Name: Análise de 18FDG PET-CT Imaging como uma ferramenta para estudar infecção por Mycobacterium tuberculosis e tratamento em primatas não-humanos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-09-05T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 4 s
Description: Aprenda a analisar imagens de PET/CT com 18F-FDG em primatas não-humanos infectados com Mycobacterium tuberculosis. Este método permite acompanhar a infecção e o tratamento em tempo real, avaliando a progressão da doença e a reativação latente sem necessidade de necropsias periódicas.

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Os autores desejam reconhecer Mark Rodgers para delinear os procedimentos de infecção e L. Eoin Carney e Brian Lopresti para orientação no estabelecimento desses procedimentos de imagem. Financiamento para este trabalho foi fornecido pela Fundação Bill e Melinda Gates (J.L.F., P.L.L.), National Institutes of Health, institutos nacional de alergia e AI111871 de R01 de doenças infecciosas (P.L.L.), nacional coração, pulmão e sangue Instituto R01 HL106804 (J . L.F.), R01 HL110811.

<ol><li>World Health Organization. Global Tuberculosis Report 2016. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.who.int/tb/publications/global_report/en/">http://www.who.int/tb/publications/global_report/en/</a> (2017).</li>
<li>Barry, C. E. 3rd, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+spectrum+of+latent+tuberculosis%3A+rethinking+the+biology+and+intervention+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Microbiol%22%5BJournal%5D)">The spectrum of latent tuberculosis: rethinking the biology and intervention strategies.</a> Nat Rev Microbiol. 7 (12), 845-855 (2009).</li>
<li>Lin, P. L., Flynn, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+latent+tuberculosis%3A+a+moving+target%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Understanding latent tuberculosis: a moving target.</a> J Immunol. 185 (1), 15-22 (2010).</li>
<li>Pawlowski, A., Jansson, M., Skold, M., Rottenberg, M. E., Kallenius, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuberculosis+and+HIV+co-infection%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Tuberculosis and HIV co-infection.</a> PLoS Pathog. 8 (2), e1002464(2012).</li>
<li>Keane, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TNF-blocking+agents+and+tuberculosis%3A+new+drugs+illuminate+an+old+topic%5BTitle%5D)+AND+%22Rheumatology+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">TNF-blocking agents and tuberculosis: new drugs illuminate an old topic.</a> Rheumatology (Oxford). 44 (6), 714-720 (2005).</li>
<li>Lin, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+CT+Identifies+Reactivation+Risk+in+Cynomolgus+Macaques+with+Latent+M.+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">PET CT Identifies Reactivation Risk in Cynomolgus Macaques with Latent M. tuberculosis.</a> PLoS Pathog. 12 (7), e1005739(2016).</li>
<li>Flynn, J. L., Klein, E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFlynn%2C+JL+%22A+color+atlas+of+comparative+pulmonary+tuberculosis+histopathology%22">A color atlas of comparative pulmonary tuberculosis histopathology</a>. Dick, T., Leong, V. D. J. , CRC. 83-106 (2011).</li>
<li>Signore, A., Mather, S. J., Piaggio, G., Malviya, G., Dierckx, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+of+inflammation%2Finfection%3A+nuclear+medicine+and+optical+imaging+agents+and+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Rev%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging of inflammation/infection: nuclear medicine and optical imaging agents and methods.</a> Chem Rev. 110 (5), 3112-3145 (2010).</li>
<li>James, M. L., Gambhir, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+molecular+imaging+primer%3A+modalities%2C+imaging+agents%2C+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">A molecular imaging primer: modalities, imaging agents, and applications.</a> Physiol Rev. 92 (2), 897-965 (2012).</li>
<li>Coleman, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET%2FCT+imaging+reveals+a+therapeutic+response+to+oxazolidinones+in+macaques+and+humans+with+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">PET/CT imaging reveals a therapeutic response to oxazolidinones in macaques and humans with tuberculosis.</a> Sci Transl Med. 6 (265), (2014).</li>
<li>Coleman, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Changes+by+%2818%29Fluorodeoxyglucose+positron+emission+tomography+coregistered+with+computed+tomography+predict+outcome+after+Mycobacterium+tuberculosis+infection+in+cynomolgus+macaques%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Early Changes by (18)Fluorodeoxyglucose positron emission tomography coregistered with computed tomography predict outcome after Mycobacterium tuberculosis infection in cynomolgus macaques.</a> Infect Immun. 82 (6), 2400-2404 (2014).</li>
<li>Lin, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiologic+Responses+in+Cynomolgus+Macaques+for+Assessing+Tuberculosis+Chemotherapy+Regimens%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrob+Agents+Chemother%22%5BJournal%5D)">Radiologic Responses in Cynomolgus Macaques for Assessing Tuberculosis Chemotherapy Regimens.</a> Antimicrob Agents Chemother. 57 (9), 4237-4244 (2013).</li>
<li>Diedrich, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactivation+of+latent+tuberculosis+in+cynomolgus+macaques+infected+with+SIV+is+associated+with+early+peripheral+T+cell+depletion+and+not+virus+load%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Reactivation of latent tuberculosis in cynomolgus macaques infected with SIV is associated with early peripheral T cell depletion and not virus load.</a> PLoS One. 5 (3), e9611(2010).</li>
<li>Lin, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+multistage+vaccine+H56+boosts+the+effects+of+BCG+to+protect+cynomolgus+macaques+against+active+tuberculosis+and+reactivation+of+latent+Mycobacterium+tuberculosis+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">The multistage vaccine H56 boosts the effects of BCG to protect cynomolgus macaques against active tuberculosis and reactivation of latent Mycobacterium tuberculosis infection.</a> J Clin Invest. 122 (1), 303-314 (2012).</li>
<li>Lin, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD4+T+cell+depletion+exacerbates+acute+Mycobacterium+tuberculosis+while+reactivation+of+latent+infection+is+dependent+on+severity+of+tissue+depletion+in+cynomolgus+macaques%5BTitle%5D)+AND+%22AIDS+Res+Hum+Retroviruses%22%5BJournal%5D)">CD4 T cell depletion exacerbates acute Mycobacterium tuberculosis while reactivation of latent infection is dependent on severity of tissue depletion in cynomolgus macaques.</a> AIDS Res Hum Retroviruses. 28 (12), 1693-1702 (2012).</li>
<li>Mattila, J. T., Diedrich, C. R., Lin, P. L., Phuah, J., Flynn, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simian+immunodeficiency+virus-induced+changes+in+T+cell+cytokine+responses+in+cynomolgus+macaques+with+latent+Mycobacterium+tuberculosis+infection+are+associated+with+timing+of+reactivation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Simian immunodeficiency virus-induced changes in T cell cytokine responses in cynomolgus macaques with latent Mycobacterium tuberculosis infection are associated with timing of reactivation.</a> J Immunol. 186 (6), 3527-3537 (2011).</li>
<li>Scanga, C. A., Flynn, J. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aScanga%2C+CA+%22Tuberculosis%22">Tuberculosis</a>. Kaufmann, S. H. E., Rubin, E. J., Zumla, A. , Cold Spring Harbor Laboratory Press. 243-258 (2015).</li>
<li>Kita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+therapeutic+and+prophylactic+vaccine+against+Tuberculosis+using+monkey+and+transgenic+mice+models%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Vaccin%22%5BJournal%5D)">Development of therapeutic and prophylactic vaccine against Tuberculosis using monkey and transgenic mice models.</a> Hum Vaccin. , Suppl 7. 108-114 (2011).</li>
<li>Langermans, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Divergent+effect+of+bacillus+Calmette-Guerin+%28BCG%29+vaccination+on+Mycobacterium+tuberculosis+infection+in+highly+related+macaque+species%3A+implications+for+primate+models+in+tuberculosis+vaccine+research%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Divergent effect of bacillus Calmette-Guerin (BCG) vaccination on Mycobacterium tuberculosis infection in highly related macaque species: implications for primate models in tuberculosis vaccine research.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 98 (20), 11497-11502 (2001).</li>
<li>Okada, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+prophylactic+and+therapeutic+vaccine+against+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Novel prophylactic and therapeutic vaccine against tuberculosis.</a> Vaccine. 27 (25-26), 3267-3270 (2009).</li>
<li>Reed, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defined+tuberculosis+vaccine%2C+Mtb72F%2FAS02A%2C+evidence+of+protection+in+cynomolgus+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Defined tuberculosis vaccine, Mtb72F/AS02A, evidence of protection in cynomolgus monkeys.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (7), 2301-2306 (2009).</li>
<li>Capuano, S. V. 3rd, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+Mycobacterium+tuberculosis+infection+of+cynomolgus+macaques+closely+resembles+the+various+manifestations+of+human+M.+tuberculosis+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Experimental Mycobacterium tuberculosis infection of cynomolgus macaques closely resembles the various manifestations of human M. tuberculosis infection.</a> Infect Immun. 71 (10), 5831-5844 (2003).</li>
<li>Srinivas, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+recovery+coefficient+method+for+partial+volume+correction+of+PET+images%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Nucl+Med%22%5BJournal%5D)">A recovery coefficient method for partial volume correction of PET images.</a> Ann Nucl Med. 23 (4), 341-348 (2009).</li>
<li>Kumar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+modern+imaging+techniques+for+diagnosis+of+infection+in+the+era+of+18F-fluorodeoxyglucose+positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Microbiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Role of modern imaging techniques for diagnosis of infection in the era of 18F-fluorodeoxyglucose positron emission tomography.</a> Clin Microbiol Rev. 21 (1), 209-224 (2008).</li>
<li>Martin, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digitally+Barcoding+Mycobacterium+tuberculosis+Reveals+In+Vivo+Infection+Dynamics+in+the+Macaque+Model+of+Tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22MBio%22%5BJournal%5D)">Digitally Barcoding Mycobacterium tuberculosis Reveals In Vivo Infection Dynamics in the Macaque Model of Tuberculosis.</a> MBio. 8 (3), (2017).</li>
<li>Lin, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metronidazole+prevents+reactivation+of+latent+Mycobacterium+tuberculosis+infection+in+macaques%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Metronidazole prevents reactivation of latent Mycobacterium tuberculosis infection in macaques.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (35), 14188-14193 (2012).</li>
<li>Lin, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+necrosis+factor+neutralization+results+in+disseminated+disease+in+acute+and+latent+Mycobacterium+tuberculosis+infection+with+normal+granuloma+structure+in+a+cynomolgus+macaque+model%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Tumor necrosis factor neutralization results in disseminated disease in acute and latent Mycobacterium tuberculosis infection with normal granuloma structure in a cynomolgus macaque model.</a> Arthritis Rheum. 62 (2), 340-350 (2010).</li>
<li>Phuah, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+B+Cell+Depletion+on+Early+Mycobacterium+tuberculosis+Infection+in+Cynomolgus+Macaques%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Effects of B Cell Depletion on Early Mycobacterium tuberculosis Infection in Cynomolgus Macaques.</a> Infect Immun. 84 (5), 1301-1311 (2016).</li>
<li>Martinez, V., Castilla-Lievre, M. A., Guillet-Caruba, C., Grenier, G., Fior, R., Desarnaud, S., Doucet-Populaire, F., Boue, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%2818%29F-FDG+PET%2FCT+in+tuberculosis%3A+an+early+non-invasive+marker+of+therapeutic+response%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Tuberc+Lung+Dis%22%5BJournal%5D)">(18)F-FDG PET/CT in tuberculosis: an early non-invasive marker of therapeutic response.</a> Int J Tuberc Lung Dis. 16 (9), 1180-1185 (2012).</li>
<li>Malherbe, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persisting+positron+emission+tomography+lesion+activity+and+Mycobacterium+tuberculosis+mRNA+after+tuberculosis+cure%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Persisting positron emission tomography lesion activity and Mycobacterium tuberculosis mRNA after tuberculosis cure.</a> Nat Med. 22 (10), 1094-1100 (2016).</li>
<li>Chen, R. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET%2FCT+imaging+correlates+with+treatment+outcome+in+patients+with+multidrug-resistant+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">PET/CT imaging correlates with treatment outcome in patients with multidrug-resistant tuberculosis.</a> Sci Transl Med. 6 (265), (2014).</li>
</ol>

Os autores não têm nada para divulgar.

Dados adquiridos de PET/CT podem ser usados como medições de substituto para muitos aspectos da infecção por M. tuberculosis que seria não-observável sem tal tecnologia. PET/CT é muito mais sensível do que a tecnologia de raio x, que é frequentemente utilizada em estudos de macacos. PET/CT fornece informações estruturais, espaciais e funcionais. As análises descritas acima têm muitas aplicações práticas, tais como monitoramento de progressão da doença, avaliando a eficácia do tratamento da toxicodependência e pr...

Mycobacterium tuberculosis tem atormentado os humanos por milênios e provoca mortalidade mais do que qualquer outro agente infeccioso único no mundo de hoje. Em 2015, foram relatados 10,5 milhões de novos casos de tuberculose (TB) globalmente1 com a maioria dos casos provenientes da Índia, Indonésia, China, Nigéria, Paquistão e África do Sul. Estimativas coloca o número de mortes global de TB em 1,4 milhões de pessoas durante o mesmo período de tempo. Esse valor é quase 25% menor que a taxa de morte há mais de 100 anos. Embora sensível TB drogas é tratável, o regime é moroso que requer múltiplos medicamentos e conformidade é uma preocupação. O surgimento de multi, cepas resistentes (MDR) contabilizados ~ 580.000 dos novos casos de TB em 2015. A taxa de sucesso do tratamento de pacientes com cepas MDR de M. tuberculosis é apenas estimada em cerca de 50%. Ainda mais alarmante é o surgimento de extensivamente resistente (XDR) cepas de M. tuberculosis, que são resistentes a quase todas as drogas disponíveis. Assim, novas técnicas são necessárias dentro do campo de pesquisa de TB que melhoram a capacidade de diagnosticar a TB, aumentar a compreensão imunológica do processo de doença e permitir a seleção de novos tratamentos e estratégias de prevenção, incluindo o antibiótico regimes e estudos de eficácia da vacina.
M. tuberculosis é um bacilo ácido-álcool resistentes aeróbio que fisicamente se caracteriza por sua parede de pilha exterior muito complexa e cinética de crescimento lento. A infecção geralmente ocorre através da inalação de bactérias individuais contidos em aerossol gotículas que são expelidas de um indivíduo infectado, sintomático, enquanto tosse, espirro ou cantar. Dos indivíduos expostos que desenvolvem a infecção, apenas 5-10% das pessoas desenvolvem TB clínico ativo. Os restantes 90% têm um espectro variando de infecções assintomáticas que varia de infecção subclínica a nenhuma doença, que é classificada clinicamente como latente TB infecção (ILTB)2,3. Da população que tenha esta infecção assintomática, aproximadamente 10% desenvolverão ativo TB por reativação da infecção contida em sua vida. O risco de reativação dramaticamente aumenta se uma pessoa com infecção assintomática contratos HIV ou são submetidas a tratamento com uma droga imunossupressora, tais como inibidores TNF a4,5,6. Doença de TB ativa apresenta-se também como um espectro, com a maioria das pessoas com tuberculose pulmonar, que afeta os pulmões e linfonodos torácicos. No entanto, o M. tuberculosis pode infectar qualquer órgão, para que a infecção também pode apresentar em sites extrapulmonar de envolvimento.
A marca patológica da infecção por M. tuberculosis é uma estrutura esférica organizada das células do hospedeiro, chamado o granuloma. Macrófagos, células T e células B são os principais componentes da granuloma, com um número variável de neutrófilos7. O centro da granuloma é muitas vezes necrótico. Assim, granulomas funcionam como um microambiente imune para matar ou contêm bacilos, impedindo a propagação para outras partes do pulmão. No entanto, M. tuberculosis pode subverter matar o granuloma e mantidas dentro destas estruturas por décadas. Monitoramento consistente e regular para o desenvolvimento da doença de TB ativa após nova infecção ou reativação da ILTB é impraticável, cientificamente desafiador e demorado. Técnicas que estudar estes processos longitudinalmente, em humanos e modelos animais parecidos com os humanos, são extremamente úteis para a comunidade científica em promover a compreensão das complexidades muitos do M. tuberculosis infecção e doença.
PET/CT é uma técnica de imagem extremamente útil que tem sido empregada para estudar uma vasta gama de Estados de doença em seres humanos e modelos animais8. Animal de estimação é uma técnica funcional que usa compostos radioativos emissores de pósitrons como repórter. Esses radioisótopos são normalmente acrescidos de um composto metabólico, como a glicose, ou a um grupo alvo que é projetado para ligar a um receptor de interesse. Uma vez que a radiação emitida a partir de isótopos de PET é poderosa o suficiente para penetrar o tecido, concentrações muito baixas podem ser usadas que permite estudo abaixo dos níveis de saturação em compostos do receptor-alvo e em concentrações baixas o suficiente para ter nenhum impacto sobre o metabolismo processos quando usando agentes como 2-deoxy - 2-(18F) Fluoro-D-glicose (FDG). CT é uma técnica de imagem tridimensional, raio-x que usa diferentes níveis de atenuação de raios-x para identificar as características físicas dos órgãos dentro do corpo9. Quando emparelhado com PET, CT é usado como um mapa para determinar os locais específicos e estruturas que mostram a absorção de um radiotracer PET. PET/CT é uma poderosa ferramenta para a imagem latente na vivo de seres humanos e modelos animais infectados com M. tuberculosis infecção que levou a muitos insights importantes sobre patogênese, resposta ao tratamento medicamentoso, o espectro da doença, etc6 ,10,11,12. Este trabalho descreve métodos analíticos específicos do PET/CT para estudar TB em modelos de primatas não humanos no sentido longitudinal, utilizando parâmetros como tamanho de granuloma, captação FDG em lesões individuais, toda avidez FDG pulmonar e do nó de linfa e detecção de extrapulmonar doença6,10,11,12.
Este manuscrito descreve metodologias de análise em primatas não-humanos (NHPs), especificamente macacos cynomolgus, que são usados para avaliar longitudinalmente a progressão da doença e o tratamento medicamentoso após infecção com M. tuberculosis de imagem . NHPs são um modelo animal valioso porque quando inoculado com uma dose baixa de M. tuberculosis Erdman estirpe, animais mostram uma variedade de resultados de doença com ~ 50% desenvolvimento de TB ativa e os restantes animais tendo infecção assintomática (ou seja, controlar a infecção, ILTB), fornecendo o modelo mais próximo para o espectro clínico da doença visto nos seres humanos3,13,14,15,16. Reativação da ILTB em macacos é desencadeada pelos mesmos agentes que causam a reativação nos seres humanos, que são exemplos de vírus de imunodeficiência humana (HIV, usando o vírus da imunodeficiência símia (SIV) como a versão de macaca do HIV), depleção de CD4 ou tumor fator de necrose de13,de neutralização (TNF)16. Além disso, os macacos os apresentam com patologia que é extremamente semelhante ao observado em seres humanos, incluindo os granulomas organizados que se formam nos pulmões ou outros órgãos17. Assim, este modelo forneceu insights importantes sobre as interações patógeno-hospedeiro básica em infecção de M. tuberculosis , bem como conhecimentos valiosos sobre regimes de drogas e vacinas para a tuberculose14,18 , 19 , 20 , 21.
Imagens de PET/CT fornece a habilidade de seguir a aparência, distribuição e progressão de granulomas individuais. Este trabalho utilizou principalmente FDG como uma sonda, que, como um análogo da glicose, incorpora em células hospedeiras metabolicamente ativas, como macrófagos, neutrófilos e linfócitos8, todos os quais estão em granulomas. Assim, o FDG é um proxy para a inflamação do anfitrião. Os procedimentos de análise detalhados neste documento usa OsiriX, um visualizador DICOM amplamente usado disponível para compra e uso. Os métodos de análise de imagem descritos rastrear a forma, tamanho e atividade metabólica (através de captação FDG) de granulomas individuais ao longo do tempo e usa a imagem como um mapa para identificar lesões específicas sobre necropsia animal. Além disso, um método separado foi desenvolvido que quantifica o somatório de captação FDG no pulmão acima de um limite específico (SUV ≥ 2.3) e usa esse valor para avaliar as diferenças entre controle e grupos experimentais em estudos variando de vacina ensaios de modelos de co-infecção. Estes dados suportam que esta medida global de captação FDG em pulmões está correlacionada com a carga bacteriana, proporcionando informações sobre o status de doença. Análises semelhantes podem ser executadas na captação FDG dos linfonodos torácicos para estudar a progressão da doença também. O protocolo seguinte descreve o processo experimental de infecção animal através da análise de imagem.

<table><tbody><tr><td>Cetamina</td><td>Henry Schein</td><td>23061</td><td>Henry Schein</td></tr><tr><td>Telazol</td><td>Zoetis</td><td>4866</td><td>Henry Schein</td></tr><tr><td>Cetacaine</td><td>Patterson Vet Generics</td><td>07-892-6862</td><td>Patterson</td></tr><tr><td>Solução salina estéril</td><td>Hospira</td><td>07-800-9721</td><td>Patterson</td></tr><tr><td>7H11 ágar</td><td>BD</td><td>283810</td><td>BD Biosciences</td></tr><tr><td>cateter</td> <td>IVSurflash</td><td>07-806-7659</td><td>Patterson</td></tr><tr><td>18F-FDG</td><td>Zevacor</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Tubo endotraqueal</td><td>Jorgensen Labs Inc</td><td>07-887-0284</td><td>Patterson</td></tr><tr><td>Lágrimas artificiais</td><td>Patterson Vet Generics</td><td>07-888-1663</td><td>Patterson</td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Zoetis</td><td>07-806-3204</td><td>Patterson</td></tr><tr><td>Neurologica Ceretom CT</td><td>Samsung Neurologica</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Siemens Focus 220 microPET</td><td>Siemens Molecular Imaging Systems</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Inveon Research Software</td><td>Siemens Molecular Imaging Systems</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>OsiriX</td><td>Pixmeo</td><td>N/A</td><td></td></tr></tbody></table>

análise de 18fdg pet-ct imaging como uma ferramenta para estudar infecção por mycobacterium tuberculosis e tratamento em primatas não-humanos

Analysis of 18FDG PET/CT Imaging as a Tool for Studying Mycobacterium tuberculosis Infection and Treatment in Non-human Primates

Mycobacterium tuberculosis continua a ser o número um agente infeccioso no mundo hoje. Com o surgimento de cepas resistentes aos antibióticos, novos métodos clinicamente relevantes são necessários que avaliam o processo da doença e tela para tratamentos potenciais de antibiótico e vacina. A tomografia por emissão de pósitrons/Computed Tomography (PET/CT) foi estabelecida como uma valiosa ferramenta para o estudo de uma série de doenças como câncer, doença de Alzheimer e inflamação/infecção. Descritas aqui são um número de estratégias que têm sido empregadas para avaliar imagens de PET/CT em macacos cynomolgus intrabronchially infectados com baixas doses de M. tuberculosis. Através da avaliação do tamanho da lesão no CT e absorção de 18F-fluorodeoxyglucose (FDG) em lesões e nódulos linfáticos nas imagens de PET, estes métodos descritos mostram que as imagens de PET/CT podem prever desenvolvimento futuro de ativo contra doença latente e o propensão para a reativação do estado latente da infecção. Além disso, ao analisar o nível global de inflamação pulmonar, esses métodos determinam eficácia antibiótica medicamentos contra M. tuberculosis no modelo animal mais clinicamente relevante existente. Esses métodos de análise de imagem são algumas das ferramentas mais poderosas do arsenal contra esta doença, que não só eles podem avaliar uma série de características de infecção e tratamento medicamentoso, mas eles também são traduzíveis diretamente para um ambiente clínico para uso em humanos estudos.

Identificação e análise das lesões individuais
Granulomas individuais podem ser visualizadas por número, tamanho e captação FDG qualitativamente compreender o escopo geral do processo de infecção (Figura 1). Usando essas imagens, contar granulomas ao longo do tempo é uma medida quantitativa da doença se espalhar. A Figura 2 mostra contagens de granuloma individ...

Aqui, apresentamos um protocolo para descrever a análise de imagem de 18F-FDG PET-CT em primatas não-humanos que foram infectados com M. tuberculosis para estudar o processo da doença, tratamento medicamentoso e reativação da doença.

Análise de 18FDG PET-CT Imaging como uma ferramenta para estudar infecção por Mycobacterium tuberculosis e tratamento em primatas não-humanos

Mycobacterium tuberculosis remains the number one infectious agent in the world today. With the emergence of antibiotic resistant strains, new clinically ...

O objetivo geral deste procedimento de análise de imagem por PET/CT é estudar o processo da doença e os possíveis métodos de tratamento de infecções por Mycobacterium tuberculosis em primatas não humanos. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no estudo da tuberculose, incluindo a localização da infecção ao longo do tempo, a reativação da latência e o resultado de regimes de tratamento específicos. A principal vantagem dessa técnica é que a infecção e o tratamento do Mycobacterium tuberculosis podem ser rastreados em tempo real sem a necessidade de necropsias periódicas em animais.Comece exportando as imagens PET/CT co-registradas para o software apropriado e abrindo as imagens do banco de dados do software na orientação do eixo. Clique na tomografia computadorizada e altere o nível da janela, a largura da janela para TC pulmonar. O tecido pulmonar ficará escuro e as características anatômicas parecerão mais claras com as vias aéreas em preto e a vasculatura em branco.Concentrando-se em um lobo de cada vez, percorra a imagem PET/CT fundida para identificar as lesões. Pequenas lesões podem ser distinguidas dos vasos passando o cursor sobre a estrutura em questão e rolando para cima e para baixo uma ou duas fatias. Se a estrutura permanecer sob o cursor, é uma lesão.Para medir uma lesão de interesse, remova o sinal PET, de modo que apenas a TC fique visível e selecione a ferramenta de comprimento. Role até que a fatia que contém a maior parte da lesão esteja visível e desenhe uma linha longa ao longo do comprimento mais longo da lesão. Os dados incluídos nesta região de interesse representarão o comprimento em milímetros do diâmetro da lesão.No menu da tabela de pesquisa de nível de janela, largura da janela e cor, selecione definir nível de janela, largura da janela manualmente no menu suspenso nível de janela, largura da janela e insira zero para de e 20 para para, na caixa de diálogo. Selecione a ferramenta oval no menu suspenso da ferramenta de função do botão do mouse e role sobre a lesão para avaliar a parte mais dura do tecido. Em seguida, desenhe um oval ao redor da lesão para obter estatísticas descritivas para todos os níveis de limiar específicos dentro da região em voxels.Para medir a avidez total do FDG pulmonar, clique em qualquer lugar da tomografia computadorizada. No menu suspenso da região de interesse, selecione a segmentação 3D 2D da região crescida e defina o limite inferior como 1024 e o limite superior como 200. Quando os limites forem definidos, clique em qualquer lugar dentro do pulmão para destacar toda a fatia em verde.Na caixa de diálogo de parâmetros de segmentação, clique em calcular para expandir a região cultivada de uma lâmina para todo o volume pulmonar. Em seguida, clique no pequeno ícone à esquerda do nome da tomografia computadorizada e arraste o ícone para a tomografia computadorizada. Em seguida, selecione copiar regiões de interesse para sobrepor os pulmões na varredura PET.Para preencher as áreas de alta densidade do pulmão que aparecem como lacunas no PET scan. No menu suspenso da região de interesse, selecione as regiões de interesse e fechamento do pincel. Na janela pop-up, deslize a seta para três para que a parte superior da caixa leia, estruturando o raio do elemento 3 e marque aplicar a todas as regiões de interesse com o mesmo nome.Feche as lacunas restantes manualmente, conforme necessário. Quando todo o pulmão estiver visível no PET scan, exclua todos os pixels fora do pulmão, abra o menu da região de interesse e selecione, defina os valores de pixel para, clique na caixa de seleção da região externa de interesse e defina todos os pixels fora da região de interesse como zero. Para isolar a patologia quente, selecione definir valores de pixel para novamente e clique na caixa de seleção das regiões internas de interesse, clicando na caixa final, para que todos os valores entre zero e 2,3 sejam definidos como zero.Para garantir que apenas a patologia da doença seja medida, no menu da região de interesse, selecione excluir todas as regiões de interesse nesta série e aumentar a segmentação 3D 2D da região. Altere o limite inferior para 2,3 e o limite superior para 100 e percorra toda a janela do PET, clicando em qualquer patologia da doença e calcule. Depois de repetir para cada área de doença cardíaca, abra o menu de regiões de interesse e selecione salvar regiões de interesse, para salvar toda a região pulmonar de interesse.Em seguida, exporte os valores de dados brutos para uma planilha. Para determinar a captação de FDG nos gânglios linfáticos quentes, destaque a imagem de fusão PET/CT, abra a caixa suspensa da tabela de pesquisa de cores na barra de ferramentas e selecione a configuração da tabela de pesquisa UCLA. Para desenhar uma região de interesse manual ao redor do linfonodo de interesse, clique no menu suspenso no lado direito da função do botão do mouse na barra de ferramentas principal e selecione polígono fechado.Clique na borda do linfonodo para estabelecer o primeiro ponto da região de interesse, continuando a clicar e traçar o segmento de tecido até que todo o linfonodo esteja quase fechado. Em seguida, clique duas vezes para fechar a região de interesse e registrar os valores de limite específicos em uma planilha separada. Para normalizar os valores dos dados de FDG da patologia da doença, clique na imagem PET e CT co-registrada e percorra a imagem, até que a fatia contendo o ponto de encontro do brônquio principal seja alcançada.Use a ferramenta oval para desenhar regiões de interesse de aproximadamente o mesmo tamanho no músculo das costas e no músculo posterior e lateral à coluna vertebral, para obter valores de limite específicos de fundo. Rastreie o ícone à esquerda da varredura PET/CT co-registrada para a janela PET e selecione, copie as regiões de interesse. As regiões de interesse devem aparecer na janela de varredura PET.No menu principal, marque a caixa de seleção do modo e certifique-se de que a projeção de intensidade máxima esteja selecionada no menu suspenso. Em seguida, confirme se a escala deslizante da laje espessa está definida como 10 e registre os valores médios de limite específico das duas regiões musculares de interesse em uma nova planilha. Os granulomas individuais podem ser visualizados qualitativamente quanto ao número, tamanho e captação de FDG, para entender o escopo geral do processo de infecção.A contagem de granulomas a partir das imagens ao longo do tempo permite uma medida quantitativa da propagação da doença. Por exemplo, dos 10 animais neste experimento representativo, três desenvolveram doença ativa e seis desenvolveram infecção latente. A partir de seis semanas após a infecção, os animais que mais tarde desenvolveriam doença ativa, demonstraram números estatisticamente maiores de granulomas do que os animais que desenvolveriam infecção latente.Em todos os animais infectados ativamente, um aumento na captação de FDG foi medido em cada granuloma de três a seis semanas após a infecção. Enquanto os animais que passaram para a latência, exibiram uma variação na captação de FDG. Com algumas lesões aumentando, diminuindo ou demonstrando a mesma captação no mesmo período.Enquanto a captação de FDG nos linfonodos mediastinais é semelhante entre animais ativos e latentes em três semanas. Os gânglios linfáticos de animais ativos exibem uma captação significativamente maior em seis, oito e 12 semanas. De fato, animais com maior avidez total de FDG pulmonar são mais propensos a reativar, com mais de 90% dos animais demonstrando uma avidez de mais de 1 x 10 para os três pulmões FDG ou com pelo menos um local extrapulmonar visível de infecção reativando após a neutralização do vetor de necrose tumoral neste experimento.Uma vez dominada, essa técnica pode ser concluída em uma a três horas por animal, dependendo da gravidade da doença, se for realizada corretamente. Ao tentar este procedimento, é importante prestar atenção aos detalhes e sempre salvar suas regiões de interesse. Após esse procedimento, outras avaliações, como a determinação dos parâmetros imunológicos e lógicos bacterianos, podem ser realizadas para responder a perguntas adicionais sobre a relação do tamanho e SUV dos granulomas com o resultado da infecção.Após seu desenvolvimento, essa técnica abriu caminho para pesquisadores no campo da tuberculose avaliarem tratamentos e vacinas específicos em uma variedade de espécies de primatas não humanos. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como avaliar qualitativa e quantitativamente exames de PET/CT de primatas não humanos infectados por M tuberculosis. Não se esqueça de que trabalhar com Mycobacterium tuberculosis pode ser extremamente perigoso e precauções como usar o EPI de nível 3 de biossegurança apropriado e seguir os protocolos aprovados devem sempre ser tomadas durante a realização de imagens em primatas não humanos infectados.

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Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Imunologia e Infecção

Um método de imagiologia funcional do rato tecido adiposo castanho (BAT), que é descrito no frio estimulada a captação de 18F-fluorodeoxiglicose (FDG) em BAT é avaliada de forma não invasiva com um protocolo padronizado micro-PET/CT. Este método é robusto e sensível para detectar diferenças nas atividades da BAT em modelos do rato.

Imagem Funcional de gordura marrom em ratos com FDG micro-PET/CT

Este artigo descreve imagens multimodais de tecidos cancerosos com PET e TC por imagem diagnóstica usando um radiotraçador 18F-FDG. Tecido canceroso com alta atividade glicolítica absorve mais 18F-FDG.

PET/CT Scan baseado em FDG: um método de uso de radiotraçador para imagens não invasivas do metabolismo tumoral

Este vídeo demonstra uma técnica para a detecção de tuberculose extrapulmonar. Nanossondas superparamagnéticas de óxido de ferro (SPIO), conjugadas a anticorpos específicos para Mycobacterium, são injetadas em um camundongo previamente infectado com Mycobacterium bovis BCG, marcando o granuloma e proporcionando um melhor contraste de imagem para sua detecção.

Uma técnica para detectar tuberculose extrapulmonar por meio de nanossondas superparamagnéticas

O método aqui apresentado utiliza 18 F-Fluorodeoxyglucose (18 F-FDG) tomografia por emissão de pósitrons / tomografia computadorizada (PET-CT) e água gordura separada ressonância magnética (MRI), cada digitalizada seguinte 2 exposição hr para termoneutro (24 ° C ) e condições de frio (17 ° C), a fim de mapear tecido adiposo castanho (BAT) em seres humanos adultos.

Brown Human Tissue adiposo Depots automaticamente segmentada por Positron Emission Tomography / Tomografia Computadorizada e registrado ressonância magnética

Descrevemos a imagem óptica de camundongos infectados com Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) usando fluorescência de enzima repórter (REF). Esse protocolo proporciona uma detecção sensível e específica de M. tuberculosis em modelos animais pré-clínicos para investigação patogenia, terapêutica e vacina.

Mycobacterium tuberculosis em camundongos com fluorescência de enzima do repórter de imagem

Neste protocolo, descrevemos como utilizar [18F]-2-fluoro-2-deoxy-D-glucose tomografia por emissão de pósitrons e tomografia computadorizada (18F-FDG PET-CT), imagem latente para medir a resposta metabólica do tumor para a terapia-alvo MLN0128 em um  Kras/Lkb1 rato mutante modelo de câncer de pulmão e juntamente com autoradiografia ex vivo de alta resolução e histologia quantitativa de imagem.

Utilizando 18F-FDG PET-CT Imaging e histologia quantitativa para medir mudanças dinâmicas no metabolismo glicose em modelos de Mouse de câncer de pulmão

Este artigo descreve a geração de um modelo de camundongo ortotópico de mesotelioma pleural humano a implantação de células mesotelioma H2052/484 na cavidade pleural de camundongos atímicos imunocomprometidos. O monitoramento longitudinal do desenvolvimento de tumores intrapleural foi avaliado por imagens multimodais não invasivas [18F]-2-fluoro-2-deoxy-D-glucose positron e imagens de tomografia computadorizada.

Implantação e monitoramento por PET/CT de um modelo ortotópico de mesotelioma pleural humano em camundongos atímicos

Este artigo detalha a metodologia para radiomarcação de um anticorpo monoclonal anti-CD19 humano-específico e como usá-lo para quantificar células B no sistema nervoso central e tecidos periféricos de um modelo de esclerose múltipla em camundongos usando imagens PET in vivo, contagem gama ex vivo e abordagens de autorradiografia.

Imagem de células B CD19+ em um modelo experimental de encefalomielite autoimune em camundongos usando tomografia por emissão de pósitrons

Este protocolo descreve o procedimento para realizar imagens PET in vivo em camundongos usando moldes animais conformes com o corpo (BCAMs) no scanner G8 PET/CT. São fornecidos detalhes técnicos sobre a preparação do camundongo, incluindo implantação adequada do tumor, posicionamento ideal, aquisição de imagens PET/CT assistidas por BCAM e análise de dados.

Tomografia pré-clínica por emissão de pósitrons com moldes animais em conformidade com o corpo para análise automatizada de imagens baseada em nuvem em camundongos

Aqui, apresentamos um protocolo para imagem intravital de um Mycobacterium tuberculosis aprovado por BSL-2 atenuado. Cepa no pulmão murino usando uma janela pulmonar permanente. Essa abordagem permite a análise longitudinal com resolução de célula única das interações precoces hospedeiro-patógeno, incluindo localização bacilar, dinâmica vascular e captação de macrófagos dentro do mesmo microambiente pulmonar.

Imagem intravital de Mycobacterium tuberculosis auxotrófico atenuado no pulmão murino durante infecção intravascular precoce

Aprenda a analisar imagens de PET/CT com 18F-FDG em primatas não-humanos infectados com Mycobacterium tuberculosis. Este método permite acompanhar a infecção e o tratamento em tempo real, avaliando a progressão da doença e a reativação latente sem necessidade de necropsias periódicas.

Análise de 18FDG PET-CT Imaging como uma ferramenta para estudar infecção por Mycobacterium tuberculosis e tratamento em primatas não-humanos (Vídeo) | JoVE Journal

Análise de ¹⁸FDG PET-CT Imaging como uma ferramenta para estudar infecção por Mycobacterium tuberculosis e tratamento em primatas não-humanos

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