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DOI: 10.3791/56508-v
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Nós descrevemos um método para a produção de anticorpos humanos específicos para um antígeno de interesse, a partir de raras células B que circulam no sangue humano. Geração destes anticorpos naturais é rápida e eficiente, e os anticorpos obtidos podem discriminar entre antígenos altamente relacionados.
O objetivo geral deste procedimento é produzir anticorpos monoclonais totalmente humanos contra um antígeno desejado a partir de linfócitos B humanos circulando no sangue. Este protocolo permite a geração de anticorpos monoclonais que podem discriminar entre antígenos altamente relacionados. Para algumas aplicações, como imunoterapia, o direcionamento preciso de um antígeno pode ser indispensável.
As vantagens dessa técnica são que ela pode ser realizada a partir do sangue de doadores saudáveis ou imunizados e permite o isolamento até mesmo de células B raras de ligação a antígenos. Embora esse método seja descrito a partir de amostras humanas, ele também pode ser aplicado a animais que podem ser pré-imunizados. A demonstração visual deste método é crítica, pois o procedimento realmente está sob uma estratégia de bloqueio analítico múltiplo bastante complexa de linfócitos B discriminados.
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