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DOI: 10.3791/56169-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Um protocolo detalhado de um modelo de mouse para enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) colonização usando bactérias bioluminescência-etiquetado é apresentado. A detecção destas bactérias bioluminescentes por um não-invasivo na vivo sistema de animais vivos de imagem pode avançar nossa compreensão atual da colonização de EHEC.
O objetivo geral deste experimento é detectar a colonização enterohemorrágica de E.coli em camundongos usando um sistema de imagem in vivo não invasivo. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da patogenicidade enterohemorrágica de E.coli, como a colonização. A principal vantagem desta técnica é que a colonização por EHEC pode ser detectada em animais vivos sem sacrificar o animal.
Para começar, coloque um estoque negativo de 80 graus Celsius de bactérias E.coli O157: H7 EDL933 que abrigam um plasmídeo de luciferase em uma placa de ágar LB com 50 microgramas por mililitro de canamicina. Cultive as bactérias por 16 a 18 horas a 37 graus Celsius. Escolher uma única colónia da placa de overnight e inocular três mililitros de meio LB com 50 microgramas por mililitro de canamicina.
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