Direcionamento de tióis cisteína para in Vitro site-specific glicosilação de proteínas recombinantes

O objetivo geral deste procedimento é incorporar resíduos de cisteína em proteínas por mutagênese dirigida ao local em locais nativamente glicosilados e empregar abordagens de fixação e avaliação de glicose in vitro para avaliar a eficiência e os efeitos estruturais da glicosilação. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da Biologia Estrutural, tais como, quais são as consequências estruturais da glicosilação de proteínas e como essas modificações afetam os mecanismos subjacentes de função? As principais vantagens desta técnica são que ela é facilmente adaptável ao estudo ou manuseio da glicosilação.

É altamente eficiente e tanto as perturbações da estrutura quanto a eficiência podem ser avaliadas rapidamente. As implicações dessa técnica se estendem para a terapia de doenças porque os padrões alterados de glicosilação têm sido associados a vários cânceres e distúrbios neurodegenerativos. Embora esse método possa fornecer informações sobre os efeitos das proteínas nativamente glicosiladas, ele também pode fornecer informações muito necessárias sobre como alterar os padrões de glicosilação que podem contribuir para essa gama de doenças.