Name: Construção e avaliação de um modelo murino de osteólise raspagem pela exposição a partículas de CoCrMo no afrouxamento asséptico (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: Aprenda a construir um modelo murino de osteólise calvariana usando nanopartículas de CoCrMo para estudar o afrouxamento asséptico em próteses articulares. Este método avalia interações celulares e respostas osteolíticas.

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Este estudo foi suportado pela Fundação Nacional de ciências naturais da China (81572111), clínica de ciência e tecnologia projeto Fundação da província de Jiangsu (BL2012002), projeto de pesquisa científica de Nanjing (201402007), a ciência Natural Fundação da província de Jiangsu (BK20161385) e a Fundação especial da Associação médico chinês (2015COS0810).

Todos os métodos descritos aqui foram aprovados pelo Comitê de uso (IACUC) da Universidade de Nanjing e institucional Cuidado Animal.
1. CoCrMo partícula preparação
<ol><li>Obter partículas CoCrMo usando um alto vácuo fabricadas três-elétrodo corrente4. Liga CoCrMo lugar no instrumento sob vácuo de Pa 10-3 , 0,04 MPa argônio e hidrogênio 3:2 (v/v) e 650 cátodo A atual.</li>
	<li>Medir os diâmetros das partículas CoCrMo.<ol>
<li>Adicione 1 mg de CoCrMo partículas em 1,5 mL de etanol anidro.</li>
		<li>Resuspenda CoCrMo partículas em etanol anidro por agitação ultra-sônica em 28 kHz e 600 W por 5 min.</li>
		<li>Aplique uma gota (cerca de 20 µ l) da suspensão resultante na tabela objetiva de um microscópio eletrônico de transmissão (TEM). Capture a série de fotos TEM 200 kV tensão de aceleração e 0,24 resolução nm.</li>
		<li>Use o software fornecido para calcular a distribuição de tamanho de diâmetro e partícula média em micrografias TEM.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Descontaminar endotoxinas<ol>
<li>50 g de partículas por 15 min a 121 ° C e 15 libras por polegada quadrada de autoclave.</li>
		<li>Detecção de endotoxinas por um ensaio quantitativo de Limulus métodos Lysate (LAL) (< 0,25% EU/mL foi considerado para indicar a ausência de endotoxinas)5.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Resuspenda as partículas em tampão fosfato salino (PBS), em uma concentração de 50 mg/mL como solução6.</li>
</ol>2. construção do modelo de osteólise raspagem
<ol><li>Anestesia a 6 semana de idade withpentobarbital de (seis ratos por grupo) de camundongos C57BL/J6 (50 mg/kg). Use o teste do beliscão para avaliar o nível de anestesia. Evitar a secagem dos olhos com soro fisiológico normal.</li>
	<li>Coloque os ratos de bruços. Retire a pele sobre o crânio com uma máquina de barbear e desinfectar a pele usando bolas de algodão médico contendo 75% de etanol.</li>
	<li>Para a localização do ponto, identifica dois pontos, incluindo os pontos médios entre os dois olhos e ouvidos, respectivamente. Em seguida, determinar a linha entre as duas acima pontos e faça uma incisão na pele ao longo da linha acima com uma tesoura (figura 1A).</li>
	<li>Remova o periósteo craniano a calvaria com um bisturi (figura 1B)6.</li>
	<li>Sutura de pele em ambas as extremidades com sutura interrompida simples.</li>
	<li>Faça uma linha de sutura no meio da incisão sem atar. Segure as duas extremidades da linha de sutura.</li>
	<li>Incorpore 50 µ l de suspensão de partículas de CoCrMo (50 mg/mL, em PBS) no meio do calvarias (Figura 1)2.</li>
	<li>Nó o último ponto dentro simples sutura interrompida (Figura 1).</li>
	<li>Manter os ratos por mais 2 semanas.</li>
</ol>3. avaliação do modelo de osteólise raspagem por Microtomografia
<ol><li>Sacrifica os ratos com dióxido de carbono. Decapitar os ratos no plano horizontal. Remova o tecido de cérebro no interior e a pele e pelo do lado de fora. Colha o calvarias para novas experiências.</li>
	<li>Limpe suavemente todo o tecido mole sobre o calvaria com uma pinça. Corrigi o calvarias apuradas em paraformaldeído 4% a 4 ° C por 24 h. mergulhar o calvarias em PBS 24 h antes de micro-CT varredura.</li>
	<li>Analisar o calvarias de ratos por micro-CT de alta resolução com uma resolução isométrica de 18 µm e as configurações de energia de raios-x de 45 kV e 550 mA.</li>
	<li>Realizar a reconstrução tridimensional de dados micro-CT com o software.</li>
	<li>Qualitativa e análise quantitativa.<ol>
<li>Primeiro, selecione a região quadrada ao redor da sutura mediana como a região de interesse.</li>
		<li>Em segundo lugar, medir a densidade mineral óssea (DMO), volume/total de osso volume (BV/TV), número trabecular (Tb.N), espessura trabecular (Tb.Th), separação/espaçamento trabecular (Tb.Sp) e percentual de porosidade total com o software fornecido para micro-CT.</li>
		<li>Em terceiro lugar, compare os três grupos para várias medições por One-Way ANOVA. Para post-hoc de análise de variância, aplica o método de Bonferroni2.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. avaliação do modelo de osteólise raspagem pela coloração H & E
<ol><li>Descalcificar amostras de calvaria em 15% ácido etilenodiaminotetracético (EDTA)-PBS a 4 ° C. Modificar a solução de descalcificação a cada dia por 3 semanas.</li>
	<li>Incorporar as amostras descalcificadas em parafina para um 2 x 1 cm x 1 cubo de cm e corte-os em 2 seções de µm na área de deposição de partículas.</li>
	<li>Manchar as seções com hematoxilina e eosina conforme descrito anteriormente7.</li>
	<li>Capture o micrografias do pathomorphism global por microscopia de luz.</li>
</ol>

<ol><li>Dong, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antisense+oligonucleotide+targeting+TNF-alpha+can+suppress+Co-Cr-Mo+particle-induced+osteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Antisense oligonucleotide targeting TNF-alpha can suppress Co-Cr-Mo particle-induced osteolysis.</a> J Orthop Res. 26 (8), 1114-1120 (2008).</li>
<li>Deng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SIRT1+protects+osteoblasts+against+particle-induced+inflammatory+responses+and+apoptosis+in+aseptic+prosthesis+loosening%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">SIRT1 protects osteoblasts against particle-induced inflammatory responses and apoptosis in aseptic prosthesis loosening.</a> Acta Biomater. 49, 541-554 (2017).</li>
<li>Langlois, J., Hamadouche, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+animal+models+of+wear-particle+osteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Orthop%22%5BJournal%5D)">New animal models of wear-particle osteolysis.</a> Int Orthop. 35 (2), 245-251 (2011).</li>
<li>Wang, P., Zhao, F. X., Zhang, Z. Z. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/287666498_Preparation_of_ultrafine_silver_powders_by_DC_arc_plasma">Preparation of ultrafine zinc powders by DC arc plasma evaporation method.</a> Chinese Journal of Nonferrous Metals. 21 (9), 2236-2241 (2011).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fibroblast+expression+of+RANKL+in+CoCrMo-particle-induced+osteolysis+is+mediated+by+ER+stress+and+XBP1s%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">The fibroblast expression of RANKL in CoCrMo-particle-induced osteolysis is mediated by ER stress and XBP1s.</a> Acta Biomater. 24, 352-360 (2015).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autophagy+mediated+CoCrMo+particle-induced+peri-implant+osteolysis+by+promoting+osteoblast+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Autophagy%22%5BJournal%5D)">Autophagy mediated CoCrMo particle-induced peri-implant osteolysis by promoting osteoblast apoptosis.</a> Autophagy. 11 (12), 2358-2369 (2015).</li>
<li>Wang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Particle-induced+osteolysis+mediated+by+endoplasmic+reticulum+stress+in+prosthesis+loosening%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Particle-induced osteolysis mediated by endoplasmic reticulum stress in prosthesis loosening.</a> Biomaterials. 34 (11), 2611-2623 (2013).</li>
<li>Yang, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adeno-associated+virus-mediated+osteoprotegerin+gene+transfer+protects+against+particulate+polyethylene-induced+osteolysis+in+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Adeno-associated virus-mediated osteoprotegerin gene transfer protects against particulate polyethylene-induced osteolysis in a murine model.</a> Arthritis Rheum. 46 (9), 2514-2523 (2002).</li>
<li>Liu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autophagy+mediated+TiAl%286%29V%284%29+particle-induced+peri-implant+osteolysis+by+promoting+expression+of+TNF-alpha%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Autophagy mediated TiAl(6)V(4) particle-induced peri-implant osteolysis by promoting expression of TNF-alpha.</a> Biochem Biophys Res Commun. 473 (1), 133-139 (2016).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ER+Stress+Mediates+TiAl6V4+Particle-Induced+Peri-Implant+Osteolysis+by+Promoting+RANKL+Expression+in+Fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">ER Stress Mediates TiAl6V4 Particle-Induced Peri-Implant Osteolysis by Promoting RANKL Expression in Fibroblasts.</a> PLoS One. 10 (9), e0137774(2015).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TiAl6V4+particles+promote+osteoclast+formation+via+autophagy-mediated+downregulation+of+interferon-beta+in+osteocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">TiAl6V4 particles promote osteoclast formation via autophagy-mediated downregulation of interferon-beta in osteocytes.</a> Acta Biomater. 48, 489-498 (2017).</li>
<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lycorine+suppresses+RANKL-induced+osteoclastogenesis+in+vitro+and+prevents+ovariectomy-induced+osteoporosis+and+titanium+particle-induced+osteolysis+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Lycorine suppresses RANKL-induced osteoclastogenesis in vitro and prevents ovariectomy-induced osteoporosis and titanium particle-induced osteolysis in vivo.</a> Sci Rep. 5, 12853(2015).</li>
<li>Neuerburg, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+calcitonin+receptor+signalling+in+polyethylene+particle-induced+osteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">The role of calcitonin receptor signalling in polyethylene particle-induced osteolysis.</a> Acta Biomater. 14, 125-132 (2015).</li>
<li>Catelas, I., Jacobs, J. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20415362">Biologic activity of wear particles.</a> Instr Course Lect. 59, 3-16 (2010).</li>
<li>Liu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biological+response+to+nanometre-sized+polymer+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">The biological response to nanometre-sized polymer particles.</a> Acta Biomater. 23, 38-51 (2015).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

Há dois métodos principais para a osteólise induzida por partículas de desgaste em ratos: o modelo de ar-bolsa e o modelo de osteólise raspagem. No modelo de bolsa de ar, uma bolsa de ar gerada por via subcutânea é estabelecida, seguido pela introdução de partículas de desgaste e implantação para o osso tecido8. A parede da bolsa imita o periósteo no afrouxamento asséptico. No entanto, a implantação de osso é nonvascular sem nenhuma atividade biológica, o que torna difícil avaliar interações diret...

Afrouxamento asséptico é a causa mais comum de artroplastia total de quadril (THA) e falha de total de joelho (ATJ) de artroplastia, que requer cirurgia de revisão1. No entanto, o mecanismo subjacente permanece incerto2. Um seguimento longo é necessário para detectar a osteólise induzida por partículas, cuja ocorrência é rara; Portanto, é um desafio para explorar sua patogênese em casos clínicos. Daí, mais estudos focando mecanismos celulares e tecidos complexos requerem que ambos experimentos na vivo em usam modelos de osteólise induzida por partículas e ensaios em vitro em células relacionadas ao osso homeostase3. Um válido modelo animal é importante para revelar os efeitos de partículas de desgaste na perda óssea, fornecendo evidências para mais celulares ensaios.
Um modelo murino de osteólise raspagem construído pela exposição a partículas CoCrMo é um método eficaz e válido para avaliar as interacções entre partículas e várias células no afrouxamento asséptico. Neste modelo, CoCrMo partículas causam osteólise raspagem por indução de citocinas inflamatórias em macrófagos, ativação de osteoclastos, inibindo a proliferação de osteoblastos e promover apoptose de osteoblastos.
Apenas leva duas semanas para estabelecer esse modelo. Osteólise pode ser visualizada e quantificada por hematoxilina e eosina (H & E) coloração e micro computado tomografia computadorizada (micro-CT)2. Além disso, este modelo tem um relativamente baixo custo e transgênico e nocaute mouse modelos podem ser usados para um grande número de compostos em várias doses3de tela.
O procedimento para estabelecer e avaliar este modelo é simples. Primeiro, CoCrMo partículas foram obtidas por alto vácuo três-elétrodo corrente e resuspended em tampão fosfato salino (PBS), em uma concentração de 50 mg/mL. Em seguida, 50 µ l da suspensão resultante foi aplicado para o meio do calvaria murino após o ponto de separação entre o periósteo craniana por dissecação. Os ratos foram sacrificados após duas semanas, e foram colhidas amostras de calvaria; análises qualitativas e quantitativas foram realizadas por H & E mancha de andmicro-CT.
Um modelo murino de osteólise raspagem construído pela exposição a partículas CoCrMo é uma ferramenta ideal para avaliar as interações entre partículas CoCrMo e várias células, como macrófagos, fibroblastos, osteoblastos e osteoclastos, no afrouxamento asséptico.

<table><tbody><tr><td>Liga CoCrMo de prótese</td><td>Waldemar Link GmbH & Co</td><td>GEMINI MK II</td><td>Matéria-prima para obter nanopartículas de CoCrMo</td></tr><tr><td>Fabricado de corrente contínua de três eletrodos de alto vácuo</td><td>Faculdade de Ciência dos Materiais e Engenharia, Universidade de</td><td></td> Nanjing <td>Ratos</td></tr><tr><td>C57BL/6J machos de 6 semanas de idade</td> Centro <td>de pesquisa animal modelo da Universidade de Nanjing</td><td>N000013</td><td></td></tr><tr><td>100% de etanol</td><td>Reagente de Nanjing</td><td>C0691514023</td><td>Solvente de nanopartículas de CoCrMo para varredura de microscópio eletrônico de</td></tr><tr><td>transmissão Tubos de microcentrífuga de 1,5 ml</td><td>Taizhou Weierkang Medical Supplies co., LTD</td><td>W603</td><td></td></tr><tr><td>Balança microanalítica</td><td>Shenzhen Qun long Instrument Equipment Co,. Instrumento</td> científico co de Shanghai Yuhao do abanador ultrassônico <td>do LTD EX125DZH</td><td></td></tr><tr><td></td><td>., LTD</td><td>YH-200DH</td> para suspender o microscópio eletrônico da transmissão das <td>nanopartículas de CoCrMo</td></tr><tr><td></td><td></td><td>Software Compix</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Inc.</td> de Digit<td>Versão 6.6</td><td>Para calcular o diâmetro médio e a distribuição do tamanho das partículas.</td></tr><tr><td>Panela de esterilização de alta mão</td><td>QIULONGYIQI</td><td>KYQL-100DS</td><td>Para descontaminar endotoxina</td></tr><tr><td>Limulus Amebocyte Lysate (LAL) Ensaio</td><td>Charles River</td><td>R13025</td><td>Para detectar endotoxina&nbsp;</td></tr><tr><td>Tubos de microcentrífuga de 15 ml</td><td>Taizhou Suyi Medical</td><td>B122</td><td></td></tr><tr><td>Solução salina tamponada com fosfato</td><td>Boster Biological Technology</td><td>AR0030</td><td>Solvente de solução de estoque de nanopartículas de CoCrMo</td></tr><tr><td>Pentobarbital Sódio</td><td>Sigma</td><td>P3761</td><td>Para anestesiar camundongos</td></tr><tr><td>Solução salina normal</td><td>SACKLER</td><td>SR8572EP-15</td><td>Para evitar o ressecamento dos olhos dos camundongos</td></tr><tr><td>75% Etanol</td><td>Nanjing Reagente</td><td>C0691560275</td><td>Desinfecção</td></tr><tr><td>Bola de algodão médica</td><td>Shuitao</td><td>1278298933</td><td>Disinfecção</td></tr><tr><td>Barbeador</td><td>Kemei</td><td>KM-3018</td><td>Para raspar a pele</td></tr><tr><td>Tesoura</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>S12005-10</td><td>Para incisar a pele</td></tr><tr><td>Sutura</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>F34001-01</td><td>Para suturar a pele</td></tr><tr><td>Porta-agulha</td><td>RWD LIFE CIÊNCIA</td><td>F33001-01</td><td>Para suturar a pele</td></tr><tr><td>Agulha</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>R14003-12</td><td>Para suturar a pele</td></tr><tr><td>Pinça de vaso</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>F22003-09</td><td>Para suturar a pele</td></tr><tr><td>Bisturi</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>S31010-01</td><td>Para colher pinças de calvária</td></tr><tr><td></td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>F12006-10</td><td>Para colher calvária</td></tr><tr><td>100 &micro; L pipetas</td><td>Eppendorf</td><td>3120000240</td><td>Para embutir partículas suspensão nas calvatias</td></tr><tr><td>100 &micro; L pontas de pipeta</td><td>AXYGEN</td><td>T-200-Y</td><td>Para incorporar partículas suspensão nas calvatias</td></tr><tr><td>5 ml Microtubos</td><td>Taizhou Weierkang Medical Supplies co., LTD</td><td>W621</td><td></td></tr><tr><td>4% Paraformaldeído</td><td>Servicebio</td><td>G1101</td><td>Fixação</td></tr><tr><td>Micro Tomografia Computadorizada&nbsp;</td><td>SkyScan</td><td>SkyScan1176</td><td></td></tr><tr><td>Ácido Etileno Diamina Tetracético</td><td>Servicebio</td><td>G1105</td><td>Parafina de Descalcificação</td></tr><tr><td></td><td>Servicebio</td><td>#0001</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de fatiar parafina</td><td>Leica</td><td>RM2125RTS</td><td></td></tr><tr><td>Lâmina de vidro</td><td>Servicebio</td><td>G6004</td><td></td></tr><tr><td>Vidro de cobertura</td><td>Servicebio</td><td>200</td><td></td></tr><tr><td>Kit de coloração HE</td><td>Servicebio</td><td>#1-5</td><td>Coloração HE</td></tr><tr><td>Microscópio óptico</td><td>Nikon</td><td>E200</td><td></td></tr></tbody></table>

construção e avaliação de um modelo murino de osteólise raspagem pela exposição a partículas de cocrmo no afrouxamento asséptico

Construction and Evaluation of a Murine Calvarial Osteolysis Model by Exposure to CoCrMo Particles in Aseptic Loosening

A osteólise induzida por partículas de desgaste é a principal causa de afrouxamento asséptico em artroplastia falha, mas o mecanismo subjacente permanece obscuro. Devido ao tempo de follow-ups necessário para a detecção e a ocorrência esporádica, é difícil avaliar a osteólise induzida por ofparticle de patogênese em casos clínicos. Daí, modelos animais ideais são necessários para estudos adicionais. O modelo murino de raspagem osteólise estabelecido pela exposição a partículas CoCrMo é uma ferramenta eficaz e válida para avaliar as interacções entre partículas e várias células no afrouxamento asséptico. Neste modelo, partículas CoCrMo primeiro foram obtidas por alto vácuo três-elétrodo corrente e resuspended em tampão fosfato salina em uma concentração de 50 mg/mL. Em seguida, 50 µ l da suspensão resultante foi aplicado para o meio do calvaria murino após o ponto de separação entre o periósteo craniana por dissecação. Depois de duas semanas, os ratos foram sacrificados e calvaria foram colhidas; avaliações qualitativas e quantitativas foram realizadas pela hematoxilina e eosina manchando e micro computadorizada. Os pontos fortes deste modelo incluem a simplicidade do procedimento, avaliação quantitativa da perda óssea, rapidez de desenvolvimento de osteólise, potencial uso de transgénico ou modelos de nocaute e um custo relativamente baixo. No entanto, este modelo não para ser usado para avaliar a força mecânica e efeitos crônicos de partículas no afrouxamento asséptico. Modelo murino osteólise raspagem gerado pela exposição a partículas CoCrMo é uma ferramenta ideal para avaliar as interações entre as partículas de desgaste e várias células, por exemplo, macrófagos, fibroblastos, osteoblastos e osteoclastos, no afrouxamento asséptico.

As partículas de CoCrMo in-house nanoescala produzidos foram em torno de 50 nm (erro padrão de 3,56) de diâmetro, conforme quantificada pela TEM (Figura 2). Após a exposição do rato calvarias a CoCrMo partículas, os animais (n = 6 por grupo) foram mantidas por mais duas semanas. Dentro de duas semanas, a incisão raspagem foi completamente curada, e a sutura pode cair. Qualquer infecção local ou pseudartrose maio afetam a avaliação de perda óssea. Após o sacri...

Este manuscrito descreve um modelo murino de osteólise raspagem por exposição a partículas CoCrMo, que constitui um modelo animal ideal para avaliar as interações entre as partículas de desgaste e várias células no afrouxamento asséptico.

Construção e avaliação de um modelo murino de osteólise raspagem pela exposição a partículas de CoCrMo no afrouxamento asséptico

Wear particle-induced osteolysis is a major cause of aseptic loosening in arthroplasty failure, but the underlying mechanism remains unclear. Due to long ...

O objetivo geral deste procedimento é construir e avaliar o modelo de osteólise calvarial murina mediante exposição a nanopartículas de cobalto-cromo-molibdênio. A osteólise induzida por partículas de desgaste é uma causa importante do afrouxamento asséptico na falha da artroplastia, mas os mecanismos subjacentes a isso são pouco claros. Devido ao longo tempo de acompanhamento e à ocorrência esporádica, é difícil investigar a patogênese do afrouxamento asséptico em casos clínicos.Portanto, um modelo animal de desgaste é necessário para estudos adicionais. Em nosso laboratório, um modelo murino de osteólise calvarial induzido por partículas de liga de cobalto é um modelo eficaz para estudar a patogênese do afrouxamento asséptico. Isso é realizado primeiramente gerando partículas nanométricas de cromo-cobalto-molibdênio a partir de próteses de liga de cobalto e re-suspendendo-as em solução salina tamponada com fosfato numa concentração de 15 miligramas por mililitro.O próximo passo é identificar a posição da incisão em uma linha entre os dois pontos médios entre os olhos e as orelhas, respectivamente. Em seguida, remova o periósteo craniano do crânio por dissecação por choque. A segu

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Metodologia aprimorada para estudar a osteogênese pós-natal via ossificação intramembranosa em um modelo de lesão da medula óssea murina

Aprenda a construir um modelo murino de osteólise calvariana usando nanopartículas de CoCrMo para estudar o afrouxamento asséptico em próteses articulares. Este método avalia interações celulares e respostas osteolíticas.

Construção e avaliação de um modelo murino de osteólise raspagem pela exposição a partículas de CoCrMo no afrouxamento asséptico (Vídeo) | JoVE Journal

Construção e avaliação de um modelo murino de osteólise raspagem pela exposição a partículas de CoCrMo no afrouxamento asséptico

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