Estenose da veia Cava Inferior: um modelo murino de trombose venosa profunda

O objetivo geral deste procedimento cirúrgico é criar uma estenose da veia cava inferior para mimetizar a distorção do fluxo sanguíneo para o início da trombose venosa profunda. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da trombose venosa sobre os mecanismos de iniciação da trombose venosa profunda. A principal vantagem dessa técnica é que ela simula distúrbios do fluxo sanguíneo, um mecanismo chave para o início da trombose nas veias.

A demonstração visual desse método é fundamental, pois separar a veia cava inferior da aorta e fazer o orifício entre esses tecidos é difícil de explicar verbalmente. Comece raspando o abdômen de um camundongo anestesiado de 19 a 25 gramas de oito a 12 semanas e coloque o camundongo em decúbito dorsal em uma almofada de aquecimento. Use um cotonete estéril para desinfetar a pele exposta três vezes com solução antibacteriana.

Confirme o nível apropriado de sedação por falta de resposta ao beliscão do dedo do pé e cubra o mouse com uma cortina estéril com um orifício sobre o local da cirurgia. Sob um microscópio de dissecação, faça uma incisão ao longo da linha média abdominal, começando 1,5 centímetros abaixo do esterno e use cotonetes para exteriorizar os intestinos para o lado esquerdo do animal. Cubra o tecido intestinal com gaze estéril embebida em solução salina a 37 graus Celsius.

Coloque afastadores de tecido para expandir a incisão e localizar a veia cava inferior, ou VCI, e seus ramos laterais caudais à veia renal esquerda. Usando uma pinça, puxe o tecido adiposo ao redor dos ramos laterais e, em seguida, use uma segunda pinça para fazer um túnel sob o galho. E ligue todos os ramos laterais o mais próximo possível da VCI com suturas de prolene inerte 7-0.

Segurando os tecidos circundantes com uma pinça, puxe a VCI para cima e para a esquerda para produzir tensão na pequena área entre a VCI e a aorta, precisamente entre a VCI e a veia renal esquerda. Insira um segundo par de pinças entre a aorta e a VCI e abra e feche a pinça não mais do que três a cinco vezes para fazer um furo. É muito importante fazer o orifício precisamente no ponto em que a VCI converge com a veia renal esquerda.

Usando a mão esquerda, coloque um pedaço de dois centímetros de sutura de prolene inerte 7-0 no lado esquerdo da cavidade peritoneal, perto da VCI, e puxe a VCI para cima e para a esquerda novamente. Insira a segunda pinça no orifício entre a aorta e a VCI para que as pontas apareçam do outro lado da VCI e puxe a sutura de volta pelo orifício. Faça um nó provisório solto e coloque um espaçador de agulha de calibre 30, dobrado em um gancho, no nó.

Depois de apertar o nó, remova o espaçador e use um cotonete para retornar os intestinos à cavidade peritoneal. Usando alças contínuas, feche o peritônio com uma sutura VICRYL 6-0 e feche a pele com grampos de metal. Injete subcutaneamente no camundongo 0,5 mililitros de glucosalina a 37 graus Celsius.

Em seguida, coloque o camundongo em uma gaiola individual em uma câmara de 25 graus Celsius contendo comida e água em gel com monitoramento até a recuperação total. A indução de estenose na VCI inicia uma distorção e estagnação do fluxo sanguíneo, resultando no desenvolvimento de um trombo estruturalmente semelhante aos trombos venosos profundos observados em humanos e que é facilmente visualizado macroscopicamente. Além disso, o dímero D elevado, produto da degradação da fibrina, é observado no plasma neste modelo de estenose da VCI, indicando a presença de um processo trombótico ativo semelhante ao observado em humanos.

Embora a maioria dos animais experimentais tenha produzido trombos neste modelo, uma grande desvantagem é a variabilidade dentro do tamanho dos trombos observados entre os animais. Uma vez dominada, essa técnica pode ser concluída em 15 minutos se for executada corretamente. Após seu desenvolvimento, essa técnica abriu caminho para pesquisadores no campo da trombose venosa explorarem os mecanismos da TVP em um modelo de camundongo.