Name: Re-Arterialized transplante de fígado parcial de rato com na vivo orientado a embarcação 70% Hepatectomy (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 52 s
Description: Aprenda o transplante hepático parcial re-arterializado em ratos com hepatectomia de 70% orientada por vasos. Este protocolo apresenta reconstrução arterial e técnica de manguito modificada para anastomose eficiente.

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Esta pesquisa foi apoiada pela Fundação Nacional de ciências naturais da China (Grant no. 81501382) e Zhejiang Provincial Natural Science Foundation da China (Grant no. LQ13H100003 e LQ16H100002).

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Todos os autores têm sem interesses conflitantes para divulgar.

PLTx rato é um procedimento microcirúrgico sofisticado com um programa de treinamento que é alta no custo e tempo de duração:20. A complexidade do rato PLTx protocolo impediu pesquisadores de usando este modelo animal. Comparado com o rato em tamanho LTx, rato PLTx apresenta o micro-cirurgião não só com o desafio de um procedimento de transplante, mas também com o desafio de ressecção hepática em um animal pequeno. Portanto, um protocolo microcirúrgico visualizado descrevendo todo o processo em de...

Atualmente, há uma grande discrepância entre o número de órgãos doados hepáticas e o número de pacientes esperando por um fígado doado. A escassez de órgãos fígados é um problema global. Para expandir o pool de doadores, dividir o transplante hepático (LTx) e dador vivo LTx foram desenvolvidos para usar um fígado parcial como um enxerto1.
Para investigar o mecanismo por trás do transplante hepático parcial (PLTx), modelos animais relevantes foram estabelecidos2,3,4,5. Em rat PLTx, os lóbulos do fígado são ressecadas in vivo e ex vivo de imitar as condições do dador vivo LTx e dividir LTx, respectivamente, em humanos. Um artigo publicado no Journal of Experiments visualizado apresentou um protocolo detalhado envolvendo um rato 50% PLTx usando um ex vivo hepatectomy5. No entanto, um rato PLTx com um hepatectomy na vivo ainda não foram relatado na literatura visualizada.
Além a diferença entre hepatectomies in vivo e ex vivo , a técnica de realizar uma hepatectomy em si também desempenha um papel importante na determinação do resultado da PLTx... atualmente, em muitos estudos cirúrgicos utilizando o rato PTLx modelo, o fígado, os lobos foram ressecados depois de colocar uma simples ligadura no pedículo do lóbulo do fígado,2,3,6,7,8,9. No entanto, colocar uma ligadura simples antes de ressecção não é adequada para todos os lobos de fígado, como lobos de fígado diferentes têm diferentes formas e tamanhos. Uma simples ligadura na base do lobo mediano carrega um alto risco de causar uma obstrução da veia cava, que eventualmente pode afetar o fluxo do enxerto hepático parcial10,11. Portanto, uma técnica de hepatectomy de atualização com base no conhecimento da anatomia hepática rato é necessário no campo de rato PTLx.
O protocolo descrito neste estudo, um atualizado orientada a embarcação 70% hepatectomy foi incorporado o procedimento do rato PLTx. O portal de veias e artérias hepáticas do lobo esquerdo lateral (LLL) e lóbulo mediano (ML) foram dissecadas e divididas individualmente antes da remoção do parênquima hepático. Então, as veias hepáticas do LLL e ML foram ligadas pela perfuração suturas. Usando a ligadura individuais e múltiplas suturas penetrantes em vez de colocar uma ligadura simples, o coto remanescente do ML foi capaz de espalhar sobre a veia cava. Daí, a constrição da veia cava infrahepatic, causada por uma ligadura cirúrgica foi evitada. Além disso, a oclusão da fonte de sangue do LLL e ML por ligadura individuais antes de remoção do parênquima hepático diminuiu a taxa de sangramento no coto de fígado remanescente, minimizando assim a influência da perda de sangue sobre as experiências de11.
Para microsurgeons, é um desafio significativo para reconstruir a artéria hepática adequada (PHA) de um enxerto de fígado por causa do extremamente pequeno diâmetro deste navio. Embora a questão de se re-arterialization em LTx é verdadeiramente necessário é ainda em debate12,13,14, inúmeras técnicas microcirúrgicos para reconstruir a artéria hepática têm sido propostos14 . Aqui, apresentamos uma nova técnica para re-arterialization do enxerto hepático, que se anastomosa com a artéria hepática comum (CHA) para o PHA alargada em forma de ponta-a-lado. Usando esta técnica de fim-a-lado, duas artérias hepáticas são conectadas com uma anastomose de maior diâmetro. Quanto maior for o diâmetro da anastomose, a sutura de mão mais fácil é executar e quanto maior for a melhoria a patência de anastomose torna-se.

<table><tbody><tr><td>Microscópio cirúrgico</td><td>M&ouml; ller-Wedel, Alemanha</td><td>654359 Fonte de</td><td></td></tr><tr><td>luz</td><td>OSRAM (China) Lighting Co., Ltd</td><td>64627</td><td></td></tr><tr><td>Vaporizador de isoflurano</td><td>MIDMARK Corporation</td><td>VIP3000</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Baxter Healthcare Corporation</td><td>40032609</td><td>para anestesia por inalação</td></tr><tr><td>Solução salina normal</td><td>Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td></td><td>Solução de</td></tr><tr><td>iodopovidona</td><td>716092103 HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL</td><td></td> H33021567 <td>para desinfecção</td></tr><tr><td>Fórceps hemostático</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd</td><td>J31020</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura cirúrgica</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd</td><td>JC2116</td><td></td></tr><tr><td>Porta-agulha</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd</td><td>J32030</td><td></td></tr><tr><td>Pinça de curativo</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd</td><td>J42020</td><td></td></tr><tr><td>Pinça hemostática</td> de <td>mosquito Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd</td><td>W40340</td><td>Para ressecção hepática; Para retrair as suturas de permanência.&nbsp;</td></tr><tr><td>Micro-tesoura</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd</td><td>WA1040</td><td></td></tr><tr><td>Micro porta-agulhas</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd</td><td>WA2060</td><td></td></tr><tr><td>Pinça de microtipagem curva</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd</td><td>WA3061</td><td></td></tr><tr><td>pinça de microtipagem reta</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd</td><td>WA3060</td><td></td></tr><tr><td>Micro pinça hemostática</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>WA3020</td><td></td></tr><tr><td>Braçadeira Bulldog</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>XEC350</td><td></td></tr><tr><td>Braçadeiras de vaso</td><td>Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd</td><td>W40160</td><td></td></tr><tr><td>Micro Serrefine-curvado</td><td>&nbsp; Fine Science Tools, Inc</td><td>18055-05</td><td></td></tr><tr><td>Dacryosyrinx</td><td>Shi Zhuo instrumentos médicos Co., Ltd.</td><td>curva 5#</td><td>Use como a agulha curvada para forçar para fora as bolhas de ar no lúmen vascular</td></tr><tr><td>Cotonetes esterilizados da gaze</td><td>Saúde de Fuqing & Seringa médica integral</td><td>de 20230R</td><td></td></tr><tr><td>5mL</td><td>Instrumento médico Co. de Zhejiang Yusheng, Ltd</td><td>811932416</td><td></td></tr><tr><td>agulhas 18G</td><td>Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd</td><td>01-014</td><td>Para fixar a parede superior do abdômen</td></tr><tr><td>Intima II 22G cateter intraveoso</td><td>Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.</td><td>383207y</td><td>Para fazer stent biliar; Para infundir</td></tr> suturas de polipropileno perfusato <tr><td>7-0</td><td>Ningbo Medical Needle Co., Ltd</td><td>151026</td> Para sutura de seda <td>de anastoma SHVC</td></tr><tr><td>6-0</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd</td><td>2650182</td><td>Para placa de cultura de ligadura</td></tr><tr><td>(100 mm)</td> <td>Corning Incorporated</td><td>430165</td><td>usado na mesa traseira para armazenamento de gelo. O prato da mesa de trás foi colocado sobre ele.</td></tr><tr><td>Placa de cultura (30 mm)</td><td>Corning Incorporated</td><td>3296</td><td>Como vaso para preservação de órgãos</td></tr><tr><td>Cateter intravenoso Angiocath 12G</td><td>Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.</td><td>382277</td><td>Para fazer um</td></tr><tr><td>cateter intravenoso IHVC Angiocath 14G</td><td>Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd.</td><td>382269</td><td>Para fazer um manguito PV</td></tr><tr><td>Buprenorfina (cloridrato)</td><td>Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd</td><td>H12020275</td><td>Para analgésicos</td></tr><tr><td>Cefuroxima sódica para injeção</td><td>Esseti FarmaceuticiS.r.l</td><td>H20160013</td><td>Como um antibiótico</td></tr></tbody></table>

re-arterialized transplante de fígado parcial de rato com na vivo orientado a embarcação 70% hepatectomy

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Divisão de transplante hepático e transplante de fígado fígado doador vivo foram desenvolvidos na clínica de utilizar órgãos fígados de forma mais eficiente. Para entender melhor o mecanismo por trás desses procedimentos cirúrgicos, estabeleceu-se um modelo de transplante hepático parcial (PLTx) de rato para estudos cirúrgicos relevantes. Devido à complexidade do modelo de PLTx de rato, um protocolo com descrições detalhadas é necessário. Um artigo publicado anteriormente relatados um protocolo em que ex vivo hepatectomy foi usado para atingir 50% rat PLTx. Em contraste com este protocolo, introduzimos uma re-arterialized PLTx com um hepatectomy 70% na vivo . Um atualizado hepatectomy orientada a embarcação foi incorporado o rato PLTx para refinar o procedimento microcirúrgico. Portal de veias e artérias hepáticas do lobo lateral esquerdo e o lóbulo mediano individualmente foram dissecadas e ligadas antes da remoção do parênquima hepático, diminuindo assim a probabilidade de hemorragia no coto de fígado remanescente. Além disso, uma anastomose fim-a-lado de navio entre a artéria hepática comum e a artéria hepática adequada alargada foi introduzida para re-arterialize a artéria hepática. Usando esta técnica de anastomose final para o outro navio, o diâmetro da anastomose foi ampliado, assim, diminuindo a dificuldade de sutura de mão e mantendo uma alta taxa de patência anastomótica. Além disso, a anastomose da veia cava infrahepatic manguito foi ligeiramente modificado. Uma secção do parênquima hepática circunferencial ao redor da veia cava de um destinatário foi preservada durante a anastomose de manguito para manter a forma tridimensional do lúmen vascular. Esta secção do parênquima hepática foi removida depois de completar a anastomose. Com essa modificação, foi omitida a etapa que envolve a colocação de suturas de estadia, assim, ainda mais, encurtando o tempo de anastomose do manguito. Usando este protocolo de rato PLTx, um nível baixo de enzimas hepáticas, uma arquitetura lobular hepática intacta e uma taxa de sobrevivência de alta foram alcançados após microcirurgia.

No total, 31 casos de rato arterialized syngeneic PLTx foram concluídos usando este protocolo. Todos os destinatários sobreviveram até o final do tempo de observação. O peso corporal dos destinatários começou a se recuperar após dia pós-operatório (POD) 4. A inclinação do peso corporal foi próximo ao de um rato normal de Lewis após 6 POD (Figura 8), que indiretamente implicou a recuperação do destinatário. Histologicamente, observou-se uma ligeira proliferaçã...

Aqui, apresenta-se um protocolo envolvendo transplante hepático parcial de re-arterialized de rato. Especificamente, 70% fígado foi ressecado na vivo usando uma técnica atualizada de hepatectomy orientada a embarcação. A artéria hepática foi reconstruída em uma forma de ponta-a-lado. A técnica de punho foi modificada para encurtar o tempo de anastomose da veia cava infrahepatic.

Re-Arterialized transplante de fígado parcial de rato com na vivo orientado a embarcação 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

Um protocolo envolvendo transplante parcial de fígado com rearterialização em ratos é apresentado neste artigo. Especificamente, 70% do fígado foi ressecado in vivo utilizando a técnica atualizada de hepatectomia orientada por vasos. A artéria hepática foi reconstruída de maneira término-lateral.A técnica de anel foi modificada para encurtar o tempo de anastomose da veia cava inferior. Isoflurano misturado com zero vírgula cinco litro por minuto de oxigênio foi usado para induzir e manter a anestesia inalatória. Faça uma pequena incisão transversal no abdômen superior.Em seguida, estenda a incisão transversal até próximo à margem costal no abdômen superior. Inverta e fixe a parede do abdômen superior para o lado cranial. A seguir, inverta também o processo xifoide para o lado cranial.Corte o ligamento falciforme, o ligamento coronário e o ligamento triangular, em sequência. Libere a veia diafragmática esquerda do diafragma usando pin&ccedil;as microcir&uacute;rgicas. Em seguida, fa&ccedil;a dupla ligadura com suturas de seda seis-zero.Solte o ligamento hepatoesofágico e a artéria. Em seguida, faça uma dupla ligadura e seccione-o. Exponha o primeiro hilo hepático do fígado.Primeiro, dissecar cuidadosame

re-arterialized-rat-partial-liver-transplantation-with-an-vivo-vessel

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Nós apresentamos uma revisão fácil de estabelecer a técnica de dois manguito clássica para transplante hepático em ratos.

Transplante hepático ortotópico experimental em ratos

O transplante hepático em ratos é um modelo indispensável experimental para a pesquisa biomédica. Aqui apresentamos nossos procedimentos cirúrgicos para transplante ortotópico do fígado do rato com a reconstrução da artéria hepática utilizando um enxerto parcial de 50%.

Procedimentos cirúrgicos para um modelo de rato de Transplante de Fígado parcial ortotópico com reconstrução arterial hepática

O transplante de fígado auxiliar proporciona um suporte temporário em insuficiência hepática aguda, até que a regeneração do fígado, não. O transplante heterotópico auxiliar fígado (HALT) com Arterialização veia porta (PVA) torna a função hepática está suficientemente bem. Desenvolvemos uma técnica análoga, no rato, para examinar a influência da arterialização veia portal na morfologia e função do enxerto.

Heterotópico Rat auxiliar Liver Transplantation com fluxo regulado Portal Vein Arterialização na Insuficiência Hepática Aguda

A reconstrução da veia cava suprahepatic (SHVC) continua a ser uma etapa difícil em transplante ortotópico de fígado de rato. Neste artigo, vamos mostrar um protocolo passo a passo para a reconstrução de SHVC em ratos utilizando uma técnica de anastomose magnético romance.

Um modelo do rato de ortotópico transplante hepático, usando uma técnica de anastomose magnético romance para reconstrução de veia Cava Suprahepatic

O objetivo deste estudo é modificar o modelo de transplante de fígado ortotópico de ratos para representar melhor o transplante de fígado humano e melhorar a sobrevivência do receptor. O método apresentado restabelece o fluxo arterial hepático conectando a artéria hepática comum do fígado doador à artéria hepática adequada do fígado receptor.

Complicações reduzidas após reconexão arterial em um modelo de rato de transplante de fígado ortotópico

O protocolo auxiliar de transplante hepático heterotópico de rato descrito aqui oferece uma ferramenta prática de investigação para explorar os mecanismos de rejeição do aloenxerto hepático. Este modelo ajuda a aliviar os obstáculos cirúrgicos e o estresse animal do transplante hepático ortotópico em ratos.

Modelo de transplante de fígado total auxiliar heterotópico de rato utilizando uma hepaticouretorostomia para estudos de rejeição de aloenxerto

As ferramentas usadas para visualizar a regeneração vascular requerem métodos para contrastar as árvores vasculares. Este filme demonstrou uma técnica de injeção delicada usada para obter o contraste ideal das árvores vasculares e ilustrar os benefícios potenciais resultantes de uma análise detalhada do espécime resultante usando μCT e cortes seriados histológicos.

Visualização dos Vascular e parênquima regeneração após 70% hepatectomia parcial em ratos normais

Indução rápida hipertrofia hepática usando associando partição do fígado e ligadura da veia porta para um hepatectomy encenada (ALPPS) tem sido proposto para ressecção de tumores no fígado ressecável no limite. Este modelo pode elucidar os mecanismos envolvidos na hipertrofia rápida e permite testes de drogas que promovem ou bloqueiam a aceleração da regeneração.

Modelo do rato da partição fígado associando e ligadura da veia porta para procedimento encenado Hepatectomy (ALPPS)

Descrevemos um protocolo para a realização de hepatectomy parcial (PHx) e transplante de células através do baço em NOD. SCID (ASSENTIMENTO. CB17-Prkdcscid/J) ratos. Neste protocolo, uma incisão é feita para expor e fazer a ressecção do lobo esquerdo do fígado seguido por outra incisão para o transplante intrasplenic de células.

Intrasplenic transplante de hepatócitos após Hepatectomy parcial na NOD. Ratos SCID

O modelo animal da falha de fígado aguda desenvolvido no estudo atual apresenta uma alternativa praticável para o estudo de terapias potenciais. O modelo atual emprega o efeito combinado de ferimento hepático físico e droga-induzido e fornece uma janela de tempo apropriada para estudar o potencial de terapias novas.

Geração de um modelo de rato de insuficiência hepática aguda, combinando 70% hepatectomia parcial e paracetamol

Aprenda o transplante hepático parcial re-arterializado em ratos com hepatectomia de 70% orientada por vasos. Este protocolo apresenta reconstrução arterial e técnica de manguito modificada para anastomose eficiente.

Re-Arterialized transplante de fígado parcial de rato com na vivo orientado a embarcação 70% Hepatectomy

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