Name: Um modelo murino de gastrectomia de manga Vertical (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-18T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 47 s
Description: Aprenda a realizar gastrectomia vertical em manga em camundongos para modelar os benefícios da cirurgia bariátrica na obesidade. Este método permite estudar mecanismos e identificar novos alvos terapêuticos.

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Esta pesquisa foi apoiada pelo NIH/ICN R21CA195002-01A1, Conselho o Presidente das mulheres de Cornell e da SUNY pós-graduação diversidade comunhão. Laboratório da Dr. Cummings também recebido financiamento durante o período do projeto de Cornell programa de treinamento de biologia comparativa de câncer e Eli Lilly e Company.

Todos os protocolos experimentais foram aprovados pelo Comitê de uso e Cornell University institucional Cuidado Animal.
1. pré-cirúrgica preparação
Nota: Os ratos do estudo são tipicamente em um C57BL induzida por dieta obeso fundo fazer estudos translationally relevantes a obesidade humana e resistência à insulina. Ratos machos e fêmeas podem ser estudados, conforme descrito nas etapas subsequentes.
<ol>
	<li>Com uma idade de 2 meses, coloque os ratos em uma dieta de gordura alta 45% ou 60% por 2 meses (ver Tabela de materiais). Nota: Os ratos são alimentados uma dieta de alta gordura para criar um fenótipo resistente à insulino e obeso. Períodos mais curtos ou mais longos de alta gordura dieta alimentar podem ser utilizados dependendo os objetivos do estudo.</li>
	<li>Continuar a alimentar os ratos ad libitum até cirurgia. Se são necessárias medições de base, depois de 7 semanas de alto teor de gordura da dieta alimentar, rápido ratos para 6 h ou durante a noite e tirar uma amostra de sangue da linha de base para a medição de metabólitos de interesse (por exemplo, glicose).</li>
	<li>Continue a permitam ratos uma semana para se recuperar após a coleta de sangue antes da cirurgia de farsa ou VSG e dieta de ratos no alto teor de gordura. Coloque os ratos em um líquido (veja a Tabela de materiais) da dieta por 4 dias antes da cirurgia. Nota: Os ratos são mantidos em uma dieta líquida antes e após a cirurgia para limpar o aparelho digestivo das partículas que podem afectar a resposta curativa.</li>
	<li>Esterilizar os itens a seguir antes da cirurgia: folha, gaze, algodão com ponta aplicadores (CTAs) e instrumentos cirúrgicos (pinça, tesoura, tesoura de íris, pinça de dumont, de funcionamento serrilhada pinça Adson-Brown, agulha de gavagem, motorista de microneedle, tesoura de mola ).</li>
</ol>
2. vertical Sleeve gastrectomia e procedimentos de Souza
<ol>
	<li>No dia da cirurgia pesar ratos para obter uma medida de peso de referência.</li>
	<li>Equipe a sala cirúrgica com uma almofada de aquecimento, banho de água aquecida e sistema de anestesia. Conjunto banho-maria a 37 ° c e usá-lo para aquecer a solução salina 0,9% para a irrigação. Limpe o campo cirúrgico com 70% de etanol e utilizar técnica asséptica para abrir ferramentas e cirurgia autoclavado pack. Nota: A almofada de aquecimento é usada para manter o animal aquecido durante a cirurgia e a recuperação da anestesia.</li>
	<li>Utilizando uma câmara de indução, anestesia o mouse com 5% de isoflurano e O2 vazão de 1 L/min. Confirme se o mouse está no plano adequado de anestesia, realizando uma pitada de dedo do pé. Manter o mouse com isoflurano 1-3% e uma taxa de fluxo de2 O de 0,6 L/min, uma vez que um plano consistente de anestesia foi alcançado.</li>
	<li>Uma vez que o mouse é anestesiado, colocar pomada (ver tabela de materiais) em seus olhos para mantê-los húmida durante a cirurgia. Neste momento também administrar um analgésico, como o meloxicam (2 mg/kg por via subcutânea). Corte o cabelo a partir do umbigo para a axila, mantendo a pele suavemente para fornecer a tensão.
	<ol>
		<li>Como pele do mouse é fina e delicada, tome cuidado para não causar lesões na pele quando cortar o cabelo. Limpe a pele com iodo-povidona e álcool.</li>
		<li>Use luvas estéreis e prepare o campo cirúrgico estéril e instrumentos. Execute o resto do procedimento utilizando uma técnica estéril. Prepare o campo cirúrgico estéril, colocando cortinas cirúrgicas estéril em ambos os lados do rato. Use folha de estanho autoclavada para criar um pano cirúrgico para o mouse.</li>
		<li>Corte um pequeno buraco na folha de estanho para permitir acesso ao abdômen do rato.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Fazer uma incisão da pele do abdômen médio (umbigo) ao nível da cartilagem xifoide usando uma tesoura de íris. Identificar o linea alba e uso íris tesoura para cortar através da parede do corpo ao longo da linea alba. Use CTAs para elevar suavemente o estômago fora do abdômen e então sem rodeios dissecar o omento maior fora da curvatura maior do estômago.</li>
	<li>Ligam as artérias gástricas curtas que se estende entre o fundo do estômago e do baço, colocando duas ligaduras usando sutura de monofilamento de 7-0. Use tesoura de mola para cortar entre as duas ligaduras. Uma vez que a artéria é transecção, totalmente exteriorize o estômago da cavidade abdominal. Coloque gaze sob o estômago e molhado com soro fisiológico para manter o tecido úmido.</li>
	<li>Procedimento de Souza
	<ol>
		<li>Para o procedimento de Souza, coloque um padrão contínuo simples solto da sutura usando sutura de monofilamento de 6-0 com uma agulha cónica. Começa com 2 mm para a direita (direito do cirurgião) do esôfago. Coloque a linha de sutura ao longo da parede gástrica ventral e em seguida, continuar ao longo da parede gástrica dorsal. Nota: Para todas as manipulações gástricas, use apenas a sutura absorvível monofilamento para diminuir o risco de infecção. Além disso, use apenas a sutura com uma agulha cónica para todas as manipulações gástricas, como o uso de uma agulha de corte aumenta o risco de sutura "puxar-através de" levando a danos no tecido gástrico e deiscência.</li>
		<li>Passe a agulha completamente através de uma parede gástrica ao colocar a sutura. Certifique-se a sutura está deitado, mas não restringindo o estômago. Delicadamente, amarrar a sutura fora de usar lances de 3-4 e pule para o passo 2.9.</li>
		<li>Para o procedimento VSG pular etapa 2.7 e prossiga com a etapa 2.8.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Procedimento VSG
	<ol>
		<li>Para o procedimento VSG, ligate proeminentes ramos da artéria gástrica e veia com sutura de monofilamento com uma agulha cónica usando 3 lança para cada nó de 7-0. Coloque as ligaduras logo abaixo (ou seja, em direção a curvatura menor do estômago) a linha pretendida de transecção. Nota: A linha pretendida de transecção começa em ~ 2 mm acima (ou seja, no sentido da curvatura maior do estômago) o entalhe cardíaco do estômago e pelo menos 2 mm abaixo do pilcatus de margo e estende-se até a extremidade proximal do lobo direito do pâncreas. Normalmente, existem 4 vasos por parede gástrica que precisam ser ligados; no entanto, pode variar entre ratos.</li>
		<li>Para evitar o derrame do conteúdo gástrico durante a gastrectomia, coloque uma linha simples contínua da sutura passando por ambas as paredes gástricas apenas abaixo da linha pretendida de transecção usando sutura de monofilamento de 6-0 com uma agulha cónica. Começa a linha de sutura para a direita do cirurgião do esôfago e abaixo a margo pilcatus e final logo acima do pâncreas.</li>
		<li>Coloque a ponta fina hemostatos acima da linha de sutura e use tesoura de mola para cortar entre a linha de sutura e hemostatos. Remova o tecido gástrico necrosante do campo cirúrgico estéril.</li></ol></li></ol>Use CTAs para limpar o sangue e digesta fora do estômago.
		<li>Reforça a aposição das paredes gástricas usando sutura de monofilamento de 6-0 com uma agulha cónica usando um simples padrão descontínuo. Nota: Um padrão simples sutura descontínua é recomendado já que este fornece o fechamento mais seguro do que o padrão de sutura contínua simples.</li>
		<li>Irrigue o remanescente gástrico com soro fisiológico durante o procedimento a fim de manter o tecido úmido e limpo. Use uma agulha de gavagem 20g anexada a uma seringa de 20 mL para realizar lavagem gástrica com soro fisiológico. Use este tamanho para garantir a pressão adequada é fornecida sem o risco de danos no tecido gástrico de pressão excessiva ou danos acidentais tecido gástrico do uso de uma agulha pontiaguda regular.</li>
		<li>Use um mínimo de 20 nós para fechar firmemente o estômago; Preste atenção ao encerramento ao longo do lado do esôfago, como deste lado é mais difícil de acessar e, portanto, muitas vezes é um site de deiscência.</li>
		<li>Certifique-se de que não existem fugas pressionando suavemente sobre o estômago com CTAs. Se vazamentos são identificados, coloque knots descontínuos simples adicionais sobre as áreas de vazamento e em seguida vazar o teste novamente. Teste de vazamento até que nenhum vazamento é detectado.</li>
		<li>Fazer uma lavagem completa final do estômago usando pelo menos 60 mL de solução salina para garantir que não há partículas infecciosas tem sido deixada para trás.</li>
	
	
	<li>Coloque o estômago volta na cavidade abdominal sob o fígado usando um CTA. Coloque CTAs ao longo do aspecto dorsal da cavidade abdominal para absorver todos os fluidos em excesso. Usando uma agulha 18G, injete solução de Ringer lactato (RL) com ou sem antibióticos (0,5 mL LRS + /-20 mg/kg de enrofloxacina) diretamente na cavidade abdominal, pouco antes do encerramento. Nota: Isto substitui experientes durante a cirurgia de perda de fluido e fornece um método para a aplicação direta de antibióticos para o sítio cirúrgico ajudar com a recuperação.</li>
	<li>Feche a camada muscular abdominal usando sutura de monofilamento de 6-0 com uma agulha cónica em um simples padrão descontínuo. Em seguida, feche a camada de pele com sutura absorvível do monofilamento de 6-0 em um padrão contínuo simples.</li>
	<li>Coloque o adesivo de tecido sobre a pele e dobre a pele sobre a linha de sutura para enterrar a sutura para que o mouse não pode interromper o fechamento da ferida no período pós-operatório.</li>
	<li>Desligue o isoflurano e deixe o mouse recuperar na rampa de aquecimento para 10-15 minbefore devolvê-lo à sua gaiola em casa. Não deixe o animal autônoma até que recuperou a consciência e é capaz de se mover.</li>
	<li>Manter os animais alojados individualmente até totalmente recuperado de uma cirurgia. Nota: Se medições de ingestão de alimentos precisos são obtidos ao longo do estudo, os ratos devem continuar a ser alojados individualmente ao longo do estudo. Há um risco de obstrução de corpo estranho de roupa de cama de gaiola em casa a comer. Os animais devem ser alojados em gaiolas sem fundamento, exceto o material para fornecer enriquecimento de nidificação (ver Tabela de materiais).</li>

3. pós-operatório Mouse cuidados e medidas
<ol>
	<li>Retorne o mouse para sua gaiola em casa e coloque a gaiola em uma almofada de aquecimento. Manter os ratos em uma dieta líquida pelo menos 7 dias após a cirurgia. Administrar um analgésico, como o meloxicam (2 mg/kg por via subcutânea), por 2 dias após a cirurgia. Nota: Um antibiótico, como enrofloxacina (20 mg/kg), pode ser dada por até 7 dias após a cirurgia. Antibióticos são dadas para minimizar o risco de infecção pelo procedimento cirúrgico e podem ou podem não ser necessários, dependendo do nível de esterilidade, mantida durante todo o procedimento. No entanto, se os antibióticos são usados, eles devem ser administrados a ratos todas no mesmo estudo para manter a consistência.</li>
	<li>Durante o período pós-operatório avalie o peso corporal, ingestão de alimentos, defecação, nível de atividade e disposição pelo menos diariamente para garantir cura adequada e recuperação. Conduta de acompanhamento pós-operatório durante 14 dias após a cirurgia. Nota: Falha cirúrgica é normalmente vista ou imediatamente após a cirurgia, ou no prazo de três dias pós-operatório. Animais que não estão comendo ou bebendo no segundo dia após a cirurgia devem ser acompanhados por complicações cirúrgicas.</li>
	<li>Após a conclusão bem-sucedida do período pós-operatório, medir a ingestão de comida e peso de corpo regularmente ao longo do estudo para garantir a manutenção do fenótipo adequado.</li>
	<li>Executar um teste de tolerância de glicose oral (OGTT) para avaliar a tolerância à glicose, a secreção de insulina glicose-estimulada e intestino a secreção de hormônio.
	<ol>
		<li>Executar o OGTT em ratos após jejum por 6 h e, em seguida, os ratos gavage com solução de glicose 50% com uma dose de 1g/kg.</li>
		<li>Colete amostras de sangue de cauda em 0, 2,5, 5, 15, 30, 60 e 120 minutos após a intubação. Medir a glicose no sangue com um glicosímetro para estes pontos de tempo. Colete amostras de soro em cada ponto de tempo para a medição de vários hormônios, como insulina e GLP-1.</li>
		<li>Camundongos rápidos para 6 h antes da eutanásia. Tome uma medida de amostra e glicose de sangue final. Compare a medição final de glicose para a medição de referência. Eutanásia em ratos com uma injeção intraperitoneal de pentobarbital em uma dose de 200 mg/kg.</li>
		<li>Use a linha de base e as amostras de soro final para medir analitos adicionais e comparar valores cirúrgicos pré e pós-operatório.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Buchwald, H., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/15479938">Bariatric surgery: a systematic review and meta-analysis.</a> JAMA. 292 (14), 1724-1737 (2004).</li>
<li>Wadden, T. A., Butryn, M. L., Byrne, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+lifestyle+modification+for+long-term+weight+control%5BTitle%5D)+AND+%22Obes+Res%22%5BJournal%5D)">Efficacy of lifestyle modification for long-term weight control.</a> Obes Res. 12, Suppl . 151s-162s (2004).</li>
<li>Yanovski, S. Z., Yanovski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMra012586">Obesity.</a> N Engl J Med. 346 (8), 591-602 (2002).</li>
<li>Abbatini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+effects+of+laparoscopic+sleeve+gastrectomy%2C+gastric+bypass%2C+and+adjustable+gastric+banding+on+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Endosc%22%5BJournal%5D)">Long-term effects of laparoscopic sleeve gastrectomy, gastric bypass, and adjustable gastric banding on type 2 diabetes.</a> Surg Endosc. 24 (5), 1005-1010 (2010).</li>
<li>Sjostrom, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+bariatric+surgery+on+mortality+in+Swedish+obese+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Effects of bariatric surgery on mortality in Swedish obese subjects.</a> N Engl J Med. 357 (8), 741-752 (2007).</li>
<li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+incidence+and+mortality+after+gastric+bypass+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Obesity+%28Silver+Spring%29%22%5BJournal%5D)">Cancer incidence and mortality after gastric bypass surgery.</a> Obesity (Silver Spring). 17 (4), 796-802 (2009).</li>
<li>Vest, A. R., Heneghan, H. M., Schauer, P. R., Young, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+management+of+obesity+and+the+relationship+to+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Surgical management of obesity and the relationship to cardiovascular disease.</a> Circulation. 127 (8), 945-959 (2013).</li>
<li>Ahmed, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+its+early+effect+on+blood+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22Obes+Surg%22%5BJournal%5D)">Laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and its early effect on blood pressure.</a> Obes Surg. 19 (7), 845-849 (2009).</li>
<li>Pories, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Who+would+have+thought+it%3F+An+operation+proves+to+be+the+most+effective+therapy+for+adult-onset+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Who would have thought it? An operation proves to be the most effective therapy for adult-onset diabetes mellitus.</a> Ann Surg. 222 (3), 339-350 (1995).</li>
<li>Garibay, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((beta-Cell+Glucagon-Like+Peptide-1+Receptor+Contributes+to+Improved+Glucose+Tolerance+After+Vertical+Sleeve+Gastrectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">beta-Cell Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Contributes to Improved Glucose Tolerance After Vertical Sleeve Gastrectomy.</a> Endocrinology. 157 (9), 3405-3409 (2016).</li>
<li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. 66 (2), 226-234 (2017).</li>
<li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vertical+sleeve+gastrectomy+reduces+blood+pressure+and+hypothalamic+endoplasmic+reticulum+stress+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Model+Mech%22%5BJournal%5D)">Vertical sleeve gastrectomy reduces blood pressure and hypothalamic endoplasmic reticulum stress in mice.</a> Dis Model Mech. 10 (3), 235-243 (2017).</li>
<li>Esteban Varela, J., Nguyen, N. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laparoscopic+sleeve+gastrectomy+leads+the+U.S.+utilization+of+bariatric+surgery+at+academic+medical+centers%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Obes+Relat+Dis%22%5BJournal%5D)">Laparoscopic sleeve gastrectomy leads the U.S. utilization of bariatric surgery at academic medical centers.</a> Surg Obes Relat Dis. 11 (5), 987-990 (2015).</li>
<li>Laferrere, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+weight+loss+by+gastric+bypass+surgery+versus+hypocaloric+diet+on+glucose+and+incretin+levels+in+patients+with+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Effect of weight loss by gastric bypass surgery versus hypocaloric diet on glucose and incretin levels in patients with type 2 diabetes.</a> J Clin Endocrinol Metab. 93 (7), 2479-2485 (2008).</li>
<li>Adams, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Health+benefits+of+gastric+bypass+surgery+after+6+years%5BTitle%5D)+AND+%22Jama%22%5BJournal%5D)">Health benefits of gastric bypass surgery after 6 years.</a> Jama. 308 (11), 1122-1131 (2012).</li>
<li>McGavigan, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TGR5+contributes+to+glucoregulatory+improvements+after+vertical+sleeve+gastrectomy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">TGR5 contributes to glucoregulatory improvements after vertical sleeve gastrectomy in mice.</a> Gut. , (2015).</li>
<li>Peterli, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+in+glucose+metabolism+after+bariatric+surgery%3A+comparison+of+laparoscopic+Roux-en-Y+gastric+bypass+and+laparoscopic+sleeve+gastrectomy%3A+a+prospective+randomized+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Improvement in glucose metabolism after bariatric surgery: comparison of laparoscopic Roux-en-Y gastric bypass and laparoscopic sleeve gastrectomy: a prospective randomized trial.</a> Ann Surg. 250 (2), 234-241 (2009).</li>
<li>Ryan, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FXR+is+a+molecular+target+for+the+effects+of+vertical+sleeve+gastrectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">FXR is a molecular target for the effects of vertical sleeve gastrectomy.</a> Nature. 509 (7499), 183-188 (2014).</li>
<li>Wilson-Perez, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vertical+sleeve+gastrectomy+is+effective+in+two+genetic+mouse+models+of+glucagon-like+Peptide+1+receptor+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Vertical sleeve gastrectomy is effective in two genetic mouse models of glucagon-like Peptide 1 receptor deficiency.</a> Diabetes. 62 (7), 2380-2385 (2013).</li>
<li>Pressler, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vertical+sleeve+gastrectomy+restores+glucose+homeostasis+in+apolipoprotein+A-IV+KO+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Vertical sleeve gastrectomy restores glucose homeostasis in apolipoprotein A-IV KO mice.</a> Diabetes. 64 (2), 498-507 (2015).</li>
</ol>

Os autores declaram não há conflitos de interesses, exceto Dr. Cummings recebeu financiamento da Eli Lilly e Company.

Cirurgia bariátrica é o tratamento mais eficaz a longo prazo para a obesidade e resulta em outros benefícios de saúde, tais como taxas elevadas de tipo 2 diabetes e hipertensão remissão1,9,15. Modelos de murino de cirurgia bariátrica fornecem uma poderosa ferramenta para a identificar os mecanismos pelos quais cirurgia bariátrica provoca melhorias rápidas e pronunciadas em comorbidades da obesidade. Além disso, modelos murino de...

Como a epidemia de obesidade continua a crescer em todo o mundo cirurgia bariátrica ganhou popularidade como é o tratamento mais eficaz a longo prazo para obesidade1. Infelizmente, perda de peso dieta e exercício é difícil de alcançar e relativamente ineficaz sobre o longo prazo2,3. Cirurgia bariátrica, como gastrectomia de manga vertical (VSG), é definida como a manipulação do trato gastrintestinal com a finalidade de1,de perda de peso4. Embora a perda de peso é um resultado proeminente da cirurgia bariátrica, cirurgia bariátrica oferece outros benefícios de saúde como melhorar comorbidades da obesidade e estender a vida útil de5. Por exemplo, a cirurgia bariátrica resulta em altas taxas de remissão do diabetes tipo 2 e hipertensão e redução do risco de vida do desenvolvimento de certos tipos de câncer,1,6,7. Digno de nota, o efeito da cirurgia bariátrica causando remissão da diabetes tipo 2 e hipertensão é frequentemente observado logo após a cirurgia e antes da perda de peso8,9. Isso realça o conceito de que existem mecanismos independentes do peso corporal, contribuindo para os benefícios de saúde observados após a cirurgia. Modelos animais de cirurgia bariátrica têm sido desenvolvidos e são utilizados para estudar os mecanismos pelos quais estes benefícios de saúde ocorrem de11,10,12.
Podemos ter validado um modelo do rato da VSG, que temos aplicado aos vários modelos de rato geneticamente modificado para estudar os mecanismos pelos quais a cirurgia bariátrica melhora comorbidades da obesidade como diabetes tipo 2, hipertensão e câncer colorretal10 , 11 , 12. modelos de roedores permitem controle mais experimental e a capacidade para executar a manipulação genética ou farmacêutica para definir o papel de genes específicos ou sinalização de percursos turísticos. Estamos focando principalmente VSG porque VSG é o procedimento mais comumente realizado bariátrico na clínica no Estados Unidos13. Além disso, o VSG é um modelo cirúrgico simples, com poucas modificações anatômicas em comparação com outros procedimentos como Roux-en-Y gastric bypass ou biliopancreatic desvio.
Nosso modelo de rato da VSG recapitula os seguintes efeitos da cirurgia bariátrica, observados em humanos: perda de peso, ingestão de alimentos reduzida, regulamento de glicose melhorou, melhorou a função ilhéu, aumento da secreção pós-prandial glucagon-como peptide-1 (GLP-1), redução da pressão arterial e aumento circulante ácidos biliares concentrações10,11,12,13,14,15. Portanto, este é um modelo ideal para estudar os corpo peso dependentes e independentes mecanismos pelo qual VSG melhora ou resolve comorbidades da obesidade. Além disso, é um modelo confiável que pode ser combinado com outros procedimentos cirúrgicos, permitindo a investigação do impacto da VSG sob várias condições de doença com maior visão mecanicista12.

<table><tbody><tr><td>Dieta rica em gordura com 45%</td><td>Dietas de pesquisa</td><td>D12451</td><td></td></tr><tr><td>Dieta rica em gordura 60%</td><td>Dietas de pesquisa</td><td>D12492</td><td></td></tr><tr><td>Boost</td><td>Nestlé</td><td>160-67538</td><td>sabor rico de chocolate</td></tr><tr><td>6-0 Sutura</td><td>Ethicon</td><td>Z432</td><td>monofilamento absorvível/cônico</td></tr><tr><td>7-0 Sutura</td><td>Covidien</td><td>8866127-01</td><td>monofilamento absorvível/cônico</td></tr><tr><td>Cotonetes</td><td>de algodão Fisherbrand</td><td>23-400-118</td><td>pequenos</td></tr><tr><td>cotonetes</td><td>Fisherbrand</td><td>233-400-101</td><td>gaze grande</td></tr><tr><td></td><td>Vários</td><td></td><td>4x4 4 camadas e 2x2 4 camadas</td></tr><tr><td>Folha</td><td></td><td></td><td></td></tr> Várias <tr><td>cortinas cirúrgicas</td><td>Vários</td><td></td><td></td></tr><tr><td>0,9% solução salina</td><td>Vários</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LRS</td><td>Hospira</td><td>170RX</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Vários</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Álcool</td><td>Várias</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pomada para os Olhos</td><td>Paralube&reg; Pomada Veterinária</td><td>17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Adesivo de Tecido</td><td>Vetbond</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam (Metacam)</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>141-213</td><td>5 mg/ml</td></tr><tr><td>Enrofloxacina</td><td>Baytril</td><td>08713254-186599</td><td>22,7 mg/ml</td></tr><tr><td>Hemostáticos de ponta fina</td><td>Ferramentas de Ciência Fina</td><td>13021-12</td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum Tesoura</td> Ferramentas <td>de Ciência Fina</td><td>14018-18</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura de íris</td><td>Ferramentas de Belas Ciências</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>Dumont Fórceps</td><td>Ferramentas de Belas Ciências</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Pinça Serrilhada</td> Ferramentas <td>de Belas Ciências</td><td>11020-12</td><td></td></tr><tr><td>Agulha de gavagem</td><td>Ferramentas de Belas Ciências</td><td>18060-20</td><td></td></tr><tr><td>Driver de microagulha</td><td>Ferramentas de Belas Ciências</td><td>12075-14</td><td></td></tr><tr><td>A mola Scissor</td> a seringa <td>da insulina das ferramentas</td><td>15396-00</td><td></td></tr> da <tr><td>ciência</td><td>fina Vária</td><td></td><td></td></tr><tr><td>seringa 1mL</td><td>Várias</td><td></td><td></td></tr><tr><td>seringas 20mL</td><td>Vários</td><td></td><td></td></tr><tr><td>glicosímetro (um toque ultra mini)</td> <td>Lifescan</td><td>70021208</td><td></td></tr><tr><td>Insulina multiplex e o jogo GLP-1 Descoberta</td><td>K15171C-1</td><td></td> <td>da escala Meso</td></tr><tr><td>GraphPad Prism 6.00</td><td>Software</td><td></td><td></td>GraphPad</tr><tr><td>Nestlets</td><td>Ancare</td><td>NES3600</td><td></td></tr></tbody></table>

um modelo murino de gastrectomia de manga vertical

A Murine Model of Vertical Sleeve Gastrectomy

Cirurgia bariátrica, como gastrectomia de manga vertical (VSG), é uma cirurgia do tracto gastrointestinal é executada com a finalidade de perda de peso. Cirurgia bariátrica é atualmente o tratamento mais eficaz a longo prazo para a obesidade. Além de perda de peso, cirurgia bariátrica produz benefícios adicionais de saúde como remissão do diabetes tipo 2, remissão de hipertensão e diminuiu o risco de desenvolver certos tipos de câncer. Os mecanismos, além da perda de peso, para estes benefícios permanecem incompletamente definidos. Portanto, os modelos animais de cirurgia bariátrica estão sendo desenvolvidos e validados para identificar os mecanismos, levando a estes benefícios, com o objetivo de melhorar a compreensão da fisiologia gastrointestinal e identificação de novos alvos terapêuticos. VSG, tornou-se o procedimento mais comumente realizado bariátrico na clínica nos Estados Unidos porque é altamente eficaz em produzir perda de peso e melhoria metabólica e é simples de realizar do que outros procedimentos bariátricos. Portanto, temos desenvolvido e validado um modelo murino de VSG. Este modelo murino de VSG recapitula a muitos dos efeitos da VSG nos seres humanos, incluindo o Regulamento melhorado de glicose e pressão arterial. O método baseia-se no isolamento do estômago, ligadura dos vasos gástricos e remoção de 70% do estômago por cruza ao longo da curvatura maior do estômago. Nós bem sucedida deste protocolo cirúrgico para várias linhas de rato geneticamente modificado para definir os contribuintes mecanicistas para os benefícios de VSG. Além disso, este modelo murino de VSG foi combinado com outras técnicas cirúrgicas, para alcançar a visão mecanicista mais profunda. Portanto, este é um modelo simples e versátil para estudar fisiologia gastrointestinal e os benefícios de saúde de cirurgia bariátrica.

A farsa e VSG procedimentos são descritos na Figura 1. A figura 1A mostra onde a linha de sutura é colocada ao longo das paredes gástricas durante o procedimento de Souza. Nesta mesma área é onde o estômago é cortado durante a cirurgia VSG. A figura 1B mostra o remanescente tubular de estômago esquerda após realização de VSG.
Estatí...

A seguir descreve o desempenho de gastrectomia de manga vertical em camundongos. Este é um tipo de cirurgia de perda de peso que envolve a remoção de aproximadamente 70% do estômago.

Um modelo murino de gastrectomia de manga Vertical

Bariatric surgery, such as vertical sleeve gastrectomy (VSG), is a surgery of the gastrointestinal tract that is performed for the purpose of weight loss. ...

O objetivo geral deste procedimento é modelar os benefícios para a saúde da gastrectomia vertical vertical em camundongos. Este método pode ajudar a responder a questões-chave na pesquisa sobre obesidade sobre os mecanismos pelos quais a cirurgia bariátrica melhora a obesidade e as comorbidades da obesidade. A vantagem dessa técnica é que ela fornece um modelo para o estudo desses mecanismos, o que facilitará a identificação de novos alvos para o tratamento da obesidade e suas comorbidades.Antes de iniciar o procedimento, aplique pomada veterinária nos olhos de um camundongo anestesiado e coloque o camundongo em uma almofada de aquecimento. Remova o cabelo do umbigo até a axila segurando suavemente a pele ensinada para evitar lesões cutâneas e use aplicadores de ponta de algodão para desinfetar sequencialmente a pele exposta com iodopovidona e etanol. Usando luvas estéreis e usando técnica estéril, coloque campos cirúrgicos estéreis em ambos os lados do animal.Faça um pequeno orifício na folha para permitir o acesso ao abdômen do camundongo e use um pedaço de papel alumínio autoclavado como campo cirúrgico. Faça uma incisão na pele do meio do abdômen até a cartilagem xifóide. Sob um microscópio de dissecação, use uma tesoura de íris para cortar a parede do corpo ao longo da linha alba.E use novos aplicadores de ponta de algodão para elevar suavemente o estômago para fora do abdômen. Disseque sem rodeios o omento maior da curvatura maior do estômago. Em seguida, use suturas absorvíveis de monofilamento 7-0 para colocar duas ligaduras ao redor da artéria gástrica curta que corre entre o fundo do estômago e o baço.Quando ambas as ligaduras tiverem sido colocadas, use uma tesoura de mola para cortar entre as duas suturas e exteriorizar totalmente o estômago da cavidade abdominal. Coloque gaze sob o estômago e hidrate o órgão com soro fisiológico. Para um procedimento simulado, use uma sutura absorvível de monofilamento 6-0 com uma agulha cônica para colocar um padrão contínuo simples e solto começando dois milímetros à direita do esôfago ao longo da parede gástrica ventral e continuando ao longo da parede gástrica dorsal.Certifique-se de que a sutura esteja plana sem restringir o estômago e use três a quatro arremessos para amarrar suavemente a sutura. Para um procedimento de gastrectomia vertical vertical, use uma sutura absorvível de monofilamento 7-0 com uma agulha cônica para ligar os ramos proeminentes da artéria e veia gástrica logo abaixo da linha de transecção pretendida. Coloque uma linha contínua simples de sutura absorvível de monofilamento 6-0 através de ambas as paredes gástricas logo abaixo da linha de transecção pretendida para evitar derramamento do conteúdo gástrico.Coloque hemostáticos de ponta fina acima da linha de sutura e use uma tesoura de mola para cortar entre a linha de sutura e os hemostáticos. Remova o tecido gástrico seccionado do campo cirúrgico estéril e use aplicadores de ponta de algodão fresco para limpar o sangue e a digestão do estômago. Use uma sutura absorvível monofilamentar 6-0 com uma agulha cônica para reforçar a aposição das paredes gástricas em um padrão descontínuo simples.Usando uma agulha de gavagem de calibre 20 conectada a uma seringa de 20 mililitros, faça a lavagem gástrica com solução salina fresca e feche bem o estômago com um mínimo de 20 nós. Em seguida, pressione suavemente o estômago com um aplicador de algodão para testar se há vazamentos. Se nenhum vazamento for detectado, lave o estômago com pelo menos mais 60 mililitros de solução salina fresca para remover quaisquer partículas infecciosas.Após qualquer procedimento, use um aplicador de ponta de algodão para retornar o estômago sob o fígado dentro da cavidade abdominal e coloque um aplicador ao longo da face dorsal da cavidade abdominal para absorver qualquer excesso de líquido. Use uma agulha romba de calibre 18 para injetar solução de Ringer com lactato com ou sem antibióticos diretamente na cavidade abdominal e use suturas absorvíveis de monofilamento 6-0 para fechar a camada muscular abdominal em um padrão descontínuo simples e a camada de pele em um padrão contínuo simples. Em seguida, coloque o adesivo de tecido na pele e dobre a pele sobre a linha de sutura para proteger a sutura da ruptura do animal.Camundongos alimentados com dieta rica em gordura operados por gastrectomia vertical apresentam uma ingestão de energia e peso corporal reduzidos em comparação com camundongos alimentados ad libitum e operados de forma simulada. A gastrectomia vertical melhora a tolerância à glicose, aumenta a secreção de insulina estimulada pela glicose e aumenta a secreção pós-prandial do peptídeo um semelhante ao glucagon em comparação com camundongos de controle operados de forma simulada e alimentados ad libitum, consistentes com os resultados observados em humanos e outros modelos de roedores de cirurgia bariátrica. Uma vez dominado, este procedimento deve ser realizado em 90 minutos.Ao aprender este procedimento, é importante lembrar de ser gentil ao manipular o trato gastrointestinal. O trato gastrointestinal é um órgão muito sensível em camundongos e a manipulação acidental do intestino delgado pode levar à estase gastrointestinal. Depois de aprender com sucesso esse procedimento, os pesquisadores podem aplicar manipulações genéticas ou farmacêuticas a vários modelos de doenças para investigar os mecanismos pelos quais a cirurgia bariátrica melhora a saúde.

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Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Neste vídeo, um procedimento de gastrectomia vertical vertical é realizado em um modelo experimental de camundongo. Este procedimento ajuda a remover uma parte significativa do estômago ao longo de sua maior curvatura.

Gastrectomia vertical murina: um procedimento cirúrgico para reduzir o tamanho do estômago em modelos experimentais de camundongos

Este vídeo descreve um procedimento de cirurgia bariátrica-Y-de-Roux. Isso envolve o corte do jejuno - a porção média do intestino - para gerar dois membros intestinais. A alça biliar está ligada à alça intestinal existente e a alça alimentar está ligada ao estômago, criando um bypass gástrico. O bypass gástrico criado aqui ajuda a diminuir a absorção de nutrientes e reduz eficientemente o peso corporal.

Procedimento de bypass gástrico em Y-de-Roux: um procedimento cirúrgico bariátrico para ressecção gástrica em modelo murino

A cirurgia bariátrica é a maneira mais eficiente de reduzir o peso corporal e as complicações metabólicas mortais (diabetes, obesidade e dislipidemia) frequentemente associadas à obesidade mórbida. Modelos de camundongos de cirurgia bariátrica representam um recurso único para decifrar os mecanismos moleculares por trás dos efeitos benéficos dessas cirurgias sobre diabetes, hipertensão e dislipidemia.

Técnicas de gastrectomia vertical e modificado Roux-en-Y bypass gástrico em ratos

A prevalência de diabetes e obesidade está aumentando continuamente em todo o mundo. Os mecanismos entre diabetes, obesidade e sua mortalidade associada e co-morbidades precisam ser mais aprofundados. Aqui, apresentamos um protocolo para gastrectomia de manga (SG) em animais como um modelo pré-clínico descomplicado da cirurgia bariátrica.

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