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DOI: 10.3791/56324-v
Lauren E. Woodard1,2,3, Richard C. Welch2, Felisha M. Williams2, Wentian Luo2, Jizhong Cheng3, Matthew H. Wilson1,2,3
1Department of Veterans Affairs,Tennessee Valley Healthcare System, 2Departments of Medicine and Pharmacology,Vanderbilt University Medical Center, 3Department of Medicine,Baylor University College of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol describes a method to inject plasmid DNA into the mouse kidney via the renal pelvis to produce transgene expression specifically in the kidney. This technique allows for reproducible protein expression in the adult mouse kidney, addressing key questions in nephrology.
Este protocolo descreve um método para injetar plasmídeo no rim do rato através da pelve renal para produzir a expressão do transgene especificamente no rim.
O objetivo geral deste procedimento cirúrgico é produzir expressão de proteínas a partir do DNA do plasmídeo no rim de camundongo adulto. Este método é uma nova ferramenta para abordar questões-chave em nefrologia, como a expressão de uma proteína de interesse afeta o rim adulto. A principal vantagem dessa técnica é que ela produz expressão proteica de forma reprodutível, especificamente no rim, ao contrário de outros métodos que também podem produzir expressão gênica em outros órgãos.
A demonstração visual desse método é crítica, pois a injeção da pelve renal requer exposição cuidadosa e deve ser feita rapidamente para que o DNA plasmático entre nas células. Comece ressuspendendo o DNA do plasmídeo no tampão de entrega hidrodinâmico. Em uma almofada de calor circulada de água coberta com uma almofada azul, coloque o mouse.
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