métodos apresentados aqui são projetados para detectar déficits funcionais em áreas específicas do cérebro induzidas por um modelo experimental em ratos de TCE. Serão descritos quatro testes de comportamento diferente. Em primeiro lugar, a avaliação neurológica curta, conhecida como o neuroscore, pode ser realizada sem a necessidade de qualquer equipamento, mas requer prática; Este teste detecta déficits em reflexos. Em segundo lugar, o teste do feixe-equilíbrio detecta déficits na habilidade de equilibrar. Esta tarefa exige o manipulador marcar o rato baseado em uma escala ordinal e requer algum treinamento do manipulador. O teste do feixe do equilíbrio requer um feixe estreito e é sensível aos défices no sistema vestibular. O terceiro teste avalia a coordenação de vestibulomotor. Este teste é conhecido como a tarefa de feixe-pé, e embora alguns pre-treinamento do rato é necessário, este procedimento é mais objetivo do que os dois anteriores, como a latência para desviar o feixe é uma medida objetiva não dependente de Pontuação subjetiva. Essa diferença é porque o tempo para atravessar um feixe estreito para alcançar um cofre é medido. O teste de caminhada de feixe requer um feixe mais tempo do que o feixe do equilíbrio, bem como uma caixa de fuga. Este teste mede a déficits na coordenação motora e equilíbrio e, portanto, é sensível a danos para o cerebelo e áreas do cérebro relacionadas motor. A versão de memória de trabalho do labirinto de água Morris (MWM-WM) principalmente testes função hippocampal e integração com o córtex pré-frontal ou função executiva. A versão do labirinto de água Morris mostrado também pode ser usada para detectar os déficits na memória de referência1.
Esses métodos foram escolhidos com base no seu histórico bem estabelecido na literatura. Cada um tem sido eficaz em muitas mãos de laboratórios diferentes com várias cepas de ratos ao longo de vários anos de pesquisa. No entanto, no passado, pós-lesão mede até duas semanas após a lesão foram considerados pontos de tempo "crônica". Assim, para estabelecer técnicas comportamentais para o estudo dos efeitos crônicos de TCE em roedores, estes métodos conhecidos preciso ser avaliada para a sensibilidade detectar TBI induziram déficits em pontos de tempo mais longos após a lesão. Enquanto existem agora vários modelos de roedores de TCE, o modelo FPI é um dos mais amplamente utilizados e é aplicado neste estudo. Este modelo foi publicado pela primeira vez na década de 19502, e desde então, mais de 1.000 papéis têm empregado FPI em ratos3. A neuropatologia deste tipo de lesão tem sido bem descrita por nós4 e outros5,6,7. Brevemente, lesão neuronal no hipocampo tem demonstrado ser dose-dependente usando Fluoro-Jade coloração pouco tempo após a lesão, ou seja, 24-48 h; enquanto bruta atrofia e cavitação incluindo desbaste da cápsula interna e córtex tem sido relatado em um ano após a lesão de6,7.
A representação mais significativa da função cerebral é avaliada por meio de medidas comportamentais resultado após uma lesão cerebral experimental. No entanto, a grande maioria dos experimentos FPI que usam os resultados comportamentais fazer medidas relativamente cedo, normalmente de 1 a 14 dias após a lesão. Usar os métodos demonstrado aqui, que alguns défices comportamentais podem ser detectados por até 12 meses após a lesão1. Função neurológica, função vestibulomotor bruto e coordenação motora fina foram avaliados nos dias pós-lesão (PIDs) 1-3 e a-3, 6 e 12 meses após a cirurgia, usando uma breve avaliação neurológica (Neuroscore; modificado de Schallert8), o Tarefa de viga de equilíbrio e o feixe-pé tarefa9,10,11. Referência e memória de trabalho foram avaliados usando uma versão de memória de trabalho do Morris água labirinto1,12,13.

<table><tbody><tr><td>Ratos Sprague-Dawley</td><td>Charles Rivers Laboratories 251 Ballardvale St Wilmington, MA 01887-1096 Telefone: 800-522-7287</td><td>Ratos CD-IGS, código de cepa 001</td><td>macho, albino, 300-350g na chegada</td></tr><tr><td>Nome</td><td>Empresa<</td><td>strong>Número de Catálogo</td><td>Comentários</td></tr><tr><td>Beam-Balance</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Beam</td><td>madeira construída</td><td></td> em <td>casa, 25" l x 1" h x 3/4" w selada com verniz de poliuretano</td></tr><tr><td>C-clamp</td><td>Home Depot</td><td>1422-C</td><td>2 1/2"</td></tr> <tr><td>barreira</td><td>Home Depot</td><td></td><td>isopor, 18" x 17 1/2"</td></tr> <tr><td>mesa (para BB & BW)</td> fonte <td></td><td>de escritório genérica</td><td>37 "h x 30" w x 60 " l</td></tr> <tr><td> Nome</td> <td> Empresa </td> <td> Número de catálogo</td> <td> Comentários < / strong</td></tr> <tr><td>> Beam-Walk </td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Beam casa construída</td><td></td><td>Madeira 38-1/2" L x 1-3/4" H x 1" W Selado com Verniz de Poliuretano (~ 37" Fora do Chão)</td></tr><tr><td>Caixa de Escape</td><td>Construída</td><td></td> em <td>Casa Madeira Pintada de Preto 12 1/2 " L x 9" H x 7-1/4" W</td></tr><tr><td>Pregos (Pegs)</td><td></td><td></td><td>2"</td></tr><tr><td>Dobradiças</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Grampos Máquina de</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ruído</td> <td>BrancoSan Diego Instruments 9155 Brown Deer Rd, Suite 8 San Diego, CA 92121 Telefone: (858)530-2600</td><td></td><td>http://www.sandiegoinstruments.com/libraries/misc/datasheets/whitenoise.pdf</td></tr><tr><td></td><td>light Home Depot</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nome</td><td>Company</td><td>Número do Catálogo</td><td>Comentários</td></tr><tr><td><forte>Morris Water Maze</forte></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>fabricante de piscinas de fibra de vidro</td><td>desconhecido</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>(semelhante a um feito pela SDI)</td> <td>San Diego Instruments</td><td>7000-0723</td><td>72" de diâmetro x 30" de profundidade (~ 500 gal)</td></tr> <tr><td>plataforma de plexiglass</td><td>feita à mão por Maggie Parsley</td><td></td><td>10 cm de diâmetro, 26" de altura com silicone aplicado na superfície da plataforma para fornecer uma superfície de aderência</td></tr> <tr><td>(semelhante a uma feita pela SDI)</td><td>SDI</td><td>7500-0272</td><td></td></tr><tr><td>caixas de animais de plexiglass com tampas</td><td>UTMB Machine Shop</td><td></td><td>2 caixas, 10" l x 16" L x 9" h</td></tr><tr><td>holofotes/ lâmpadas de calor</td><td>Home Depot</td><td></td><td>3 ao redor da piscina, 2 caixas para secar animais</td></tr><tr><td>AnyMaze</td><td>San Diego Instruments 9155 Brown Deer Rd, Suite 8 San Diego, CA 92121 Telefone: (858)530-2600</td><td>/9001</td><td>http://www.sandiegoinstruments.com/any-maze-video-tracking/</td></tr></tbody></table>

detecção de défices comportamentais em ratos após lesão cerebral traumática

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

Com a crescente incidência de traumatismo crânio-encefálico (TCE) em populações civis e militares, TBI é considerada uma doença crônica; no entanto, alguns estudos têm investigado os efeitos a longo prazo da lesão em modelos de roedores de TCE. Aqui são mostrados medidas comportamentais que estão bem estabelecidas na pesquisa TBI por vezes cedo depois da lesão, tais como duas semanas, até dois meses. Alguns desses métodos anteriormente foram usados às vezes mais tarde, após a lesão, até a um ano, mas por muito poucos laboratórios. Os métodos demonstrados aqui são reflexos de uma avaliação neurológica curta para testar, um feixe-equilíbrio para testar o equilíbrio, a viga-pé para testar o equilíbrio e coordenação motora e uma versão de memória de trabalho do labirinto de Morris água que pode ser sensível a déficits em memória de referência. Ratos machos foram tratados e treinadas para neurológica, equilíbrio e coordenação motora testa antes de receber a lesão de percussão fluido parassagital (FPI) ou lesão de Souza. Ratos podem ser testados na avaliação neurológica curta (neuroscore), o feixe do equilíbrio, e o feixe-pé várias vezes, durante o teste sobre o labirinto de água só pode ser feito uma vez. Essa diferença é porque ratos podem lembrar a tarefa, confundindo assim os resultados de se repetir o teste é tentada no mesmo animal. Quando o teste de um a três dias após a lesão, diferenças significativas são detectadas em todas as três tarefas não-cognitivo. No entanto, diferenças na tarefa feixe-pé não foram detectáveis em pontos de tempo mais tarde (após 3 meses). Os défices foram detectados em 3 meses no feixe-equilíbrio e em 6 meses no neuroscore. Déficits na memória de trabalho foram detectados por até 12 meses após a lesão, e um défice na memória referência apareceu pela primeira vez em 12 meses. Assim, testes padrão comportamental podem ser medidas úteis de persistentes défices comportamentais depois FPI.

O objetivo dos testes comportamentais apresentados aqui é detectar déficits funcionais em ratos após lesão cerebral traumática. Quatro testes específicos são apresentados que detectar déficits em comportamentos para refletir o dano a áreas específicas do cérebro, estendendo-se às vezes até um ano após a lesão.

Detecção de défices comportamentais em ratos após lesão cerebral traumática

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

O objetivo geral do teste comportamental apresentado aqui é detectar déficits funcionais em ratos após lesão cerebral traumática. Serão apresentados quatro testes diferentes que detectam déficits na função neurológica ou cognitiva. Esses métodos podem ajudar a responder perguntas fundamentais na área de pesquisa de lesões cerebrais, como quais áreas do cérebro estão danificadas após uma lesão ou se um tratamento experimental é eficaz ou não.As principais vantagens dessas técnicas são que elas estão bem estabelecidas em muitos laboratórios e comprovadamente reprodutíveis, além de serem sensíveis a diferentes tipos de lesões cerebrais, como lesão por explosão e acidente vascular cerebral. Essas técnicas contribuem para o aprofundamento do entendimento sobre como a lesão cerebral traumática afeta as funções neurológicas e cognitivas, bem como para a avaliação de tratamentos experimentais em ratos. Geralmente, indivíduos novos no método enfrentarão dificuldades devido à experiência insuficiente no manejo de ratos e por não reservarem tempo adequado para a aclimatação dos animais antes do treinamento e dos testes.Isso é necessário para acalmar o rato, a fim de tornar o tempo de teste mais eficaz. Inicie o treinamento com o teste de flexão dos membros anteriores levantando o rato pela cauda e segurando-o a cerca de 15 a 30 cm acima da superfície da mesa. Observe se o rato estende ou flexiona os membros anteriores.Pontue a presença de flexão com um ou a ausência de flexão com um zero na folha de pontuação. Em seguida, para o teste de flexão dos membros posteriores, levante novamente a rata pela cauda e mantenha-a a cerca de 15 a 30 centímetros acima da superfície da mesa. Observe se a rata estende ou flexiona seus membros posteriores e pontue a presença de flexão com um ou a ausência de flexão com um zero.Para o próximo teste, levante a rata pela cauda e abaixe-a lentamente em direção à borda da mesa, até que o nariz esteja a cerca de 10 centímetros da borda. Mova a rata lentamente em direção à borda sem permitir que os vibrissas toquem a borda. Observe se a rata alcança e estende as patas dianteiras em direção à mesa.Avalie a presença ou ausência de patas dianteiras estendidas. Em seguida, para o teste de colocação acionado pelo contato, segure o rato com o corpo e a mão paralelos à borda da mesa e as patas dianteiras livres. Abaixe lentamente o rato em direção à borda da mesa até que os vibrissas de um dos lados toquem a borda da mesa.Observe se a rata estende a pata dianteira do mesmo lado dos vibrissas que estão tocando a mesa em direção à borda da mesa, assim que os vibrissas fizerem contato. Pontue a presença ou ausência de movimento de alcance em direção à mesa. Por fim, para o teste do reflexo de preensão da pata traseira, segure a rata com uma mão, posicionando o polegar e o indicador ao redor do tórax, abaixo das patas dianteiras.Toque suavemente a palma de cada pata traseira com um dedo indicador. Observe se a rata segura o dedo indicador e registre a presença ou ausência do reflexo de preensão. 24 horas após a cirurgia, inicie o teste de equilíbrio em trave colocando a rata na trave e acionando o cronômetro.Observe atentamente a rata por 60 segundos e registre a pontuação na planilha. Permita que a rata descanse brevemente entre os ensaios, seja no braço do experimentador ou na gaiola de origem. Inicie colocando a rata na caixa-alvo por um minuto.Após um minuto, remova a ratazana e inicie o ensaio ligando a luz e o ruído branco. Coloque a ratazana na trave na posição do orifício do pino mais próximo à caixa-alvo e permita que ela entre na caixa-alvo. Quando as patas dianteiras da ratazana cruzarem o limiar da caixa-alvo, desligue imediatamente as fontes de luz e ruído para assinalar o fim de um ensaio.Permita que a rata descanse na caixa-alvo por 30 segundos entre cada ensaio. Repita o treinamento na trave uma vez em cada posição dos pinos e a partir da posição inicial. Insira os pinos nos orifícios e realize uma travessia completa na trave com os pinos no lugar.Em seguida, utilizando um cronômetro, meça cada tentativa e repita até que a rata complete três tentativas em menos de cinco segundos. 24 horas após a cirurgia, teste o rato na travessia da viga utilizando a viga completa com os pinos no lugar. São colocadas pistas visuais ao redor do ambiente para fornecer pontos de referência que o rato possa aprender e lembrar a localização da plataforma escondida.Inicie o primeiro ensaio abrindo o software de rastreamento de vídeo e carregando o protocolo correto, incluindo o mapa do labirinto aquático com as posições da plataforma, duração da natação, número de ensaios, número de animais e grupos de tratamento. Coloque a plataforma na posição designada e verifique se ela corresponde ao mapa no software. Em seguida, posicione o rato no tanque voltado para a parede, na posição designada, e imediatamente inicie o cronômetro do programa de rastreamento e/ou o cronômetro manual.Permita que a rata encontre a plataforma em até 120 segundos. Quando a rata encontrar a plataforma, pare o cronômetro e anote o tempo na planilha. Observe que, se a rata não conseguir encontrar a plataforma, leve-a manualmente até a plataforma e registre 120 segundos.Permita que a rata permaneça sobre a plataforma por 15 segundos entre os ensaios. Após o segundo ensaio, coloque a rata na câmara aquecida por quatro minutos. Por fim, mova a plataforma para o segundo local e verifique se ela corresponde ao mapa no software.Repita os procedimentos dos ensaios um e dois até que todos os quatro pares de localização inicial e plataforma sejam concluídos. Os resultados do procedimento de neuroscore demonstram tanto o potencial de falso positivo no dia zero, anterior à cirurgia, quanto a sensibilidade deste teste em detectar pequenas diferenças no grupo com lesão cerebral traumática (TBI), de modo que o dia zero difere dos dias um, dois e três. Os resultados do teste de equilíbrio em trave demonstram a sensibilidade desse teste na detecção de déficits logo após a lesão e em um ponto temporal mais distante após a lesão.Os resultados do teste de caminhada na trave indicaram déficits logo após a lesão. No entanto, seis meses após a lesão, não há diferenças significativas entre os grupos, o que sugere que a cicatrização ocorreu no grupo lesionado. Além disso, observaram-se déficits na memória de trabalho três meses após a lesão, enquanto tanto a memória de trabalho quanto a memória de referência apresentaram déficits aos 12 meses após a lesão.É importante aclimatar as ratas ao manuseio e realizar um treinamento prévio para os testes de neuroscore, caminhada em barra e equilíbrio em barra. Uma vez dominada, a avaliação neurológica breve pode ser realizada rapidamente e sem necessidade de equipamentos especializados. Após os procedimentos de neuroscore, equilíbrio em barra e caminhada em barra, diferentes versões do labirinto aquático podem ser utilizadas, bem como outros paradigmas comportamentais, como o teste de reconhecimento de objeto novo, para responder questões adicionais relacionadas à aprendizagem e memória.Após assistir a este vídeo, você deverá ter uma boa compreensão de como detectar déficits neurológicos e cognitivos utilizando medidas comportamentais. A aclimatação ao manuseio, o pré-treinamento e a consistência durante a realização de experimentos comportamentais são todos essenciais.

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Research

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

A técnica de queda de peso modificada é um procedimento fácil e econômico usado para a indução de lesão cerebral traumática leve em ratos juvenis. Esta nova técnica produz sintomatologia clinicamente relevante que avançará no estudo de lesão cerebral traumática leve (mTBI) e concussão.

Um novo modelo de Mild Traumatic Brain Injury para ratos jovens

Mostramos que uma implantação de microeletrodos no córtex motor de ratos provoca déficits motor imediatos e duradouros. Os métodos propuseram neste documento contorno uma cirurgia de implante de microeletrodos e três roedores tarefas comportamentais para elucidar possíveis alterações na função motor fina ou bruta devido aos danos causados a implantação para o córtex motor.

Comportamentais de testes para avaliar déficits funcionais causados pela implantação de microeletrodos no córtex Motor rato roedor

O objetivo geral deste procedimento é obter informações microestruturais quantitativas do hipocampo em um rato com lesão cerebral traumática leve. Isto é feito usando um protocolo avançado difusão-tornado mais pesado da imagem latente de ressonância magnética e a análise baseada região--interesse de mapas paramétricos da difusão.

Imagem latente avançada da difusão no Hippocampus dos ratos com ferimento de cérebro traumático suave

O objetivo deste estudo é estabelecer e validar um modelo animal para pesquisa nos estágios de recuperação e sequela da isquemia cerebral testando infarto cerebral e função sensóriomotor após oclusão/refusão da artéria cerebral média (MCAO/R) após 1-90 dias em ratos.

Um modelo pré-clínico para avaliar a recuperação do cérebro após acidente vascular cerebral agudo em ratos

Lesão cerebral traumática (TCE) é comumente associada com prejuízo de memória. Aqui, apresentamos um protocolo para avaliar a memória de trabalho espacial após o TBI através de uma tarefa métrica. Um teste métrico é uma ferramenta útil para estudar o prejuízo de memória de trabalho espacial após o TBI.

Um teste métrico para avaliar a memória espacial de trabalho em ratos adultos após lesão cerebral traumática

O presente protocolo descreve um modelo de traumatismo cranioencefálico induzido por percussão fluida em ratos, seguido por uma série de testes comportamentais para compreender o desenvolvimento do comportamento dominante e submisso. A utilização desse modelo de traumatismo cranioencefálico em conjunto com testes comportamentais específicos possibilita o estudo dos prejuízos sociais após a lesão cerebral.

Avaliação do Comportamento Dominante-Submisso em Ratos Adultos Após Traumatismo Cranioencefálico

Aqui, é demonstrado como um modelo de traumatismo cranioencefálico fechado acordado pode ser usado para examinar os efeitos do traumatismo cranioencefálico leve repetido (r-mTBI) na plasticidade sináptica no hipocampo. O modelo replica características importantes do r-mTBI em pacientes e é usado em conjunto com a eletrofisiologia in vitro .

Avaliação das Alterações na Plasticidade Sináptica Utilizando um Modelo de Traumatismo Cranioencefálico Leve

Um sistema para adquirir dados de sessões de comportamento individual autoiniciadas dentro de um ambiente de gaiola de colônia social é apresentado. A eficácia deste sistema é demonstrada por meio de uma avaliação automatizada de alcance qualificado, permitindo a caracterização de deficiências motoras pós-AVC, possíveis alterações comportamentais relacionadas à motivação, variações circadianas e outras variáveis dependentes inovadoras.

Coleta de dados comportamentais de ratos autoiniciados para caracterizar déficits pós-AVC

Aqui, apresentamos um modelo de traumatismo cranioencefálico (TCEm) de cabeça fechada em ratos e sua validação exibindo notável semelhança com o TCEm humano em relação às manifestações comportamentais durante as fases aguda e subaguda.

Modelo de Lesão Traumática Leve de Cabeça Fechada em Rato e sua Validação

Este protocolo apresenta um modelo de camundongo modificado de lesão cerebral traumática leve repetitiva (rmTBI) induzida por um método de traumatismo cranioencefálico fechado (CHI). A abordagem apresenta uma janela de crânio afinado e percussão de fluido para reduzir a inflamação comumente causada pela exposição às meninges, juntamente com melhor reprodutibilidade e precisão na modelagem de rmTBI em roedores.

Modelo de camundongo modificado de lesão cerebral traumática leve repetitiva incorporando janela de crânio afinado e percussão fluida

Aprenda a detectar déficits neurológicos e cognitivos em ratos após lesão cerebral traumática usando testes comportamentais padronizados. Este método auxilia pesquisadores a avaliar danos cerebrais e eficácia de tratamentos experimentais.

Detecção de défices comportamentais em ratos após lesão cerebral traumática

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