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Contagem de proteínas em células únicas com gotículas endereçável Microarrays
Contagem de proteínas em células únicas com gotículas endereçável Microarrays
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JoVE Journal Cancer Research
Counting Proteins in Single Cells with Addressable Droplet Microarrays

Contagem de proteínas em células únicas com gotículas endereçável Microarrays

Full Text
9,028 Views
12:25 min
July 6, 2018

DOI: 10.3791/56110-v

Stelios Chatzimichail*1, Pashiini Supramaniam*1, Oscar Ces1, Ali Salehi-Reyhani1

1Institute of Chemical Biology, Department of Chemistry,Imperial College London

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aqui nós apresentamos gotículas endereçável microarrays (ADMs), um método de matriz com base gota capaz de determinar a abundância absoluta de proteínas em células únicas. Podemos demonstrar a capacidade de ADMs caracterizam a heterogeneidade na expressão do tumor supressor p53 de proteína em uma linhagem de células cancerosas humanas.

O objetivo geral deste experimento é determinar o número absoluto de cópias de uma proteína alvo com resolução de célula única. As técnicas de célula única permitirão uma melhor compreensão do comportamento de uma proteína no que se refere a um dogma central e ajudarão na quantificação precisa da expressão gênica controlada. Trabalhar no nível de uma única célula pode capturar a rica heterogeneidade da população de células que, de outra forma, seria perdida pela média que ocorre com as técnicas bioquímicas tradicionais.

Geralmente, os indivíduos novos neste método terão dificuldades devido à sensibilidade dos ensaios de célula única ou a uma quantidade limitada de proteína em cada célula. Tivemos a ideia desse método pela primeira vez quando desejamos realizar um ensaio de proteína de célula única que pudesse ser facilmente amostrado para análise posterior no fluxo. Comece este procedimento fazendo chips e imprimindo microarrays de anticorpos conforme descrito no protocolo de texto.

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Cancer Research edição 137 gotículas microfluídica análise de proteínas de célula única heterogeneidade microfluídica gotículas quantificação absoluta p53 tamanho da célula

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