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DOI: 10.3791/56200-v
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O objetivo do presente protocolo é alterar a penetrância de letais esqueléticos fenótipos mutantes no zebrafish por reprodução seletiva. Letais mutantes não podem ser cultivados até a idade adulta e se criados, portanto este protocolo descreve um método de controle e selecionando penetrância através de várias gerações por testes de progênie.
O objetivo geral dessa estratégia de reprodução é manipular a penetrância mutante para cima ou para baixo. Este método de reprodução seletiva permite uma compreensão mais completa dos fenótipos mutantes. Ao gerar cepas mutantes de alta e baixa penetrância, toda a série fenotípica de uma mutação pode ser compreendida.
A maioria dos peixes-zebra escala onde os mutantes são letais recessivos, então os mutantes homozigotos morrem antes de poderem ser criados diretamente. Portanto, empregamos a estratégia clássica de reprodução seletiva de teste de progênie, que demonstramos aqui. Tivemos o item para este método pela primeira vez ao tentar registrar o desenvolvimento de células ósseas ectópicas com lapso de tempo.
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