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DOI: 10.3791/56627-v
Wenhui Lyu1, Jennifer Selinski1, Lu Li1, David A. Day2, Monika W. Murcha3, James Whelan1, Yan Wang1
1ARC Centre of Excellence in Plant Energy Biology, Department of Animal, Plant and Soil Science, School of Life Science,La Trobe University, 2School of Biological Sciences,Flinders University, 3ARC Centre of Excellence in Plant Energy Biology,University of Western Australia
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article discusses the isolation of intact and pure plant mitochondria to study various aspects of plant energy biology. The method allows researchers to obtain functional mitochondria from small quantities of plant tissue, facilitating research on respiration, composition, and metabolism.
Como as mitocôndrias são apenas uma pequena percentagem da célula vegetal, eles precisam ser purificado para uma gama de estudos. Mitocôndrias podem ser isoladas em uma variedade de órgãos da planta por homogeneização, seguida de centrifugação gradiente diferencial e densidade para obter uma fração mitocondrial altamente purificada.
O objetivo geral de isolar mitocôndrias de plantas intactas e puras é estudar a respiração, a composição mitocondrial, a biogênese e o metabolismo. Este método pode ajudar a responder a questões-chave na biologia energética das plantas, como a importância das mitocôndrias e da tolerância ao estresse, sob condições ambientais variáveis. A principal vantagem dessa técnica é que quantidades suficientes de mitocôndrias puras, intactas e funcionais podem ser isoladas de quantidades relativamente pequenas de tecido vegetal.
Demonstrando o procedimento estarão Wenhui Lyu e Jennifer Selinski, do meu laboratório. No dia do isolamento mitocondrial, lave o derramador de gradiente e a tubulação peristáltica de PVC com água deionizada para preparar os gradientes. Incline para posicionar dois tubos de centrífuga de 50 mL no gelo, de modo que a saída do tubo peristáltico toque a parede dos tubos.
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