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DOI: 10.3791/56693-v
Ju-Chun Chang1, Se Jin Lee2, Jae Su Kim2, Chung-Hsiung Wang3, Yu-Shin Nai1
1Department of Biotechnology and Animal Science,National Ilan University, 2Department of Agricultural Biology, College of Agriculture Life Sciences,Chonbuk National University, 3Department of Entomology,National Taiwan University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Este protocolo descreve um calor induzida por choque proteína expressão (sistema pDHsp/V5-His/sf9 célula), que pode ser usado para expressar proteínas estranhas ou avaliando a atividade anti-apoptotic de potenciais proteínas estranhas e seus truncado amino ácidos em células de inseto.
O objetivo geral deste sistema de expressão de proteínas induzido por choque térmico é avaliar a atividade antiapoptótica de proteínas em duas proteínas potencialmente antagônicas funcionalmente em células de insetos. Este método pode ajudar a responder a questões-chave sobre as funções e atividades de proteínas candidatas em biotecnologia e proteômica, como suas atividades antiapoptóticas e interações proteicas. A principal vantagem dessa técnica é que o tempo de expressão gênica é controlado pela indução de choque térmico.
Portanto, esse método pode fornecer informações sobre o estado funcional da proteína. Também pode ser aplicado a outros sistemas, como a expressão de proteínas em mamíferos. As células de insetos Spodoptera frugiperda, ou Sf9, usadas neste protocolo são cultivadas em meio de cultura de células em frascos de cultura de células de 25 centímetros quadrados a 28 graus Celsius.
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